MEF細胞
上?;鄯f生物常年供應大量細胞,涉及細胞有人正常細胞,人腫瘤細胞,動物正常細胞,動物腫瘤細胞。細胞種類較多,本展臺無法一一體現,有意愿購買細胞的客戶請及時和銷售客服咨詢是否有您需要的細胞。
MEF細胞
細胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結如下:
常見的污染如下:
1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。
仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現象!
可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理
2、霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。
CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用過氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。
其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。
預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞。,將環(huán)境*消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作
3、支原體:黑色的,好象多為多形,培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。
用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養(yǎng),無任何不良反應。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
4、黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現類似現象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率。
5、真菌:一般培養(yǎng)液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發(fā)現,但是一旦發(fā)現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
6、原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,zui終形成惡性循環(huán)。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等
關于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長 就是操作的問題。
也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(硫酸鏈霉素和氨芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。
1、孵箱應定期用三氧機消毒 或者 紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水
2、超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素
3、超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染
4、無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
MEF細胞 相關高品質細胞株細胞系主要有:
K562 1640 10% 慢性髓原白血病 懸浮
H128* DMEM 10% 小細胞肺癌 懸浮,集聚
H69 DMEM 10% 小細胞肺癌 懸浮
HS77 DMEM 10% 小細胞肺癌 懸浮
A549 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
LTEP-A2 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
SPC-A1* 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
D6 1640 10% 肺腺癌 上皮樣
LAX 1640 10% 肺腺癌 皮樣
NCI-H460 DMEM 10% 大細胞肺癌 上皮樣
95-D 1640 10% 高轉移肺癌
Calu-3 DMEM 10% 肺腺癌
HCCLMS DMEM 10% 肝轉移癌 上皮樣
SMMC-7721* DMEM 10% 肝癌 上皮樣
BEL-7402 DMEM 10% 肝癌 上皮樣
BEL-7404 DMEM 10% 肝癌
BEL-7405 DMEM 10% 肝癌
QGY-7701 DMEM 10% 肝癌
QGY-7703 DMEM 10% 肝癌
QGY-Q3* DMEM 10% 肝癌 上皮樣
HepG2 DMEM 10% 肝癌
Hep3B DMEM 10% 肝癌
BGC-823 DMEM 10% 低分化胃腺癌
SGC-7901* 1640 10% 胃癌 上皮樣
ECA-109 DMEM 10% 食管癌
MNK-7* 1640 10% 乳癌 上皮樣
SK-BR-3* 1640 10% 乳腺腺癌 上皮樣
BT-474 DMEM 10%insulin(0.2U/ml) 乳癌 上皮樣,呈片狀
MCF-7* 1640/DMEM 10% 乳腺腺癌 上皮樣
ZR-75-1 1640 10% 乳癌 上皮樣
ZR-75-30 1640 10% 乳腺癌
MDA-MB-231 DMEM 10% 乳癌 Adherent,Epithelial
Bcap-37 DMEM 10% 乳腺癌
MDA-MB-435S DMEM 10% 乳腺管癌
T47D 1640 10%Insulin (0.2U/ml) 乳腺管癌
BT-20 1640 10% 乳癌
HBL-100 DMEM 10% 乳腺細胞
JEG 1640 10% 絨癌 上皮樣
JAR 1640 10% 絨癌 上皮樣
HeLa* 1640 10% 宮頸癌 上皮樣
HeLa-229 1640 10% 宮頸癌
HO-8910 DMEM 10% 卵巢癌
C200 1640 10% 卵巢癌
HT-29* 1640 10% 結直腸癌 Adherent,epithelial
Sw620 DMEM 10% 結腸癌
LoVo 1640 10% 結腸腺癌 上皮樣
Ls-174-T 1640 10% 結腸腺癌
HCT-8 1640 10% 回盲腸腺癌
HCE-8962 1640 10% 盲腸未分化癌
SHG-44 1640 10% 腦膠質瘤 上皮樣
U-251 1640 10% 腦星形膠質瘤
SK-N-SH 1640 10% 腦星形膠質瘤
CNE 1640 10% 鼻咽癌
Jurkat 1640 10% 急性T細胞白血病 懸浮
Hut102 1640 10% 人皮膚T細胞淋巴瘤 懸浮
Hut-78 1640 10% 人皮膚T細胞淋巴瘤 懸浮
HL-60* 1640 10% 人原髓細胞白血病 懸浮
U937 1640 10% 組織細胞淋巴瘤
Raji 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
Namalwa 1640 10% Burkitt’s淋巴瘤
A431 10% F12 人表皮癌
SH-SY5Y MEM+F12(1:1)15% 人神經瘤細胞
DU145* 1640 10% 前列腺癌 Adherent,epithelial
PC-13 1640 10% 前列腺癌
CL1 1640 10% 前列腺癌
ME12 1640 10% 前列腺癌
P69 1640 10% 前列腺癌
Tca-8113 1640 10% 舌癌 上皮樣
KB 1640 10% 空腔表皮樣癌
Hep-2 1640 10% 喉表皮樣癌
ACC-2 1640 10% 腺樣囊性癌
ACC-3 1640 10% 腺樣囊性癌
THP-1 1640 10% 單核細胞瘤
A375 1640 10% 惡性黑色素瘤
T-24 1640 10% 膀胱變異細胞癌
EJ 1640 10% 膀胱癌
ScaBER 1640 10% 膀胱鱗癌
PANC-1 DMEM 10% 胰腺癌
Bxpc-3 DMEM 10% 胰腺腺癌
EH-PAN1 DMEM+15%FBS 人原代胰腺癌
MG-63 DMEM 骨肉瘤 貼壁生長
U2OS DMEM 骨肉瘤 貼壁生長
HOS8603 DMEM(10%FBS) 骨肉瘤
LUXL-1 IMDM 交質瘤
LUXL-2 IMDM 交質瘤
786-O 人腎透明細胞腺癌細胞
A172 人腦膠質母細胞瘤細胞
AGS 人胃癌細胞
AZ-521 人胃癌細胞
SW480 人結腸腺癌細胞
CaCo-2 人結腸癌細胞
HGC-27 人胃癌細胞
Hs 746T 人胃癌細胞
MGC80-3 人胃癌細胞
MKN-45 人胃癌細胞
NUGC-3 人胃癌細胞
SNU-638 人胃癌細胞
SNU-739 人肝癌細胞
Tca8113 人舌鱗癌細胞
U251 人腦膠質瘤細胞
U-373MG 人腦神經膠質瘤細胞
U-87 MG 人腦星形膠質母細胞瘤
OPM-2 人骨髓瘤細胞
NCI-H929 人骨髓瘤細胞
U266 人骨髓瘤細胞
CAL 27 人舌鱗癌細胞
DLD-1 人結直腸腺癌上皮細胞
5637 人膀胱癌細胞
SK-OV-3 人卵巢癌細胞
GBC-SD 人膽囊癌細胞
MKN-28 人胃癌細胞
NCI-N87 人胃癌細胞
QCY-7703 人肝癌細胞
HepG2.2.15 人肝癌細胞
HuH7 人肝癌細胞