結(jié)腸組織消化手冊(cè)

時(shí)間：2016-2-14閱讀：661

世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商 Worthington Biochemical 正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國(guó)代理， Worthington Biochemical 在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶(hù)提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國(guó)科研客戶(hù)帶來(lái)的產(chǎn)品，的服務(wù)，簽約 Worthington Biochemical 就是為了給廣大科研客戶(hù)帶來(lái)更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿(mǎn)意將是我們zui大的收獲

Worthington Biochemical 中國(guó)代理, Worthington Biochemical 上海代理， Worthington Biochemical 北京代理，Worthington Biochemical 廣東代理， Worthington Biochemical 江蘇代理Worthington Biochemical 湖北代理,Worthington Biochemical 天津,Worthington Biochemical 黑龍江代理,Worthington Biochemical 內(nèi)蒙古代理,Worthington Biochemical 吉林代理,Worthington Biochemical 福建代理, Worthington Biochemical 江蘇代理, Worthington Biochemical 浙江代理,Worthington Biochemical 四川代理,

Worthington組織消化指南

引言

組織消化酶主要用于組織培養(yǎng)和細(xì)胞生物學(xué)研究的原代細(xì)胞的分離和收集。盡管這些消化酶已經(jīng)普遍應(yīng)用多年，但是對(duì)其組織消化和細(xì)胞收集的作用機(jī)制卻沒(méi)有全面的理解。由此導(dǎo)致的結(jié)果便是選擇一種消化方法大多是隨機(jī)選擇或基于過(guò)去的經(jīng)驗(yàn)，而不是在*理解消化原理的基礎(chǔ)上選擇的消化方案，以及如何根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)康男拚桨敢垣@得更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

細(xì)胞分離程序的目的是zui大程度的獲得功能活性的單個(gè)細(xì)胞，而影響結(jié)果的原因有很多，包括（不限于）以下：

1、組織類(lèi)型

2、物種來(lái)源

3、動(dòng)物年齡

4、遺傳改造情況（如knockouts）

5、所用的消化培養(yǎng)液

6、所用的酶

7、消化酶中的雜質(zhì)

8、所用消化酶的工作濃度

9、溫度

10、孵育時(shí)間

通常前四個(gè)原因沒(méi)辦法選擇，而剩下的原因一般由經(jīng)驗(yàn)決定以獲取zui適實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

通過(guò)查閱文獻(xiàn)來(lái)選擇*組織消化酶和zui適消化條件的研究人員通常被互相矛盾的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)搞得一頭霧水。這些巨大差異來(lái)源于組織胞外基質(zhì)的復(fù)雜而動(dòng)態(tài)的特性，以及過(guò)去常用的粗制、未提純的組織分離酶。另外，組織胞外基質(zhì)由各種蛋白、糖蛋白、脂類(lèi)和糖脂組成，這些成分的組成比例在不同物種、不同組織、甚至不同發(fā)育（年齡）之間存在明顯的差異，這些因素都極大的影響了消化方案的制定。目前通常使用的粗制酶，如鏈霉蛋白酶、NF1:250、以及含有幾種其他不同濃度蛋白酶的膠原酶、以及各種多糖酶、核酶和脂酶。

本指南總結(jié)了目前常用組織消化酶的zui適消化和細(xì)胞收集知識(shí)和方法，描述了標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)步驟，以便于制定一個(gè)*的細(xì)胞分離方案，同時(shí)列舉了一些相關(guān)的參考文獻(xiàn)。

下表列出多種組織的適宜消化酶（含參考文獻(xiàn)，以組織類(lèi)型和物種分類(lèi)，詳見(jiàn)鏈接）

脂肪組織	腎上腺組織	骨組織	腦組織
軟骨組織	結(jié)腸組織	內(nèi)皮組織	上皮組織
眼	心臟	腸	腎
肝	肺	淋巴結(jié)	乳腺
其它組織	其他組織	肌組織	神經(jīng)組織
胰腺	腮腺	垂體	前列腺
生殖	動(dòng)物鱗片	皮膚	脾臟
干細(xì)胞	胸腺	甲狀腺/甲狀旁腺	扁桃體
腫瘤

