慧穎提供DLD-1細(xì)胞人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞形態(tài) 復(fù)蘇形式、凍存形式以及休眠狀態(tài)(僅限于冬季)狀態(tài)良好、飽滿、有光澤、*,全國各地均可發(fā)貨,全國統(tǒng)一價(jià)格!
產(chǎn)品名稱:DLD-1細(xì)胞
中文名稱:人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
細(xì)胞來源:人結(jié)直腸腺癌
種子來源:美國ATCC
細(xì)胞介紹:DLD-1細(xì)胞為人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,來源于人結(jié)直腸腺癌,中文名為人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,正常的細(xì)胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長。DLD-1 是1977-1979年間D.L. Dexter和同事分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。 在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNA fingerprinting和染色體組型分析表明這株細(xì)胞與HCT-15 (CCL-225)相似,說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。 他們的遺傳起源可通過DNA fingerprinting證實(shí),但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記*改變或數(shù)目上*改變。 細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)。 DLD-1 細(xì)胞的 p53 抗原表達(dá)呈陽性(p53 抗原產(chǎn)生了一個C -> T點(diǎn)突變導(dǎo)致241位的Ser -> Phe)。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 癌基因c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis 和fos的表達(dá)呈陽性。 癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。 表達(dá)腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2, CC-3, CC-4, CC-5 和 CC-6。 1979年提交到ATCC的培養(yǎng)物代數(shù)不明且污染了支原體。 其后經(jīng)過12周多種抗生素聯(lián)合培養(yǎng)處理。 處理之后每周用Hoechst染色和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法檢測。 其后連續(xù)11個月不加抗生素培養(yǎng),所有的檢測呈陰性。
培養(yǎng)條件:RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。
庫存狀態(tài):慧穎現(xiàn)貨
特惠價(jià)格:致電
DLD-1細(xì)胞人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞形態(tài)操作常見問題1:
培養(yǎng)液pH對細(xì)胞生長的影響有哪些?
由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2~7.4,偏離此范圍對細(xì)胞將產(chǎn)生不良的影響。各種細(xì)胞對pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。
但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更利于細(xì)胞生長。因此,我們在配制培養(yǎng)用液時(shí),可把液體的pH稍微調(diào)得偏酸一些。培養(yǎng)基在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時(shí),溶液的pH還會向上浮動0.2左右。
DLD-1細(xì)胞人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞形態(tài)操作常見問題2:
細(xì)胞傳代消化時(shí)所用胰酶濃度越高越好嗎?
不見得!因?yàn)橐鹊鞍酌溉芤旱南芰κ呛腿芤旱膒H、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關(guān)。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37 oC 其作用能力zui強(qiáng)。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。
培養(yǎng)細(xì)胞每次進(jìn)行傳代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反復(fù)沖洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以便于將含血清的培養(yǎng)基沖洗干凈,這樣就能大大提高消化液的消化能力。
細(xì)胞中心通常使用的消化液濃度為:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多數(shù)細(xì)胞傳代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA這種消化液。
DLD-1細(xì)胞人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞形態(tài)操作常見問題3:
培養(yǎng)細(xì)胞狀態(tài)欠佳原因有哪些:
1、 培養(yǎng)基的新鮮程度:一般加入血清后的*培養(yǎng)基,2周內(nèi)用完。否則血清有效成分失活,影響細(xì)胞培養(yǎng)。
建議:*培養(yǎng)基一次不要配太多,200ml以下?;蚋鶕?jù)用量決定。
2、 細(xì)胞外源微生物的污染:細(xì)胞不宜長期體外培養(yǎng),因?yàn)橥庠次⑸镂廴镜膸茁蚀蟠筇岣?。易發(fā)現(xiàn)和難發(fā)現(xiàn)的。影響細(xì)胞狀態(tài)。
建議:實(shí)驗(yàn)前凍存一批細(xì)胞,隔幾個月重新復(fù)蘇。即保證實(shí)驗(yàn)所用細(xì)胞代數(shù)*,又將外源污染的后果降到zui低。
3、 排除其他原因:如更換培養(yǎng)條件(血清、培養(yǎng)基等);使用器皿的潔凈程度;
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