購(gòu)買HAKATA無(wú)外泌體胎牛血清貨號(hào)H-Exo-50 請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)上?；鄯f生物科技有限公司

品牌：HAKATA

貨號(hào)：H-Exo-50

產(chǎn)品名稱：無(wú)外泌體胎牛血清

規(guī)格;50Ml

有效期：五年

操作步驟： 1、Exosome-depleted FBS 粒徑檢測(cè) 1.1 取 Exosome-depleted FBS 和 Normal FBS 各 10ul 置于 1.5ml 離心管中； 1.2 加入 1ml PBS 充分混勻后，過(guò) 0.45uM 濾器，收集濾液在另一 1.5ml 離心管中； 1.3 動(dòng)態(tài)光散射儀(Dynamic Light Scattering，DSL)上檢測(cè)樣品 2、Exosome-depleted FBS 支原體檢測(cè) 2.1 取 Exosome-depleted FBS 100ul 置于 1.5ml 離心管中。 2.2 95℃加熱 2min，13000rpm 離心 1min，收集上清; 2.3 取上清液 5μL 作為模板進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。 2.4 按下表預(yù)先配制反應(yīng)混合液，以 20ul/管分裝至 PCR 反應(yīng)管中，在加 5ul 模板。

粒徑結(jié)果顯示，Normal FBS 在經(jīng)過(guò)外泌體去除步驟后，Exosome-depleted FBS 在 30-150nm 粒徑的成份被清除(藍(lán)框區(qū))，證明外泌體基本被清除； 支原體檢測(cè)顯示，Exosome-depleted FBS 無(wú)支原體污染；

公司簡(jiǎn)介：

上?；鄯f生物科技有限公司（簡(jiǎn)稱“慧穎生物")是一批由美國(guó)留學(xué)歸來(lái)的致力于服務(wù)中國(guó)生物領(lǐng)域的青年創(chuàng)辦的一家集生產(chǎn)、研發(fā)和技術(shù)服務(wù)的生物公司。公司自創(chuàng)辦以來(lái)，以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、快捷的速度和完善的售后服務(wù)，贏得生物界老師的厚愛(ài)。

慧穎生物成立于2012年，一直致力于生物細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域，堅(jiān)持助力細(xì)胞培養(yǎng)和酶免ELISA試劑盒的研發(fā)生產(chǎn)。2018年成立自主品牌“HAKATA"主營(yíng)產(chǎn)品為胎牛血清和其它種屬血清、無(wú)外泌體血清、傳代細(xì)胞、耐藥株、原代細(xì)胞、培養(yǎng)基及細(xì)胞培養(yǎng)輔助試劑，ELISA試劑盒和生化試劑。2023年順著市場(chǎng)拓展需求，公司在上海市松江曹農(nóng)科創(chuàng)園建立4000多平血清生產(chǎn)GMP車間，并擁有600多平細(xì)胞保藏細(xì)胞房用于細(xì)胞傳代和研究以及對(duì)每批次血清200株培養(yǎng)的驗(yàn)證和測(cè)試。

慧穎生物從采血、生產(chǎn)過(guò)濾、理化測(cè)試、上細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試、運(yùn)輸、技術(shù)支持，重視每一個(gè)環(huán)節(jié)，助力中國(guó)科研的突飛猛進(jìn)。

如何儲(chǔ)存和解凍血清？

未拆封的血清，一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至合適大小的無(wú)菌離心管內(nèi)，再放回冷凍。

將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，或通過(guò)水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。溶解后建議盡快使用，若長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃，血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。

解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物，該怎么處理?

胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后，也會(huì)存在于胎牛血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將胎牛血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。

解凍胎牛血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，胎牛血清會(huì)變得混濁，同時(shí)胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。

如何避免血清中產(chǎn)生沉淀？

1.解凍時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一；

2.分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻（小心勿造成氣泡）；

3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍，較大的溫差，易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀；

4.切勿將血清置于37℃過(guò)長(zhǎng)時(shí)間，否則可能使之渾濁，其中一些不穩(wěn)定的組分也會(huì)因此受到影響，最終降低血清的品質(zhì)；

5.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟；

6.若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并且保持搖晃均勻。溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。

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