凱杰Qiagen74034小樣本RNA提取試劑盒RNeasy Plus Micro Kit 50T

凱杰QIAGEN在生命科學(xué)研究、應(yīng)用檢測(cè)、制藥、和分子診斷領(lǐng)域獲得成功和突破性進(jìn)展。

74034 凱杰Qiagen小樣本RNA提取試劑盒50T RNeasy Plus Micro Kit ，產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品品牌：Qiagen
產(chǎn)品貨號(hào)：74034
產(chǎn)品名稱：小樣本RNA提取試劑盒
英文名稱：RNeasy Plus Micro Kit
產(chǎn)品規(guī)格：50T

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74034 凱杰Qiagen小樣本RNA提取試劑盒50T RNeasy Plus Micro Kit ，產(chǎn)品說明：

適用于 50 微量制備：RNeasy MinElute 離心柱、gDNA 去掉離心柱、收集管、載體 RNA、不含 RNase 的水和緩沖液

For 50 micropreps: RNeasy MinElute Spin Columns, gDNA Eliminator Spin Columns, Collection Tubes, Carrier RNA, RNase-Free Water and Buffers

特征

l  使用du特的gDNA消除柱或板高效去除gDNA（無(wú)需DNase）

l  使用快速簡(jiǎn)單的提取方案在幾分鐘內(nèi)獲得高質(zhì)量的總RNA

l  無(wú)酚RNA分離

l  96孔形式的高通量處理

l  適用于實(shí)時(shí) RT-PCR 和 RNA-seq 等敏感應(yīng)用

產(chǎn)品詳情

RNeasy Plus 試劑盒是下一代 QIAGEN RNA 提取試劑盒，將高質(zhì)量 RNA 純化與du特的 gDNA 消除柱或板的有效 gDNA 去除相結(jié)合。從各種培養(yǎng)細(xì)胞和易于裂解的組織中獲得高純度和高產(chǎn)量的總RNA。RNeasy Plus 微量試劑盒專為數(shù)量有限的樣品而設(shè)計(jì)，可分離出高達(dá) 45 μg 純總 RNA RNeasy Plus 迷你試劑盒可從單次提取中純化高達(dá) 100 μg 的總 RNA （>200 nt），并具有高效的 gDNA 去除功能。兩種試劑盒都可以在QIAcube Connect上實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，并且可以使用RNAprotect組織試劑或Allprotect組織試劑方便地穩(wěn)定樣品，并使用TissueRuptor II或TissueLyser II或LT系統(tǒng)（單獨(dú)提供）有效地破碎樣品。RNeasy Plus 96 試劑盒用于從 96 孔板中生長(zhǎng)的培養(yǎng)細(xì)胞中高通量純化總 RNA。為了獲得*佳效果，建議將本產(chǎn)品與QIAvac 96系統(tǒng)一起使用。

RNeasy Plus Mini標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案也可以使用TRACKMAN Connected系統(tǒng)執(zhí)行，該系統(tǒng)與Pipetman M Connected移液器配對(duì)，兩者都來自Gilson。TRACKMAN Connected 系統(tǒng)可指導(dǎo)研究人員完成 RNeasy Plus Mini 實(shí)驗(yàn)方案，同時(shí)自動(dòng)調(diào)整支持藍(lán)牙的 PIPETMAN M Connected 移液器設(shè)置。記錄協(xié)議執(zhí)行的每個(gè)步驟，通過生成全面的運(yùn)行報(bào)告來加速報(bào)告。

Performance

使用 RNeasy Plus 微型和迷你試劑盒從細(xì)胞和組織中提取 RNA，可實(shí)現(xiàn)高、可重復(fù)的 RNA 產(chǎn)量和高效的基因組 DNA 消除，適用于敏感應(yīng)用.常規(guī)從組織和培養(yǎng)細(xì)胞中獲取安捷倫 RIN 值接近 10 的總 RNA。

RNeasy Plus 微量和迷你試劑盒還可富集 mRNA，因?yàn)榇蠖鄶?shù) RNA<200 個(gè)核苷酸（如 rRNA 和 tRNA）被排除在外。為了從培養(yǎng)的細(xì)胞中分離含有小RNA（例如miRNA）的總RNA，可以使用其他RNA分離方案，并在RNeasy Plus微型手冊(cè)中描述，并作為RNeasy Plus迷你試劑盒的單獨(dú)補(bǔ)充方案。

RNeasy Plus 96 試劑盒與多種細(xì)胞系兼容，可純化安捷倫 RIN 值接近 10 的高質(zhì)量 RNA。通過試劑盒wan全去除基因組DNA可在高靈敏度應(yīng)用中進(jìn)行特異性轉(zhuǎn)錄本檢測(cè)，例如低豐度靶標(biāo)的定量實(shí)時(shí)RT-PCR分析。此外，從102到106細(xì)胞的可靠RNA純化允許在寬動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)進(jìn)行實(shí)時(shí)RT-PCR定量

