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更新時(shí)間:2021-11-23 10:52:49瀏覽次數(shù):1714評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品名稱:BD Leuko Act Cktl 細(xì)胞因子刺激劑
產(chǎn)品貨號(hào): 550583
產(chǎn)品規(guī)格:200 µL
產(chǎn)品品牌:BD
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
通過(guò)細(xì)胞內(nèi)染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子積累的最關(guān)鍵步驟是分離和激活細(xì)胞群,以誘導(dǎo)產(chǎn)生感興趣的細(xì)胞因子。如果沒有適當(dāng)激活的產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞,在蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑的存在下培養(yǎng),檢測(cè)細(xì)胞因子在細(xì)胞內(nèi)積聚的能力在大多數(shù)情況下會(huì)嚴(yán)重受損。各種體外方法已經(jīng)報(bào)道刺激細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子。多克隆激活劑在誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞方面特別有用。這些激活劑包括以下:炮豆蛋白A、脂多糖、佛波酯加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、葡萄球菌腸毒素B和針對(duì)TCR/CD3復(fù)合物亞單位的單克隆抗體(含或不含針對(duì)共刺激受體的抗體,如CD28)。
PMA (phorbol 12-Myristate 13-Acetate)一種鈣離子載體(Ionomycin)和蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑。這種混合物可能被用來(lái)誘導(dǎo)來(lái)自T細(xì)胞的主要細(xì)胞因子反應(yīng)。使用這種雞尾酒刺激細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞因子,這些細(xì)胞因子位于細(xì)胞因子產(chǎn)生細(xì)胞的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。這種細(xì)胞因子的定位是由蛋白質(zhì)運(yùn)輸抑制劑成分Brefeldin A引起的,它可以阻斷細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程。細(xì)胞中細(xì)胞因子蛋白水平的增加,增強(qiáng)了免疫熒光染色和流式細(xì)胞分析對(duì)細(xì)胞因子產(chǎn)生細(xì)胞的檢測(cè)能力。每100µL小瓶的內(nèi)容物足以處理多達(dá)50 mL的細(xì)胞培養(yǎng)物(在~10^6細(xì)胞/mL);因此可刺激≥5 × 10^7細(xì)胞。
準(zhǔn)備和存儲(chǔ)
在使用前將產(chǎn)品儲(chǔ)存在-80°C或長(zhǎng)期存儲(chǔ)庫(kù)存溶液。
推薦的試驗(yàn)程序
使用GolgiPlug:在水浴中在37°C快速解凍雞尾酒,每1 mL細(xì)胞培養(yǎng)(例如,~10^6細(xì)胞/mL)加入2µL的雞尾酒,并*混合。將培養(yǎng)物置于37°C濕化CO2培養(yǎng)箱中4-6小時(shí)。
活化后,用FACS染色緩沖液(如 Pharmingen染色緩沖液、胎牛血清,用于抗體染色。
用白細(xì)胞激活雞尾酒治療受刺激的細(xì)胞4至6小時(shí),BD GolgiPlug通過(guò)免疫熒光染色顯著提高檢測(cè)細(xì)胞因子產(chǎn)生細(xì)胞的能力。推薦GolgiPlug的白細(xì)胞激活雞尾酒在細(xì)胞培養(yǎng)中保存時(shí)間不超過(guò)12小時(shí)。
GolgiPlug被發(fā)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色有不同的影響,是時(shí)間、激活劑和細(xì)胞因子依賴的,因此研究人員可能根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定激活細(xì)胞超過(guò)4-6小時(shí)的需要。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
貨號(hào) 名稱 規(guī)格
550583 Leuko Act Cktl 細(xì)胞因子刺激劑 2×100 µL
產(chǎn)品名稱:BD Leuko Act Cktl 細(xì)胞因子刺激劑
產(chǎn)品貨號(hào): 550583
關(guān)于公司:
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