簡稱 | 中文名稱 | 培養(yǎng)條件 | 生長狀態(tài) | 細胞形態(tài) |
CaES-17 | 人食管癌細胞 | DMEM+10% FBS | 貼壁 | 上皮細胞 |
CaES-17(CaES-17)細胞,“慧穎:提醒您:收到細胞后,檢查外包裝是否完整,干冰是否完好,細胞凍存管是否完好且未溶解。如有破損、溶解等問題,請及時。細胞若不立即復蘇,請將細胞置于液氮中保存。若復蘇請進行以下操作:
1.75%酒精噴凍存管后,用干凈的紙或酒精棉球擦拭凍存管,放入超凈臺。
2.預熱細胞*培養(yǎng)基,準備一根新的15mL無菌離心管和一個無菌的T25細胞培養(yǎng)瓶。
3.將5ml*培養(yǎng)基添加到T25細胞培養(yǎng)瓶,備用。將5ml*培養(yǎng)基添加到15ml離心管中,備用。
4.準備37℃水浴,迅速取出細胞,將凍存管放入水浴中快速搖晃使之融化。
5.融化*后的凍存管酒精棉球擦拭,在超凈臺中打開凍存管,用1mL移液器將細胞懸液取出,加入到準備好的含培養(yǎng)基的離心管中,混勻,放入離心機中, 1200rpm離心3-5min
6.離心停止后取出離心管,小心地棄上清液,加入1ml*培養(yǎng)基,輕吹打混勻成懸液,全部吸取轉移到步驟3中準備的T25細胞培養(yǎng)瓶中,混勻后放置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
7.次日于顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),視情況可換液或直接傳代實驗。
復蘇細胞一般采用快速融化法,以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。
注:收到細胞后請及時處理,一周內發(fā)現(xiàn)細胞異常,請及時,并提供圖片。
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