小鼠 Leptin ELISA試劑盒|KIT說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供科研使用。用于體外定量檢測(cè)豬血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的IL-1β濃度。源于慧穎生物
小鼠 Leptin ELISA試劑盒|KIT說(shuō)明書(shū)簡(jiǎn)介:
小鼠瘦素蛋白是一個(gè)146個(gè)氨基酸的多肽激素,主要由脂肪細(xì)胞釋放,其主要作用是調(diào)控食欲的降低和能量消耗。但是,人們還發(fā)現(xiàn)瘦素蛋白在血管再生、骨代謝、造血及免疫調(diào)節(jié)上有重要的作用。瘦素可與丘腦下部的中央脊腹部的飽覺(jué)中樞結(jié)合,從而使得大腦得到食物充足的信號(hào),這樣瘦素的表達(dá)水平的高低就可達(dá)到調(diào)控能量攝入和機(jī)體的能量消耗作用。瘦素功能的實(shí)現(xiàn)主要跟瘦素受體結(jié)合后實(shí)現(xiàn)的,瘦素受體有兩類(lèi),一類(lèi)是固定細(xì)胞膜上的受體,主要通過(guò)JAK/STAT信號(hào)通路起作用,另一類(lèi)是游離的受體,這類(lèi)受體一般是丟失了受體的細(xì)胞膜內(nèi)的部分,游離出來(lái)的,根據(jù)失去的結(jié)構(gòu)不同,游離受體的種類(lèi)較多。人體內(nèi)游離的受體的產(chǎn)生主要是由金屬蛋白酶介導(dǎo)的細(xì)胞膜外功能域的脫落后形成的
檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)樣本中小鼠Leptin 的濃度。小鼠Leptin 捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)本或參考品時(shí),其中的小鼠Leptin 會(huì)與捕獲抗體結(jié)合,其它游離的成分通過(guò)洗滌的過(guò)程被除去。當(dāng)加入生物素化的抗小鼠Leptin 抗體后,抗小鼠Leptin 抗體與小鼠Leptin 接合,形成夾心的免疫復(fù)合物,其它游離的成分通過(guò)洗滌的過(guò)程被除去。隨后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親合素。生物素與親合素特異性結(jié)合,親合素連接的酶就會(huì)與夾心的免疫復(fù)合物連接起來(lái);其它游離的成分通過(guò)洗滌的過(guò)程被除去。zui后加入顯色劑,若樣本中存在小鼠Leptin 將會(huì)形成免疫復(fù)合物,辣根過(guò)氧化物酶會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè),讀其450nm處的OD值,Leptin 濃度與OD450值之間呈正比,通過(guò)參考品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),對(duì)照未知樣本中OD值,即可算出標(biāo)本中Leptin 濃度。
產(chǎn)品供應(yīng)商:上?;鄯f生物科技有限公司
1-2個(gè)工作日發(fā)貨,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),收到標(biāo)本起一周內(nèi)提供原始數(shù)據(jù)和zui終數(shù)據(jù)
ELISA各種樣本收集、處理、保存方法:
1. 血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置1-2 h或4℃過(guò)夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2. 血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3. 尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
4. 唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題及分析
問(wèn)題分析
若試驗(yàn)效果不好,請(qǐng)及時(shí)對(duì)顯色結(jié)果拍照,保留未用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后我公司為你解決問(wèn)題。同時(shí)您也可以參考以下資料:
問(wèn)題描述 | 可能原因 | 相應(yīng)對(duì)策 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)梯度差 | 吸液或加液不準(zhǔn) | 檢查移液器及吸頭 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確 | 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),反復(fù)吹打,確保*混勻 | |
洗滌不* | 保證洗滌時(shí)間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量 | |
顯色很弱或無(wú)色 | 孵育時(shí)間太短 | 保證充足的孵育時(shí)間 |
實(shí)驗(yàn)溫度不正確 | 使用推薦的實(shí)驗(yàn)溫度 | |