Principle

RNeasy Plus程序?qū)?span>QIAGEN用于雙鏈DNA選擇性結(jié)合的創(chuàng)新技術(shù)與成熟的RNeasy技術(shù)相結(jié)合。保證高質(zhì)量RNA的高效純化，無(wú)需額外的DNA酶消化。純化的RNA即用型，非常適合對(duì)少量DNA污染敏感的下游應(yīng)用，例如定量實(shí)時(shí)RT-PCR。

細(xì)胞和易于裂解的組織首先在高度變性的含異****的緩沖液RLT Plus中裂解和勻漿，該緩沖液可立即滅活RNA酶以確保分離完整的RNA。然后將裂解物通過gDNA消除器離心柱或gDNA消除器96板，該板與高鹽緩沖液結(jié)合使用，選擇性地有效地去除基因組DNA。加入乙醇以提供適當(dāng)?shù)?span>RNA結(jié)合條件，并將樣品施加到RNeasy離心柱或96孔板上。這些專用色譜柱和 96 孔板含有硅膠膜，可特異性結(jié)合裂解細(xì)胞的 RNA。

對(duì)于脂肪和難以裂解的組織，建議使用 RNeasy Plus 通用試劑盒。為了從其他樣品類型中分離總RNA（包括miRNA），我們建議使用miRNeasy試劑盒。

Procedure

RNeasy Plus 微量試劑盒可從多達(dá) 5 x 10 5 個(gè)細(xì)胞或5 mg 組織中純化總 RNA，RNeasy Plus 迷你試劑盒可從多達(dá) 10 個(gè)7 個(gè)細(xì)胞或 30 mg 組織中分離總 RNA。短的工作流程可在不到 25 分鐘的時(shí)間內(nèi)完成 RNA 分離和基因組 DNA 去除。首先裂解樣品并進(jìn)行均質(zhì)化。裂解物通過gDNA消除器離心柱，將乙醇添加到流通中，并將樣品施加到RNeasy離心柱上。RNA與膜結(jié)合，污染物被沖走。使用 RNeasy Plus 微量試劑盒在低至 14 μl 水中洗脫高質(zhì)量 RNA，或使用 RNeasy Plus 迷你試劑盒在 30 μl 水中洗脫。

不同的實(shí)驗(yàn)方案可用于不同的起始材料。該方案的主要區(qū)別在于樣品的裂解和均質(zhì)化。一旦將樣品應(yīng)用于gDNA消除器離心柱，實(shí)驗(yàn)方案就相似了。該程序?yàn)?span>mRNA提供了富集，因?yàn)榇蠖鄶?shù)RNA<200個(gè)核苷酸（如rRNA和tRNA）被排除在外。

在 RLT Plus 緩沖液（隨 RNeasy Plus 迷你試劑盒隨附）中破碎和均質(zhì)組織時(shí)，可能會(huì)出現(xiàn)過度起泡。通過在開始破碎和均質(zhì)化之前將試劑DX（單獨(dú)提供）添加到緩沖液RLT Plus中，可以大大減少這種起泡。試劑DX已使用試劑盒進(jìn)行了仔細(xì)測(cè)試，對(duì)RNA純度或下游應(yīng)用沒有影響。

通過使用RNeasy 96板實(shí)現(xiàn)高通量RNA純化。在應(yīng)用于RNeasy 96板之前，細(xì)胞裂解物首先通過gDNA消除器96板。gDNA 消除器 96 板使用離心機(jī)（離心機(jī) 4-16）方便地進(jìn)行處理。使用 RNeasy 96 板進(jìn)行 RNA 純化是手動(dòng)的，包括 3 個(gè)簡(jiǎn)單步驟：結(jié)合、洗滌和洗脫。使用離心機(jī)（離心機(jī)4-16和板轉(zhuǎn)子2 x 96）或真空（QIAvac 96）和離心機(jī)的組合可以快速方便地處理板。使用離心機(jī)處理板時(shí)，*多可使用2 x 10 6個(gè)細(xì)胞作為起始材料，而使用真空和離心機(jī)處理板時(shí)，*多可使用1 x 106個(gè)細(xì)胞。該程序?yàn)?span>mRNA提供了富集，因?yàn)榇蠖鄶?shù)RNA<200個(gè)核苷酸（如rRNA和tRNA）被排除在外?？梢孕薷?span>RNeasy Plus程序，以允許從培養(yǎng)的細(xì)胞中純化含有小RNA（例如miRNA）的總RNA。

Applications

使用 RNeasy Plus 試劑盒純化的 RNA 非常適合對(duì)少量 DNA 污染敏感的下游應(yīng)用，例如 RNA-seq 和定量實(shí)時(shí) RT-PCR。純化的RNA也可用于其他應(yīng)用。

RNeasy Plus 微量試劑盒適用于小樣品，包括：

l  激光顯微解剖冷凍切片

l  細(xì)針抽吸物

RNeasy Plus 96 試劑盒易于純化 96 孔格式的 RNA，非常適合以下領(lǐng)域的高通量基因表達(dá)分析：

l  藥物發(fā)現(xiàn)

l  生物醫(yī)學(xué)研究

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