注：使用Worthington公司消化酶的文獻(xiàn)不限于上表鏈接中所列，一般而言，Worthington公司的組織消化酶可用于大多組織類(lèi)型的消化。

結(jié)腸組織消化手冊(cè)

物種	詳細(xì)來(lái)源	細(xì)胞名稱(chēng)	消化用酶	培養(yǎng)基	參考文獻(xiàn)
豚鼠	豚鼠, 成年的	Enterochromaffin	Trypsin: 0.05%	DMEM	Raghupathi, R., Duffield, M., Zelkas, L., Meedeniya, A., Brookes, S., Sia, T., Wattchow, D., Spencer, N. and Keating, D.: Identification of Unique Release Kinetics of Serotonin From Guinea-pig and Human Enterochromaffin Cells., J Physiol 591, 5959-75, 2013
			Collagenase Type 1: 0.1%
豚鼠	豚鼠, 雄性, 200-250克	Myenteric ganglia	Collagenase Type 4: 0.2%	Kreb's solution	Kang, M., Maguma, H., Smith, T., Ross, G., Dewey, W. and Akbarali, H.: The Role of 尾-arrestin2 in the Mechanism of Morphine Tolerance in the Mouse and Guinea Pig Gastrointestinal Tract., J Pharmacol Exp Ther 340, 567-76, 2012
			Protease: 0.1%
人類(lèi)	人類(lèi)	Enterochromaffin	Trypsin: 0.05%	DMEM	Raghupathi, R., Duffield, M., Zelkas, L., Meedeniya, A., Brookes, S., Sia, T., Wattchow, D., Spencer, N. and Keating, D.: Identification of Unique Release Kinetics of Serotonin From Guinea-pig and Human Enterochromaffin Cells., J Physiol 591, 5959-75, 2013
			Collagenase Type 1: 0.1%
人類(lèi)	人類(lèi)	Colonic epithelial	Collagenase: 150 u/ml	Basal X media	Roig, A., Eskiocak, U., Hight, S., Kim, S., Delgado, O., Souza, R., Spechler, S., Wright, W. and Shay, J.: Immortalized Epithelial Cells Derived from Human Colon Biopsies Express Stem Cell Markers and Differentiate In Vitro., Gastroenterol 138, 1012, 2010
			Neutral Protease: 0.04 mg/ml
人類(lèi)	人類(lèi)	Colorectal cancer	Collagenase Type 4: 1%	HBSS	Zhou, J., Belov, L., Huang, P., Shin, J., Solomon, M., Chapuis, P., Bokey, L., Chan, C., Clarke, C., Clarke, S. and Christopherson, R.: Surface Antigen Profiling of Colorectal Cancer Using Antibody Microarrays With Fluorescence Multiplexing., J Immunol Methods 355, 40, 2010
			Deoxyribonuclease I: 0.2%
人類(lèi)	人類(lèi)	Colonic epithelial	Collagenase Type 4: 0.1%	not listed	Huang, E., Hynes, M., Zhang, T., Ginestier, C., Dontu, G., Appelman, H., Fields, J., Wicha, M. and Boman, B.: Aldehyde Dehydrogenase 1 is a Marker for Normal and Malignant Human Colonic Stem Cells (SC) and Tracks SC Overpopulation During Colon Tumorigenesis., Cancer Res 69, 3382-9, 2009
人類(lèi)	人類(lèi)	Colon cancer	Collagenase Type 1: 300 u/ml	DMEM/F12	Varnat, F., Duquet, A., Malerba, M., Zbinden, M., Mas, C., Gervaz, P. and Ruiz i Altaba, A.: Human Colon Cancer Epithelial Cells Harbour Active HEDGEHOG-GLI Signalling that is Essential for Tumour Growth, Recurrence, Metastasis and Stem Cell Survival and Expansion., EMBO Mol Med 1, 338-51, 2009
			Hyaluronidase: 100 u/ml
人類(lèi)	人類(lèi)	Cancer stem cell	Collagenase Type 3: 200 u/ml	RPMI-1640	Dalerba Piero, Dylla Scott J, Park In-Kyung, Liu Rui, Wang Xinhao, Cho Robert W, Hoey Timothy, Gurney Austin, Huang Emina H, Simeone Diane M, Shelton Andrew A, Parmiani Giorgio, Casli Chiara, Clarke Michael F: Phenotypic characterization of human colorectal cancer stem cells, Proc Natl Acad Sci U S A 104, 10158-63, 2007
