BALL-1細(xì)胞,人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 培養(yǎng)需注意:
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)所需的物品、器材應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌或購買無菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌(指高壓蒸汽滅菌,以下同)或用鋁箔紙包住瓶口,和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進(jìn)行滅菌。玻璃吸管應(yīng)塞上棉花球滅菌,然后置于烘箱中烘干。不適于進(jìn)行高壓滅菌的瓶塞等其它物品,可浸泡在70%酒精中進(jìn)行滅菌,然后在超凈工作臺(tái)上吹干。細(xì)胞培養(yǎng)液和其它不適于高壓滅菌的溶液,應(yīng)通過過濾(采用0.22μm的孔徑的濾膜)滅菌。無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖地面一次,并用紫外線照射滅菌30分鐘。超凈工作臺(tái)每次使用前用70%酒精擦拭,然后紫外線照射30分鐘。
進(jìn)入無菌操作室要求穿著無菌工作服、工作帽、口罩。開始工作前用70%酒精對手、前臂及乳膠手套進(jìn)行消毒。細(xì)胞培養(yǎng)等操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)或有空氣過濾器的空間內(nèi)進(jìn)行。操作前點(diǎn)燃酒精燈,細(xì)胞培養(yǎng)的所有操作,如打開或關(guān)上試管或培養(yǎng)瓶蓋等,都要靠近酒精燈并經(jīng)過短時(shí)間的灼燒。燒過的實(shí)驗(yàn)器械,冷卻后才能使用。已吸過培養(yǎng)液或其它有機(jī)液體的吸管不得再用火焰燒灼。不同液體分別用不同的吸管吸取,不能混用。開蓋后的培養(yǎng)瓶盡量避免垂直放置,同時(shí)瓶蓋應(yīng)扣放在超凈工作臺(tái)上,以減少落入細(xì)菌的機(jī)會(huì)。細(xì)胞培養(yǎng)物在處理和使用前,不要過早暴露于空氣中。在進(jìn)行轉(zhuǎn)移液體操作時(shí),移液器不能觸及瓶口以避免細(xì)菌污染或交叉污染。放置吸管時(shí)管口向下傾斜,以防止液體倒流引起污染。培養(yǎng)細(xì)胞的廢棄用品,應(yīng)放入可封裝的容器內(nèi)。
BALL-1細(xì)胞,人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 操作步驟:
- 采樣時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無菌操作。采樣時(shí)應(yīng)用已滅菌的器械、無菌包裝的器皿和經(jīng)過濾滅菌的緩沖溶液和培養(yǎng)液。采樣過程中盡量避免紫外線照射和接觸對細(xì)胞有毒害作用的化學(xué)試劑。在有污染因素存在的區(qū)域采樣時(shí),應(yīng)將樣品在含有500-1000U/ml的青、鏈霉素的PBS中漂洗3次,每次1-2分鐘。
- 在條件允許的情況下,宜采細(xì)胞易存活、增殖速度快的胚胎組織。
- 采樣時(shí)應(yīng)用鋒利的器械切碎組織,盡可能減少對細(xì)胞的機(jī)械損傷。
- 采樣時(shí)應(yīng)切除采樣組織外的其它成份,如附著在采樣組織上的血液、脂肪、神經(jīng)組織、結(jié)締組織和壞死組織。修剪和切碎過程中,應(yīng)將樣品浸泡于少量培養(yǎng)液中,以避免組織干燥。
- 采取的樣品應(yīng)盡快培養(yǎng)。因故不能立即培養(yǎng)時(shí),應(yīng)將樣品切成1cm3以下的小塊,浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),置于冰浴或4℃冰箱中。時(shí)間不能超過2小時(shí)。
- 采樣的同時(shí)要留好組織學(xué)標(biāo)本和電鏡標(biāo)本,以便于以后鑒別原代組織的來源和觀察細(xì)胞體外培養(yǎng)后與原組織的差異性。對樣品的來源、供體的一般情況(包括性別、年齡、健康狀況等)要做詳細(xì)的記錄以備查詢。
其他細(xì)胞產(chǎn)品:
MA-h細(xì)胞 BHK-21細(xì)胞 HBF細(xì)胞BHK-21細(xì)胞 MM細(xì)胞 HDF-a細(xì)胞 HSkMC細(xì)胞HBMEC細(xì)胞 MLF細(xì)胞 HHDPC細(xì)胞 HSk95D細(xì)胞HBVSMC細(xì)胞 MREpiC細(xì)胞 HHZMC細(xì)胞 HSkMM細(xì)胞HBVAF細(xì)胞 MCM細(xì)胞 HHorSC細(xì)胞 HACC細(xì)胞HBVP細(xì)胞 MMSC-bm細(xì)胞 HHirSC細(xì)胞 HRGEC細(xì)胞HCPEC細(xì)胞 MEF細(xì)胞 HHFK細(xì)胞 HRPTEpiC細(xì)胞BHK-21細(xì)胞 MEF-mt細(xì)胞 HLEC細(xì)胞HRCEpiC細(xì)胞HCPF細(xì)胞 RPC細(xì)胞 HLF細(xì)胞 HREpiC細(xì)胞HMC細(xì)胞 RMC細(xì)胞HOK細(xì)胞 HRMC細(xì)胞HN細(xì)胞 RNr細(xì)胞 HGF細(xì)胞 HBdMEC細(xì)胞HCGC細(xì)胞 RNsn細(xì)胞 HPDLF細(xì)胞 HBdSMC細(xì)胞HN-h細(xì)胞 RGC細(xì)胞 HEEC細(xì)胞 HUC細(xì)胞
HOPC細(xì)胞 RHh細(xì)胞 HESMC細(xì)胞 HBdSF細(xì)胞HOPC-os細(xì)胞 BHK-21細(xì)胞HGSMC細(xì)胞 HPEpiC細(xì)胞HO細(xì)胞 RNs細(xì)胞 HIMEC細(xì)胞 BHK-21細(xì)胞HSC細(xì)胞 RSCMN細(xì)胞 HISMC細(xì)胞 HPSMC細(xì)胞HPNC細(xì)胞 RDSCI細(xì)胞 HCMEC細(xì)胞HCO細(xì)胞HA細(xì)胞 RVSCI細(xì)胞 HCSMC細(xì)胞 HS細(xì)胞Hac細(xì)胞 ROPC細(xì)胞 HPMEC細(xì)胞 HNPC細(xì)胞HA-sp細(xì)胞 RSC細(xì)胞 HPAEC細(xì)胞 HAFC細(xì)胞HA-h細(xì)胞RPNF細(xì)胞 HPASMC細(xì)胞 HHSEC細(xì)胞HM細(xì)胞 RA細(xì)胞 HPAF細(xì)胞 HH細(xì)胞
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