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納米金偶聯(lián)抗體/蛋白試劑盒（20nm，500 μg偶聯(lián)量）
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
納米金偶聯(lián)抗體/蛋白試劑盒 | 納米金(20 nm)，偶聯(lián)500 μg抗體/蛋白 |
一. 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
納米金偶聯(lián)抗體/蛋白試劑盒可以通過抗體/蛋白上的伯胺基團(tuán)（如賴氨酸），簡(jiǎn)單、快速地實(shí)現(xiàn)抗體/蛋白與納米金的共價(jià)偶聯(lián)。偶聯(lián)在30分鐘內(nèi)即可完成，偶聯(lián)效率可達(dá)70%左右。此為通用型試劑盒，適用于各種分子量的抗體/蛋白，也適用于多肽、酶等分子。
二. 試劑盒組成與存儲(chǔ)
將試劑盒儲(chǔ)存在-20?C。偶聯(lián)劑、反應(yīng)緩沖液可保存在+4℃或-20℃
試劑盒組成 | 數(shù)量 | 保存溫度 |
納米金 (20 nm) | 5 × 20 μg | -20°C |
反應(yīng)緩沖液 | 5 mL | -20°C / +4°C |
偶聯(lián)劑 | 5管 | -20°C / +4°C |
三. 實(shí)驗(yàn)步驟
? 將所有的試劑恢復(fù)至室溫。
? 取500 μL反應(yīng)緩沖溶液加入1管納米金中，得到納米金的分散液；取1管偶聯(lián)試劑溶解于200 μL純水中。
? 取100 μg抗體/蛋白加入至上一步的納米金緩沖溶液中，在該混合溶液中，再加入100 μL偶聯(lián)試劑，混勻后在室溫下持續(xù)30分鐘左右。（注意：偶聯(lián)試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用！）
? 反應(yīng)結(jié)束后以9500 rpm，離心20分鐘，純水洗滌2~3次以除去未反應(yīng)完的抗體/蛋白。
? 共軛抗體儲(chǔ)存：標(biāo)記抗體/蛋白后，我們建議將偶聯(lián)物儲(chǔ)存在 +4°C，不要將偶聯(lián)物儲(chǔ)存在 -20°C。偶聯(lián)物的整體穩(wěn)定性將由抗體/蛋白本身的穩(wěn)定性決定，因?yàn)樗鼤?huì)首先降解。如果您的抗體/蛋白穩(wěn)定，偶聯(lián)物也將穩(wěn)定。
? 測(cè)量偶聯(lián)物濃度：納米金(20 nm)的最大吸光度(Absmax)為528 nm。為了確定納米金偶聯(lián)物的有效濃度，我們建議在將樣品稀釋到適合您的設(shè)備的適當(dāng)范圍后，使用紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)量Absmax。
四. 注意事項(xiàng)
? 本試劑盒可以兼容無胺緩沖液（PBS, MES, MOPS, HEPES）和 < 50%甘油。若樣品抗體/蛋白中存在以下成分，可能會(huì)干擾樣品抗體/蛋白與納米金的偶聯(lián)。
緩沖液組成 | 是否兼容 |
無胺緩沖液（如：PBS, MES, MOPS, HEPES） | 是 (pH 6.5-8.5) |
甘油 | 是 (＜ 50%) |
Gelatin (明膠) | 否 |
Tris | 否 |
Gly | 否 |
羧酸分子(EDTA、檸檬酸等) | 否 |
含伯胺基或巰基分子 (氨基酸、乙醇胺、巰基乙醇或DTT等) | 否 |
血清蛋白 | 否 |
? 若存在以上干擾成分，可先通過超濾管或透析等方式除去干擾成分，再使用本試劑盒將抗體/蛋白與納米金偶聯(lián)。
? 最佳偶聯(lián)抗體/蛋白量：偶聯(lián)抗體/蛋白量將影響每個(gè)納米金粒子表面的抗體/蛋白分子數(shù)量，最佳偶聯(lián)抗體/蛋白量取決于您的應(yīng)用需求。因此，您可能需要偶聯(lián)不同數(shù)量的抗體/蛋白，結(jié)合應(yīng)用測(cè)試優(yōu)化得到最佳偶聯(lián)抗體/蛋白量。下表顯示了推薦的初始抗體/蛋白量。
納米金質(zhì)量 | 推薦的初始抗體/蛋白量 |
20 μg | 100 μg |
