脂質(zhì)體2000 LIPOFECTAMINE 2000 脂質(zhì)體2000 轉(zhuǎn)染試劑LIPO 2000 價(jià)格
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中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) | 價(jià)格 |
脂質(zhì)體2000 | Lipofectamine 2000 Transfection Reagent | 0.75ML | 11668-027 | 優(yōu)惠 |
脂質(zhì)體2000 | Lipofectamine 2000 Transfection Reagent | 1.5ML | 11668-019 | * |
脂質(zhì)體2000 價(jià)格 相關(guān)影響因素:
1.細(xì)胞的狀態(tài)。這點(diǎn)非常重要,不要急于求成,一定要讓細(xì)胞處于*的生長(zhǎng)狀態(tài)再做。個(gè)人覺(jué)得細(xì)胞復(fù)蘇后的3代左右細(xì)胞狀態(tài),不要用傳了很多代的細(xì)胞去做,細(xì)胞的形態(tài)都會(huì)發(fā)生變化了。
2.細(xì)胞的融合度。說(shuō)明書(shū)上寫(xiě)的細(xì)胞的融合度要達(dá)到90%才能做細(xì)胞太少,肯定容易死的。
3.無(wú)血清培養(yǎng)基OPTI-MEM(GIBICO)很好用,有無(wú)血清培養(yǎng)基的話,就用它代替PBS洗細(xì)胞兩遍。注意洗的時(shí)候要輕,靠邊緣加入液體,然后不要吹吸細(xì)胞,而是轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)板讓液體滾動(dòng)在細(xì)胞表面。如果洗的太厲害,細(xì)胞又損失一部分,當(dāng)然加了脂質(zhì)體,細(xì)胞受影響就更大了。
4.加入無(wú)血清培養(yǎng)基后5~6小時(shí)更換全培養(yǎng)基。不要太長(zhǎng)。
5.轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒一定純度好、濃度高、無(wú)內(nèi)毒素。濃度不要低于0.35ug/ul。
脂質(zhì)體2000 價(jià)格 以6孔板舉例說(shuō)明體系:
溶液1:240ul 無(wú)血清培養(yǎng)基 + 10 ul lipofectamine 2000 perwell (總體積250 ul)(溫育5min)
溶液2:X ul 無(wú)血清培養(yǎng)基 + 4 ug 質(zhì)粒 per well(總體積250 ul)
將溶液1與溶液2混合,室溫下置20min。
無(wú)血清培養(yǎng)基沖洗細(xì)胞兩遍后加入2ml 無(wú)血清培養(yǎng)基。
將溶液1與溶液2的混合液逐滴加入孔中,搖動(dòng)培養(yǎng)板,輕輕混勻。在37℃,5%的CO2中保溫24-72小時(shí)。
實(shí)驗(yàn)證明:48小時(shí)mRNA表達(dá)zui高;72h蛋白表達(dá)zui高。