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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
|---|
產品介紹
Super ECL Detection Reagent
ECL化學發(fā)光超敏顯色試劑盒
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
Super ECL Detection Reagent ECL化學發(fā)光超敏顯色試劑盒 | 36208ES60 | 100 mL | 4℃，避光 | 395.00 |
36208ES76 | 500 mL | 4℃，避光 | 1655.00 |
產品描述
ECL化學發(fā)光超敏顯色試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶（HRP）的抗體及其關聯的抗原。其原理是，蛋白質或核酸在電泳后轉移到印跡膜上，以一抗及HRP標記的二抗結合膜上的目的蛋白，或以HRP標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產品配制的ECL工作液，室溫孵育膜數分鐘，將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數秒到數小時，顯影定影后蛋白質或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。
本試劑盒采用了*的發(fā)光底物系統(tǒng)，ECL化學發(fā)光超敏顯色試劑盒是目前///靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑。
產品特點
1）具有*靈敏度和高信噪比，可檢測低皮克級抗原；
2）發(fā)光迅速，亮度強，可在日光燈下觀察到印跡膜條帶；
3）持續(xù)發(fā)光時間長，熒光可使X光膠片感光達5小時以上，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測；
4）可使用更高的抗體稀釋倍數(1∶2000～1∶10000)，大大節(jié)省抗體。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規(guī)格 | ||
36208ES60（100 mL） | 36208ES76（500 mL） | 36208ES80（1000 mL） | ||
36208-A | A液 | 50 mL | 250 mL | 500 mL |
36208-B | B液 | 50 mL | 250 mL | 500 mL |
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產品4oC避光保存，有效期一年。
操作方法
1. 執(zhí)行常規(guī)電泳、轉膜、HRP標記抗體或者HRP標記核酸探針孵育、洗膜。
【注】：ECL發(fā)光液是HRP的顯色底物，因此檢測系統(tǒng)終必須基于HRP酶標記抗體或者核酸探針。
2. 后一次洗膜的同時，新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的A液和B液，混勻后，室溫放置備用。
【注】：建議立即使用工作液，室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。
3. 用平頭鑷取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液，勿使膜*干燥。將膜*浸入發(fā)光工作液（125μL發(fā)光工作液/cm2膜）中，與發(fā)光工作液充分接觸。室溫孵育3分鐘，準備立即壓片曝光。
【注】：孵育時間過長不會增加靈敏度，有時還會導致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質是酶促反應，使用過少的發(fā)光工作液不利反應進行，也會導致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度。為達節(jié)約目的可將膜剪小，但勿降低發(fā)光液使用比例。
4. 用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。
5. 在X光膠片暗盒內表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將印跡膜貼在保鮮膜上，將保鮮膜折起來*包裹印跡膜，去除氣泡和皺褶，可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋印跡膜的保鮮膜固定在暗盒內，蛋白帶面向上。
6. 暗房內壓X光膠片，分別曝光不同的時間，如數秒到數分鐘。顯影沖洗。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2）步驟1~5可在日光燈下操作；但發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免。戴手套可以避免在膜上留下手印，保持膜的干凈。
3）長時間曝光或蛋白過量，將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。曝光不足則條帶模糊。
4）發(fā)光工作液孵育約3分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可使X光膠片曝光。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時間。肉眼不可見的熒光實際上可持續(xù)數小時并使X光膠片感光，因此弱帶可曝光1~10小時。如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光和曝光。
5）由于超敏發(fā)光液極其靈敏，強烈推薦大多數進口抗體起始濃度為一抗1∶1000~1∶4000，二抗1∶2000~1∶5000?？贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶，導致失敗。
6）某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光，應選擇高質量保鮮膜。
7）使用肉眼可見的預染色蛋白Marker和熒光-放射自顯影曝光標簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小。
8）疊氮化///鈉（NaN3）能抑制HRP活性，若回收HRP標記探針或者抗體應避免使用NaN3，如必需使用勿超過0.01%。
9）本品無特殊毒性，按普通化學品處理。
HB200701
