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PCR原理

　　DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，加入設(shè)計引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
　　但是，DNA聚合酶在高溫時會失活，因此，每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶，不僅操作煩瑣，而且價格昂貴，制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
　　發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大  taq酶[1]量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。
　　PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

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溴化鈉/鈉臭/鈉溴/Sodium bromide AR，99% 7647-15-6 RT，避光
碘酸鈉/Sodium iodate AR，99.8% 7681-55-2 RT，避光
偶氮苯/二苯基二氮烯/苯偶氮苯/二苯二亞胺/二苯二胺/Azobenzene AR，99% 103-33-3 RT
4-溴氯苯/對溴氯苯/對氯溴苯/4-氯-1-溴苯/1-溴-4-氯苯/1-氯-4-溴苯/4-BromoSFhlorobenzene SFSF 106-39-8 RT
4-溴聯(lián)苯/對溴聯(lián)苯/4-溴-1,1'-聯(lián)苯/4-溴代聯(lián)苯/4-溴雙苯/4-BromobiSFhenyl BR，99% 92-66-0 RT
暈苯/六苯并苯/冠/蔻/SForonene 特純，95% 191-07-1 RT
1,3-二溴苯/間二溴苯/1,3-Dibromobenzene BR，96% 108-36-1 RT
2,2-二羥基聯(lián)苯/2,2'-二羥基聯(lián)苯基/2,2ˊ-聯(lián)苯酚/鄰,鄰ˊ-聯(lián)苯酚/2,2'-聯(lián)苯二酚/雙苯醇/2,2'-BiSFhenol BR，99% 1806-29-7 RT
1,4-二甲氧基苯/對二甲氧基苯/對苯二酚二甲醚/氫醌二甲醚/氫醌二甲基醚/二甲基對苯二酚/對苯二甲醚/對甲氧基苯/二甲氧基苯烯/DMB SFSF，99% 150-78-7 RT
聯(lián)苯/苯基苯/聯(lián)二苯/1,1’-聯(lián)苯/BiSFhenyl SFSF 92-52-4 RT
 色標(biāo)  
碘代苯/碘苯/Iodobenzene SFSF，97% 591-50-4 RT，避光
4-甲氧基偶氮苯/對苯偶氮苯甲醚/對甲氧基偶氮苯/4-Methoxyazobenzene BR，97% 2396-60-3 RT
1,3,5-三溴苯/均三溴苯/1,3,5,-三溴代苯/對稱三溴苯/1,3,5-Tribromobenzene BR，98% 626-39-1 RT，避光
2,3-二氨基萘/2,3-萘二胺/DAN BR，97% 771-97-1 RT，避光
2,2-二羥基二硫代-6,6-聯(lián)萘/雙（6-羥基-2-萘）二硫/1，1-二氯-2，2-雙（4-）乙烷/2,2ˊ-二羥基-6,6ˊ-二萘二硫/6,6'-二硫-2,2'-二萘酚/DDD BR，95% 6088-51-3 RT，避光
1,4-二羥基萘/1,4-萘二酚/1，4-二氧萘酚/1,4-DihydroxynaSFhthalene BR，90% 571-60-8 RT，避光
1,5-二羥基萘/1,5-萘二酚/萘-1,5-二酚/1,5-DihydroxynaSFhthalene BR，97% 83-56-7 RT，避光
硫酸鋅/皓礬/七水硫酸鋅/鋅礬/ZinSF sulfate heSFtahydrate AR，99.5% 7446-20-0 RT
 4N  
氧化鋅/鋅氧粉/鋅華/白鉛粉/鋅白/環(huán)氧乙酰蓖麻油酸甲酯/中國白/鋅白銀/ZinSF Oxide AR，99% 1314-13-2 RT
 4N  
 基準(zhǔn)試劑