目錄:北京索萊寶科技有限公司>>層析介質(zhì)(蛋白純化)>>層析填料樹脂>> C8930DEAE纖維素 DE-52 層析填料樹脂
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100g |
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貨號 | C8930 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | DEAE-纖維素,它采用平均粒徑為50μm的顆粒型親水高分子聚合物,表面又用大分 |
DEAE纖維素 DE-52 層析填料樹脂
有效期 | 180天 |
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別名 | DEAE纖維素52;離子交換纖維素;DEAE纖維素DE52 |
英文名稱 | Cellulose DE-52 |
CAS | 9013-34-7 |
儲存條件 | 2-8℃ |
外觀(性狀) | 白色粉末 |
單位 | 瓶 |
DEAE-纖維素,它采用平均粒徑為50µm的顆粒型親水高分子聚合物,表面又用大分子糖鏈接枝,使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性,保持更高載量,同時又具有更好的分辨率。由于比表面積大,平衡和洗脫的時間也更短。它經(jīng)過接枝即使是純化病毒,質(zhì)粒等超大分子的物質(zhì),載量基本保持不變。
填料特征:
特點 | 載量大,分辨率好,使用方便。 |
性狀 | 白色或淡黃色纖維結塊狀 |
基質(zhì) | 高度交聯(lián)纖維素 |
配基 | 二乙基氨基乙基 |
配基密度 | 40μmol /ml |
吸附載量 | 110mg HSA/ml |
填料的顆粒大小 | 50μm |
大流速 | 100cm/h |
pH范圍 | 3-10,在位清洗時pH范圍可到2-11 |
化學穩(wěn)定性 | 各種緩沖液及鹽,醋酸等 |
物理穩(wěn)定性 | 0.1M中性緩沖液中,120℃30min |
保存溫度 | 4℃ |
注意事項:
1、 色譜柱裝填
(1)所需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣,液體做脫氣處理。填料可直接稱量需要的量用緩沖液溶漲一小時裝柱即可,如果不好溶脹,可適當加熱。
(2)在柱子下端加入20%乙醇,以除去柱子中的空氣,關閉柱子出口,在柱內(nèi)保留少量的20%乙醇。20%乙醇容易產(chǎn)生氣泡,可以在里面加1%吐溫避免氣泡產(chǎn)生。也可以換成純水裝柱子,但是需要把填料中的20%乙醇也換成純水,具體的方法取需要體積的填料在抽濾漏斗上進行,也可以小心傾去填料上的20%乙醇,再換成5倍體積的純水,反復沉淀去上清,5次左右就可以用于裝柱子。
(3)此填料顆粒比較細,所以一定要注意柱子要選擇合適的篩網(wǎng),不能漏,也可以取點填料加到篩網(wǎng)上試試,如果沒有問題再將填料連續(xù)倒入柱子時,要用玻璃棒的緊靠柱子內(nèi)壁引流,以減少氣泡的產(chǎn)生,讓填料先自然沉降到填料體積不再變化,而填料和上面的液體很好分層,上層溶液*澄清,就可以開泵用適當?shù)牧魉賶褐樱盍象w積不再變化后,再把轉換頭緊頂在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于裝柱子的流速。
(4)在裝柱子前,填料從冰箱中取出少要室溫放置2-3個小時,這樣避免裝柱子時由于溫度變化而使柱子中產(chǎn)生氣泡。
2、 蛋白的結合
樣品的鹽濃度和pH要盡量和平衡柱子的緩沖液一致,鹽濃度過高或者pH帶低也許掛不上,所以要根據(jù)自己的樣品做適當調(diào)整。
3、 蛋白的洗脫
這個填料如果采用線性梯度洗脫,柱子的直徑和高度比是大于10,數(shù)值越大越有利于分離,而且樣品別上太多,可以按約10mg/ml上樣,如果采用階段洗脫的方法,裝短粗柱子就可以,上樣量也沒有限制。階段洗脫容易放大,重復性好,如果洗脫條件好*可以得到和線性梯度一樣或者更好。采用什么方法*根據(jù)自己需要。
4、 再生清洗
(1)用完之后用0.1M 醋酸洗5個柱體積,然后用2M NaCl洗5個床體積,再用水洗中性,然后用20%乙醇保存。
(2)有機溶劑和水混合很容易產(chǎn)生氣泡,為了避免這樣情況,可以把配好的有機溶劑在室溫放置過夜,再使用,這樣可以避免氣泡進柱子而導致柱子不能正常使用。
特別注意:
上樣之前,樣品少用0.45微米膜過濾,盡量去除色素,否則色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用。
在使用過程中,不能使用強酸強堿,酸和堿的濃度應低于0.15摩爾。
相關文獻:
《Macrophage immunomodulatory activity of the cationic polymer modified PLGA nanoparticles encapsulating Alhagi honey polysaccharide》 作者:Adelijiang Wusiman,Jin He,Tianyu Zhu,Zhenguang Liu,Pengfei Gu,Yuanliang Hu,Jiaguo Liu,Deyun Wang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:
《Hypoglycemic activity and gut microbiota regulation of a novel polysaccharide from Grifola frondosa in type 2 diabetic mice》 作者:Yuqing Chen,Dan Liu,Dingyi Wang,Shanshan Lai,Ruting Zhong,Yuanyuan Liu,Chengfeng Yang,Bin Liu 期刊:Food and Chemical Toxicology 影響因子:3.977 PMID:30826407
DEAE纖維素 DE-52 層析填料樹脂