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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),制藥 |
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Cebrary® Gastric Cancer Organoid Growth Medium(Human)胃癌類器官生長培養(yǎng)基是一種無血清可應用于細胞或組織來源的胃癌類器官的建立和長期培養(yǎng)過程,在細胞外基質存在的條件下,培養(yǎng)基所含 組分及豐富的細胞因子能促使胃癌細胞迅速生長成并形成胃癌類器官,類器官形成過程平穩(wěn)且迅速,同時保持較高的胃癌細胞特性和活力,為后續(xù)基于胃癌類器官的生理功能、疾病研究和精準醫(yī)學提供支持。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規(guī)格 | ||
41428ES50 | 41428ES60 | 41428ES76 | ||
41428-A | Gastric Cancer Organoid Growth Medium(Human)胃癌類器官生長培養(yǎng)基 | 45 mL | 90 mL | 450 mL |
41428-B | Nutritional components 1(10×)營養(yǎng)組分1(10×) | 5 mL | 10 mL | 50 mL |
運輸與保存方法
-20℃儲存,有效期1年;2-8℃儲存,有效期1月。
產品應用
無菌操作條件下配制胃癌類器官 培養(yǎng)基。以下是準備100 mL 培養(yǎng)基操作流程,如所需量不同,可相應調整用量。
1. 將營養(yǎng)組分1室溫解凍或者2-8℃過夜緩融。避免反復凍融,現配現融;
2. 將基礎培養(yǎng)基90 mL冰箱取出恢復至室溫;
3. 將10 mL營養(yǎng)組分1加入到基礎培養(yǎng)基內,均勻混合;如暫不使用,短時2-8℃儲存。
4. 使用時可加入1%雙抗使用。
人源胃癌原代培養(yǎng)
取材:標本離體后,盡快取材。采用無菌器械,保證無菌環(huán)境,將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的 15 mL 離心管中,4℃轉運。
清洗:在生物安全柜中取出樣品管,去除組織保存液,加入適量冷的添加有雙抗的 PBS,反復清洗后,去除 PBS。
重復清洗:重復第 2 步驟 3 次。
組織處理:去除 PBS緩沖液后,將組織塊移至 10 cm 含 10 mL 冷原代 組織保存液的無菌培養(yǎng)皿中,用無菌眼科 將 碎(直徑約 0.5mm-1mm)。
重復清洗:使用常溫 PBS,重復清洗 3 次。
收集組織碎片,加入消化20-30 min,過70 um篩網,收集胃癌細胞。
紅細胞裂解:加入 10 mL 紅細胞裂解緩沖液,室溫下在翹板搖床上搖10min。
重復清洗:裂解完畢,使用常溫 DMEM/F12,重復第 2 步驟 3 次。
類器官種板:調整細胞密度為2~3×106,與基質膠1:1均勻混合,將細胞混懸液以40-60ul每孔種在24孔板中,37℃放置15-30 min,加入預熱的類器官培養(yǎng)液,每個孔 750 uL。
類器官培養(yǎng):將培養(yǎng)板放在 37℃ CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 每 2 天更換培養(yǎng)液。加入培養(yǎng)液時,吸頭朝向側壁,緩慢加入。
類器官觀察:每天觀察類器官并拍照,了解初始類器官數量、增殖速 度、形態(tài)、微生物污染情況等。
注意事項
1. 產品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進行。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. 本產品僅供科研使用,禁止用于人體。