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細(xì)胞名稱：HMVEC細(xì)胞，人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞簡介：
生長特性： | 貼壁生長
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細(xì)胞來源： | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn) |
培養(yǎng)條件： | 培養(yǎng)基：DMEM-H培養(yǎng)基+10%FBS（推薦HAKATA特級胎牛血清 貨號：HS-FBS-50） 氣相：空氣95%，二氧化碳5% 溫度：37℃ |
培養(yǎng)： | 貼壁細(xì)胞 1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代； 2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進(jìn)行傳代，*傳代比例為1:2。 3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶，置于37°孵育消化（*消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為zui佳消化時(shí)間，記錄zui佳消化時(shí)間，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后收集細(xì)胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，進(jìn)行傳代。 懸浮細(xì)胞 1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒，然后置于無菌操作臺，打開瓶口，輕輕吹打后，將其中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中，然后1200rpm離心3min，去上清； 2.將離心好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基，然后將其置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液（離心后去舊液，加入新鮮培養(yǎng)基）； 3.顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目比較多時(shí)，對其進(jìn)行傳代，*傳代比例為1:2（離心后平均分成兩瓶培養(yǎng)）。
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細(xì)胞總數(shù)： | 1~3*106 |
傳代周期： | 2-3天 |
傳代比例： | 1:2~1:4 |
換液頻率： | 2-3天 |
凍存液： | 90%FBS+10%DMSO |
注意事項(xiàng)：
1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用，請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細(xì)胞，若大部分細(xì)胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁，表明細(xì)胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉；若大部分細(xì)胞仍然不貼壁，將漂浮的細(xì)胞離心收集，用臺盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力，并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。
4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，以便于更好的幫您解決問題，超過時(shí)間我段，本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好，不免費(fèi)對后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進(jìn)行售后。
5 因細(xì)胞產(chǎn)品的特殊性，如客戶對本公司細(xì)胞質(zhì)量存有疑問，請于收到細(xì)胞后一個(gè)月內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系，超過時(shí)間段，本公司則默認(rèn)細(xì)胞質(zhì)量優(yōu)良，不承擔(dān)因細(xì)胞產(chǎn)生的任何責(zé)任。
HMVEC細(xì)胞，人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 相關(guān)產(chǎn)品：
品牌 貨號 名稱 規(guī)格
invitrogen 11668027 lipofectamine 2000 reagent 0.75 ml 脂質(zhì)體2000 0.75 ml
invitrogen 11668019 lipofectamine 2000 reagent 1.5 ml 脂質(zhì)體2000 1.5 ml
invitrogen L3000015 lipofectamine 3000 1.5ml 脂質(zhì)體3000 1.5 ml
invitrogen L3000008 lipofectamine 3000 0.75ml 脂質(zhì)體3000 0.75 ml
invitrogen 13778150 lipofectamine rnaimax 1.5ml aliquot RNAiMax 1.5 ml
invitrogen 13778075 lipofectamine rnaimax 0.75ml aliquot RNAiMax 0.75 ml
invitrogen 15596026 trizol reagent 100ml trizol 100ml
invitrogen 15596018 trizol reagent 200ml trizol 200ml
invitrogen 10296028 trizol ls reagent trizol LS 200ml
invitrogen 10296010 trizol ls reagent trizol LS 100ml
invitrogen 11789020 bp clonase ii enzyme mix BP酶 20 reactions
invitrogen 11791020 lr clonase ii enzyme mix LR酶 20 reactions
invitrogen 18064014 superscript ii 反轉(zhuǎn)錄酶II 10000 un
invitrogen 18080044 superscript iii rev transcript 反轉(zhuǎn)錄酶III 10,000 un
invitrogen 18080051 superscript iii 1st strand 反轉(zhuǎn)錄酶III試劑盒 50 reactions
invitrogen 10777019 rnaseout recomb.rnase inhib. RNase OUT 5000 units
Gibco 17504044 b 27 supplement B27 10ml
Gibco 12587010 b 27 supplement w/o vit a (50x B27（不含維生素A） 10ml
Gibco 17502048 n2 supplement 5ml N2 5ml
invitrogen 18374041 5' race reagent assy ver. 2.0 5’RACE 10 rxn
Gibco 25200056 0.25% trypsin edta (1x) phenol red 胰酶 100 ml
Gibco 25200072 0.25% trypsin edta (1x) phenol red 胰酶 500 ml
Gibco 15140122 penicillin streptomycin sol 100ml 雙抗 100 ml
invitrogen 10966034 platinum taq dna polymerase platinum taq DNA聚合酶 600 reactions
invitrogen 18418012 oligo(dt)12 18 primer oligo(dt)12 18 primer 25 ug
invitrogen 12033015 electromax dh10b t1 cells electromax dh10b t1 cells 0.5 ml (5 x 0.1 ml)
invitrogen s7567 SYBR GREEN I NUCLEIC A 1 ML SYBE Green I核酸凝膠染料 1ml
invitrogen 18047019 deoxyribonuclease i DNase I 20,000 un
Gibco 11811023 geneticin 1g G418 1g
Gibco 11811031 geneticin 5g G418 5g
Gibco 17100017 collagenase type i 1g 膠原酶I 1g
Gibco 17101015 collagenase type ii 1g 膠原酶II 1g
Gibco 17104019 collagenase type v 1g 膠原酶V 1g
Gibco 41500034 MEM培養(yǎng)基 10*1L
Gibco 12400024 DMEM/F12培養(yǎng)基 10*1L
Gibco 12200036 IMCM培養(yǎng)基 10*1L
BIOWEST G-10 西班牙瓊脂糖 100g
Roche 潮霉素B 1g/20ml
merck 蛋白酶K 100mg
東仁化學(xué) cck8-50 CCK8 500T
sigma D2650-100ML 二甲基亞砜dmso 100ml
Thermo K1622 RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit 100 reactions
相關(guān)主要細(xì)胞為：C666-1細(xì)胞，MREpic細(xì)胞株，HBMEC細(xì)胞 ，KGN細(xì)胞，IOSE80細(xì)胞，HUVEC細(xì)胞，HAEC細(xì)胞等，細(xì)胞活力好，狀態(tài)*，密度適宜，售后齊全，跟蹤及時(shí)到位！