			Deoxyribonuclease I: 100 u/ml
人類(lèi)	人類(lèi)	Colonic epithelial	Collagenase:	RPMI 1640	Fukushima, K. and Fiocchi, C.: Paradoxical Decrease of Mitochondrial DNA Deletions in Epithelial Cells of Active Ulcerative Colitis Patients.,Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol Vol. 286,, , G804-13, 2004
			Neutral Protease: 0.3%
			Deoxyribonuclease I: 0.05%
人類(lèi)	人類(lèi)	Colonic endothelial cells	Collagenase Type 2: 0.25%	HBSS/5%FBS	Wang D., Lehman R., Donner D., Matli M., Warren R., and Welton M.: Expression and Endocytosis of VEGF and Its Receptors in Human Colonic Vascular Endothelial Cells, Am J Physiol/Gastro 282, G1088, 2002
人類(lèi)	人類(lèi)	Colonocytes	Collagenase:	DMEM/F12	Emenaker N, Calaf G, Cox D, Basson M and Qureshi N: Short chain fatty acids differentially modulate cellular phenotype and c-myc protein levels in primary human nonmalignant and malignant colonocytes, J Nutr 46, 96-105, 2001
人類(lèi)	人類(lèi)	Epithelial and mucosal lymphocytes	Neutral Protease: 0.1%	RPMI 1640	Hisamatsu, T., Watanabe, M., Ogata, H., Ezaki, T., Hozawa, S., Ishii, H., Kanai, T. and Hibi, T.: Interferon-Inducible Gene Family 1-8U Expression in Colitis-Associated Colon Cancer and Severely Inflamed Mucosa in Ulcerative Colitis., Cancer Res 59, 5927-31, 1999
			CLSPA: 0.02%
			Deoxyribonuclease I: 0.01%
人類(lèi)	人類(lèi)	Colonic epithelial	Neutral Protease: 1.2 u/ml	HBSS	Gibson, P., Rosella, O., Wilson, A., Mariadason, J., Rickard, K., Byron, K. and Barkla, D.: Colonic Epithelial Cell Activation and the Paradoxical Effects of Butyrate.,Carcinogenesis 20, 539, 1999
			Collagenase Type 4: 50 u/ml
人類(lèi)	人類(lèi)	Lamina propria lymphocytes	Collagenase: 25 u/ml	HBSS	Ueyama H, Kiyohara T, Sawada N, Isozaki K, Kitamura S, Kondo S, Miyagawa J, Kanayama S, Shinomura Y, Ishikawa H, Ohtani T, Nezu R, Nagata S, Matsuzawa Y:High Fas ligand expression on lymphocytes in lesions of ulcerative colitis, Gut 43, 48-55, 1998
小鼠	小鼠	Lamina propria	Collagenase Type 2: 0.1%	RPMI 1640	Atarashi, K., Nishimura, J., Shima, T., Umesaki, Y., Yamamoto, M., Onoue, M., Yagita, H., Ishii, N., Evans, R., Honda, K. and Takeda, K.: ATP Drives Lamina Propria T(H)17 Cell Differentiation., Nature 455, 808, 2008
			Neutral Protease: 0.1%
			Deoxyribonuclease I: 0.004%
小鼠	小鼠, 6-8 周	Cancer stem cell	Collagenase Type 3: 200 u/ml	RPMI-1640	Dalerba Piero, Dylla Scott J, Park In-Kyung, Liu Rui, Wang Xinhao, Cho Robert W, Hoey Timothy, Gurney Austin, Huang Emina H, Simeone Diane M, Shelton Andrew A, Parmiani Giorgio, Casli Chiara, Clarke Michael F: Phenotypic characterization of human colorectal cancer stem cells, Proc Natl Acad Sci U S A 104, 10158-63, 2007
			Deoxyribonuclease I: 100 u/ml
