會(huì)員.png)
13
大鼠Flt-3配體（Flt-3 ligand）ELISA試劑盒
檢測(cè)原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Flt-3 Ligand 單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的 Flt-3 Ligand與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠Flt-3 Ligand，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，zui后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，F(xiàn)lt-3 Ligand濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Flt-3 Ligand濃度。
試劑盒組成（2-8℃保存）
酶標(biāo)板（Coated Wells） | 96孔 | 酶標(biāo)抗體工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
10×標(biāo)本稀釋液（Sample Buffer） | 12ml | 20×濃縮洗滌液（Wash Buffer） | 50ml |
標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：20ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
*抗體工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 終止液（Stop Solution） | 12ml |
準(zhǔn)備試劑與收集血樣
1. 收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20 ℃或-70 ℃）保存，避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，*管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在*管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。
3. 10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）
檢測(cè)程序
1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗處反應(yīng)15分鐘。
8. 每孔加入100ul終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。
結(jié)果計(jì)算與判斷
1. 所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。
2. 以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3. 根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Flt-3 Ligand含量。
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的Flt-3 Ligand 檢測(cè)濃度小于15pg/ml。
2. 特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠Flt-3 Ligand。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。
大鼠Flt-3配體（Flt-3 ligand）ELISA試劑盒
注意事項(xiàng)
1. 以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2. 洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致精確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。
3. 板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。
4. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。
5. 本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！
相關(guān)產(chǎn)品：
KB1359 人c-sis Elisa試劑盒 Human c-sis ELISA Kit
KB2607 大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽（BNP）Elisa試劑盒 Rat brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit
KB2249 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A（SP-A）Elisa試劑盒 Human Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit
KB3051 大鼠透明質(zhì)酸（HA）Elisa試劑盒 Rat Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
KB1604 人抗巨噬細(xì)胞抗體（anti-macrophage Ab）Elisa試劑盒 Human anti-macrophage antibody ELISA Kit
KB2968 大鼠蛋白激酶B（PKB）Elisa試劑盒 Rat protein kinase B,PKB ELISA Kit
KB2522 人維生素C（VC）Elisa試劑盒 Human Vitamin C,VC ELISA Kit
KB3494 豚鼠白介素6（IL-6）Elisa試劑盒 guinea pig Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
KB3869 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）Elisa試劑盒 Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA KIT
KB3242 山羊白介素4（IL-4）Elisa試劑盒 Goat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
KB1187 人角化細(xì)胞生長因子（KGF）Elisa試劑盒 Human Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit
KB2365 人硫酸皮膚素（DS）Elisa試劑盒 Human dermatan sulfate,DS ELISA Kit
KB1200 人β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）Elisa試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit
KB2571 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類（MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ）Elisa試劑盒 Rat major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ ELISA Kit
KB3608 豬熱休克蛋白40（HSP-40）Elisa試劑盒 PoFAine Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit
KB3116 大鼠脫氫表雄酮硫酸酯（DHEA-S）Elisa試劑盒 Rat Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit
KB3813 小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ（IL-1sRⅠ）Elisa試劑盒 Mouse soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA kit
KB3559 豬表皮生長因子（EGF）Elisa試劑盒 PoFAine Epithelial growth factor,EGF ELISA Kit
KB1631 人幽門螺旋菌IgG（Hp-IgG）Elisa試劑盒 Human Helicobacter pylori IgG ,Hp-IgG ELISA Kit
更多產(chǎn)品：http://facexiu.com/st226901/list_673388.html