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產(chǎn)品信息

Ceturegel™ Matrix GFR，LDEV-Free 基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出來(lái)的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長(zhǎng)因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF等相關(guān)因子。Ceturegel™ GFR基質(zhì)膠是經(jīng)特殊處理后得到的低生長(zhǎng)因子基質(zhì)膠，能有效保證一些需要低生長(zhǎng)因子條件下的實(shí)驗(yàn)操作所需，如與信號(hào)通路和生長(zhǎng)因子相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。在室溫條件下，聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化，可用于對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達(dá)等的研究。

基質(zhì)膠形成的三維培養(yǎng)基質(zhì)，可促進(jìn)上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、塞爾托利氏細(xì)胞、黑色素瘤細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、甲狀腺細(xì)胞及毛囊細(xì)胞等的貼壁與分化。CeturegelTM基質(zhì)膠能影響成鼠肝臟細(xì)胞和人乳腺上皮細(xì)胞三維培養(yǎng)物的基因表達(dá)。同時(shí)，CeturegelTM 基質(zhì)膠可用作多種腫瘤細(xì)胞侵襲研究的基本支架，體內(nèi)外血管新生研究的基質(zhì)，以及體內(nèi)動(dòng)物模型移植瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的三維支架。CeturegelTM基質(zhì)膠還能支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細(xì)胞的分化。

YEASEN 基質(zhì)膠為無(wú)菌制品，濃度為8~20 mg/mL，滿足多種實(shí)驗(yàn)要求。

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸與保存方法

干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期兩年。

產(chǎn)品應(yīng)用

1. Ceturegel^TM基底膜/基質(zhì)膠的融化與保存

【注】：Ceturegel^TM基質(zhì)膠對(duì)溫度非常敏感，千萬(wàn)不可多次重復(fù)凍融。Ceturegel^TM基質(zhì)膠的分裝以及凝膠前的準(zhǔn)備過(guò)程中都必須在冰上（4℃）操作，因?yàn)闇囟壬晕⑻岣?，都很可能出現(xiàn)成膠現(xiàn)象，從而導(dǎo)致基質(zhì)膠不均勻或者影響后續(xù)的凝膠。用來(lái)盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進(jìn)行預(yù)冷。

a）收到產(chǎn)品后，如果暫時(shí)不使用，請(qǐng)整瓶直接放到-20℃凍存（不要放在無(wú)霜冰箱內(nèi)）。

b）第一次使用，將整瓶Ceturegel^TM基質(zhì)膠放入冰盒內(nèi)再放到4℃過(guò)夜，使其充分融解。建議：在4℃ 14000 rpm離心20 min，小心吸取上清。

2. Ceturegel^TM基底膜/基質(zhì)膠的使用特別注意

基質(zhì)膠在22-35℃能夠快速成膠。為了保證Ceturegel^TM基質(zhì)膠的成膠性能與穩(wěn)定性，最終稀釋濃度不應(yīng)低于3 mg/mL（Ceturegel^TM基質(zhì)膠原液的濃度因批次不同有差異）?？捎脽o(wú)血清培養(yǎng)基來(lái)稀釋Ceturegel^TM基質(zhì)膠，稀釋后需要立即使用。

A. 薄膠制備方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel^TM 基質(zhì)膠。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，按50 μL/cm2生長(zhǎng)面積的濃度加入Ceturegel^TM基質(zhì)膠。

3）在37℃放置30min，此時(shí)平板即可使用。

B. 厚膠制備方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel^TM基質(zhì)膠。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，將培養(yǎng)的細(xì)胞與Ceturegel^TM基質(zhì)膠混合，用遇冷的槍頭使細(xì)胞懸浮均勻。按照150-200 μL/cm2生長(zhǎng)面積的濃度加入CeturegelTM基質(zhì)膠。

3）在37℃放置30min，此時(shí)即可加入細(xì)胞培養(yǎng)液。細(xì)胞也可生長(zhǎng)在此厚膠的上層。

C．薄層包被方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Ceturegel^TM基質(zhì)膠。

2）采用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋Ceturegel^TM基質(zhì)膠到需要的濃度。建議根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)做個(gè)梯度實(shí)驗(yàn)，從而確定最佳的包被濃度。

3）將稀釋的Ceturegel^TM基質(zhì)膠加入需要包被的培養(yǎng)器皿中，包被量至少覆蓋細(xì)胞的所有生長(zhǎng)表面。室溫下孵育1小時(shí)。

4）去除未凝固結(jié)合的Ceturegel^TM基質(zhì)膠，用無(wú)血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。此時(shí)平板即可使用。

【注】：Ceturegel^TM基底膜/基質(zhì)膠包被的平板最好當(dāng)天使用，但也可根據(jù)具體應(yīng)用調(diào)整。包被好的平板加入培養(yǎng)基后，在37℃最久可存放1周。

產(chǎn)品特性

Ceturegel^TM基質(zhì)膠會(huì)有色差變化（淡黃色到深紅色），是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的，但是與5% CO2平衡后色差即會(huì)減少。凍融后，輕輕搖晃試劑瓶使Ceturegel^TM基質(zhì)膠分散均勻。所有操作均需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，試劑瓶瓶蓋可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Ceturegel^TM基質(zhì)膠呈勻漿狀。

細(xì)胞可在0.5 mm厚度的Ceturegel^TM基質(zhì)層表面生長(zhǎng)，也可在1 mm厚度的Ceturegel^TM基質(zhì)膠三維基質(zhì)內(nèi)生長(zhǎng)。過(guò)度稀釋的Ceturegel^TM基質(zhì)膠會(huì)形成非膠質(zhì)的蛋白層，可以用于細(xì)胞貼壁，但不能用于細(xì)胞的分化研究。

【注】：可將融化后的Ceturegel^TM分裝在多個(gè)小管，所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管，迅速冷凍并保存，避免多次凍融。

Ceturegel^TM在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠，因此融化時(shí)在4℃冰上過(guò)夜解凍（4℃時(shí)會(huì)隨著溫度的上升部分成膠）。所有用品在使用前需置于冰浴，必須使用預(yù)冷的移液管、吸頭及小管操作Ceturegel^TM基質(zhì)膠。成膠后的Ceturegel^TM基質(zhì)膠可以在4℃ 24－48小時(shí)后重新呈液態(tài)。

注意事項(xiàng)

1. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，與產(chǎn)品接觸的實(shí)驗(yàn)器材（如：槍頭、產(chǎn)品管等）使用前需預(yù)冷。

2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅供科研使用，禁止用于人體。

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HB220331