小鼠	小鼠	Lamina propria mononuclear cells	Collagenase: 0.05%	HBSS	Weigmann Benno, Tubbe Ingrid, Seidel Daniel, Nicolaev Alex, Becker Christoph, Neurath Markus F: Isolation and subsequent analysis of murine lamina propria mononuclear cells from colonic tissue, Nat Protoc 2, 2307-11, 2007
			Deoxyribonuclease I: 0.05%
			Neutral Protease: 0.3%
小鼠	小鼠	Dentritic	Collagenase: 300 u/ml	RPMI 1640	Abe, K., Nguyen, K., Fine, S., Mo, J., Shen, C., Shenouda, S., Corr, M., Jung, S., Lee, J., Eckmann, L. and Raz, E.: Conventional Dendritic Cells Regulate the Outcome of Colonic Inflammation Independently of T Cells., Proc Natl Acad Sci U S A 104, 17022, 2007
			Deoxyribonuclease I: 0.002%
小鼠	小鼠	Lympocytes	Collagenase/Dispase: 100 u/ml	RPMI 1640	Annacker O, Coombes JL, Malmstrom V, Uhlig HH, Bourne T, Johansson-Lindbom B, Agace WW, Parker CM, Powrie F.: Essential role for CD103 in the T cell-mediated regulation of experimental colitis, J Exp Med 202, 1051, 2005
小鼠	小鼠, 6-8 周	Lamina propria lymphocytes	Collagenase Type 1: 0.2%	HBSS	Totsuka T, Kanai T, Uraushihara K, Iiyama R, Yamazaki M, Akiba H, Yagita H, Okumura K, Watanabe M: Therapeutic effect of anti-OX40L and anti-TNF-alpha MAbs in a murine model of chronic colitis, Am J Physiol/Gastro 284, G595-603, 2003
			Deoxyribonuclease I: 0.01%
小鼠	小鼠, 6-8 周	Lamina propria mononuclear cells	Collagenase Type 2: 0.015%	RPMI	Wirtz S., Becker C., Blumberg R., Galle P., and Neurath M.: Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA, J Immunol 168(1), 411, 2002
			Deoxyribonuclease I: 0.01%
大鼠	大鼠, 成年的	Colon smooth muscle	Soybean Trypsin Inhibitor: 0.01%	DMEM	Somara, S., Bashllari, D., Gilmont, R. and Bitar, K.: Real-Time Dynamic Movement of Caveolin-1 During Smooth Muscle Contraction of Human Colon and Aged Rat Colon Transfected with Caveolin-1 cDNA., Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 300, G1022, 2011
			Collagenase Type 2: 0.1%

我們公司zui大優(yōu)勢(shì)是強(qiáng)大的采購(gòu)，

1：基本什么都能進(jìn)口，血清，抗體，耗材，還有部分限制進(jìn)口的，

2：貨品全，現(xiàn)經(jīng)營(yíng)過(guò)700多個(gè)品牌，基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口，特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢(shì)，

3：提供加急服務(wù)，一般1-2周到貨，超過(guò)時(shí)限加急費(fèi)全免

4：價(jià)格公道，絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì)，當(dāng)然不能保證100%產(chǎn)品都是,因?yàn)橐馕吨鴽](méi)有服務(wù).

5：良好的信譽(yù)，大部分客戶(hù)我們提供貨到付款服務(wù)，客戶(hù)包括清華，北大交大復(fù)旦，中山等100多所大學(xué)，ROCHE，阿斯利康，國(guó)藥，fisher等500多家公司

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc, Worthington Biochemical ,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. Dako,Inc, GePromegaridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,Worthington Biochemical , Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,FULLERLABS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國(guó)外公司授權(quán)代理。
7：我們還是invitrogen,qiagen,Worthington Biochemical am,sigma;Promega,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發(fā)，歡迎合作。

黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

結(jié)腸組織消化手冊(cè)

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示