試劑提及不夠或漏加 | 檢查洗液及加液過(guò)程,保證所有試劑按順序足量添加 | |
稀釋不正確 | ||
讀數(shù)數(shù)值低 | 酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 | 在酶標(biāo)儀上檢查波長(zhǎng)及濾光片設(shè)置 |
提前打開(kāi)酶標(biāo)儀預(yù)熱 | ||
變異系數(shù)大 | 加液不正確 | 檢查加液情況 |
背景值高 | 檢測(cè)抗體的工作濃度 | 使用推薦的稀釋倍數(shù) |
酶標(biāo)板洗滌不* | 重新閱讀操作手冊(cè),保證清洗*;如果用自動(dòng)洗板機(jī), 請(qǐng)檢查所有的出口是否有堵塞 | |
洗液有污染 | 配置新鮮的洗液 | |
靈敏度低 | ELISA試劑盒保存 | 按照說(shuō)明書(shū)要求保存相關(guān)試劑 |
讀數(shù)前未終止 | OD讀數(shù)前應(yīng)在每孔中加入終止液 |
Human IL-8 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素8 96T/48T
Human IL-10 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素10 96T/48T
Human IL-17 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素17 96T/48T
Human IFN-γELISA KIT 人的伽馬干擾素 96T/48T
Human TNF-αELISA KIT 人的腫瘤壞死因子阿法 96T/48T
Human Adiponectin ELISA KIT 人的脂聯(lián)素 96T/48T
Human MMP-2 ELISA KIT 人的金屬蛋白酶2 96T/48T
Human BMP-2 ELISA KIT 人的骨形成蛋白2 96T/48T
Human IL-9 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素9 96T/48T
Human IL-18ELISA KIT 人白細(xì)胞介素18 96T/48T
Human IL-21ELISA KIT 人白細(xì)胞介素9 96T/48T
Human CRP ELISA KIT 人C反應(yīng)蛋白 96T/48T
Human BMP-6 ELISA KIT 人骨形成蛋白6 96T/48T
Human CCL2/MCP-1 ELISA KIT 人的單核細(xì)胞趨化蛋白1 96T/48T
Human IL-1β ELISA KIT 人白細(xì)胞介素1貝塔 96T/48T
Human IL-4 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素4 96T/48T
Human IL-6 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素6 96T/48T
Human TGF-β1 ELISA KIT 人的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子貝塔1 96T/48T
Human VEGF ELISA KIT 人的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 96T/48T
JEH-012 Human Leptin ELISA KIT 人的瘦素 96T/48T
Human IL-1αELISA KIT 人白細(xì)胞介素1阿法 96T/48T
Human IL-2 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素2 96T/48T
Human IL-13 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素13 96T/48T
Human G-CSF ELISA KIT 粒細(xì)胞集落刺激因子 96T/48T
Human GM-CSF ELISA KIT 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子 96T/48T
Human IL-5 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素5 96T/48T
Human MMP-9 ELISA KIT 人的金屬蛋白酶9 96T/48T
Human TIMP-1 ELISA KIT 金屬蛋白酶組織抑制因子 96T/48T
Human SCF ELISA KIT 人的干細(xì)胞因子 96T/48T
Human KGF/FGF-7 ELISA KIT 人的纖維生長(zhǎng)因子7/角蛋白檢測(cè)試劑盒 96T/48T
Human IL-22 ELISA KIT 人白細(xì)胞介素22 96T/48T
Human IGF-1 ELISA KIT 人的胰島素樣因子1 96T/48T
Human CCL19/ MIP-3 ELISA KIT 人的巨噬細(xì)胞炎癥蛋白3貝塔 96T/48T
Human CCL21/6Ckine ELISA KIT 人的次級(jí)淋巴組織趨化因子 96T/48T
Human TREM 1 ELISA KIT 人的髓系細(xì)胞觸發(fā)受體 96T/48T