骨組織消化手冊(cè)

時(shí)間：2016-2-14閱讀：613

世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商 Worthington Biochemical 正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國(guó)代理， Worthington Biochemical 在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國(guó)科研客戶帶來(lái)的產(chǎn)品，的服務(wù)，簽約 Worthington Biochemical 就是為了給廣大科研客戶帶來(lái)更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

Worthington Biochemical 中國(guó)代理, Worthington Biochemical 上海代理， Worthington Biochemical 北京代理，Worthington Biochemical 廣東代理， Worthington Biochemical 江蘇代理Worthington Biochemical 湖北代理,Worthington Biochemical 天津,Worthington Biochemical 黑龍江代理,Worthington Biochemical 內(nèi)蒙古代理,Worthington Biochemical 吉林代理,Worthington Biochemical 福建代理, Worthington Biochemical 江蘇代理, Worthington Biochemical 浙江代理,Worthington Biochemical 四川代理,

Worthington組織消化指南

引言

組織消化酶主要用于組織培養(yǎng)和細(xì)胞生物學(xué)研究的原代細(xì)胞的分離和收集。盡管這些消化酶已經(jīng)普遍應(yīng)用多年，但是對(duì)其組織消化和細(xì)胞收集的作用機(jī)制卻沒(méi)有全面的理解。由此導(dǎo)致的結(jié)果便是選擇一種消化方法大多是隨機(jī)選擇或基于過(guò)去的經(jīng)驗(yàn)，而不是在*理解消化原理的基礎(chǔ)上選擇的消化方案，以及如何根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)康男拚桨敢垣@得更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

細(xì)胞分離程序的目的是zui大程度的獲得功能活性的單個(gè)細(xì)胞，而影響結(jié)果的原因有很多，包括（不限于）以下：

1、組織類型

2、物種來(lái)源

3、動(dòng)物年齡

4、遺傳改造情況（如knockouts）

5、所用的消化培養(yǎng)液

6、所用的酶

7、消化酶中的雜質(zhì)

8、所用消化酶的工作濃度

9、溫度

10、孵育時(shí)間

通常前四個(gè)原因沒(méi)辦法選擇，而剩下的原因一般由經(jīng)驗(yàn)決定以獲取zui適實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

通過(guò)查閱文獻(xiàn)來(lái)選擇*組織消化酶和zui適消化條件的研究人員通常被互相矛盾的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)搞得一頭霧水。這些巨大差異來(lái)源于組織胞外基質(zhì)的復(fù)雜而動(dòng)態(tài)的特性，以及過(guò)去常用的粗制、未提純的組織分離酶。另外，組織胞外基質(zhì)由各種蛋白、糖蛋白、脂類和糖脂組成，這些成分的組成比例在不同物種、不同組織、甚至不同發(fā)育（年齡）之間存在明顯的差異，這些因素都極大的影響了消化方案的制定。目前通常使用的粗制酶，如鏈霉蛋白酶、NF1:250、以及含有幾種其他不同濃度蛋白酶的膠原酶、以及各種多糖酶、核酶和脂酶。

本指南總結(jié)了目前常用組織消化酶的zui適消化和細(xì)胞收集知識(shí)和方法，描述了標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)步驟，以便于制定一個(gè)*的細(xì)胞分離方案，同時(shí)列舉了一些相關(guān)的參考文獻(xiàn)。

下表列出多種組織的適宜消化酶（含參考文獻(xiàn)，以組織類型和物種分類，詳見(jiàn)鏈接）

脂肪組織	腎上腺組織	骨組織	腦組織
軟骨組織	結(jié)腸組織	內(nèi)皮組織	上皮組織
眼	心臟	腸	腎
肝	肺	淋巴結(jié)	乳腺
其它組織	其他組織	肌組織	神經(jīng)組織
胰腺	腮腺	垂體	前列腺
生殖	動(dòng)物鱗片	皮膚	脾臟
干細(xì)胞	胸腺	甲狀腺/甲狀旁腺	扁桃體
腫瘤

注：使用Worthington公司消化酶的文獻(xiàn)不限于上表鏈接中所列，一般而言，Worthington公司的組織消化酶可用于大多組織類型的消化。

骨組織消化手冊(cè)

物種	詳細(xì)來(lái)源	細(xì)胞名稱	消化用酶	培養(yǎng)基	參考文獻(xiàn)
牛	牛	Chondrocytes	Collagenase Type 2: 0.4%	DMEM	Buschmann, M., Gluzband, Y., Grodzinsky, A., and Hunziker, E.: Mechanical Compression Modulates Matrix Biosynthesis in Chondrocyte/Agarose Culture, J Cell Sci 108, 1497, 1995
雞	日齡小雞	Osteoblasts	Trypsin: 0.03%	DMEM	Gay, C., Lloyd, Q., and Gilman, V.: Characteristics and Culture of Osteoblasts Derived From Avian Long Bone, In Vitro Cell Dev Biol 30A, 379, 1994
雞	小雞, 彼得森/喬木英畝, 雄性, 4 周老(家雞)	Chondrocytes	Trypsin: 0.25%	Ham's F12	Rosselot, G., Reginato, A.M., and Leach, R.M.: Development of a Serum-Free System to Study the Effect of Growth Hormone and Insulinlike Growth Factor-1 on Cultured Postembryonic Growth Plate Chondrocytes, In Vitro Cell Dev Biol 28A, 235, 1992
雞	小雞, 胚胎	Vertebrae chondroblasts	Trypsin: 0.25%	Simm's, CMF	Schiltz, J.R., Mayne R., and Holtzer, H.: The Synthesis of Collagen and Glycosaminoglycans by Dedifferentiated Chondroblasts in Culture, Differentiation 1, 97, 1973
人類	人類, 22-73 歲	Osteoblasts	Trypsin: 0.5%	Basal Medium	Kneser U, Voogd A, Ohnolz J, Buettner O, Stangenberg L, Zhang YH, Stark GB, Schaefer DJ:Fibrin gel-immobilized primary osteoblasts in calcium phosphate bone cement: in vivo evaluation with regard to application as injectable biological bone substitute, Cells Tissues Organs 179, 158-69, 2005
人類	人類, 60歲以上	Bone Cells, Osteoblasts	Collagenase Type 2: 200-250 u/ml	DMEM	Chen X., Qian H., Neff L., Satomura K., and Horowitz M.: Thy-1 antigen Expression by Cells in the Osteoblast Lineage, J Bone Miner Res 14, 362, 1999
人類	人類	Osteoblasts	Trypsin: 0.1%	DMEM	Meikle, M., Boyd, S., Hembry, R., Compston, J., Croucher, P., and Reynolds, J.: 人類 Osteoblasts in Culture Synthesize Collagenase and Other Matrix Metalloproteinases in Response to Osteotropic Hormones and Cytokines, J Cell Sci 103, 1093, 1992
人類	人類	Osteoblasts	Collagenase Type 4: 250 u/ml	DMEM	Fedarko, N.S., Termine, J.D., Young, M.F. and Robey, P.G.: Temporal Regulation of Hyaluronan and Proteoglycan Metabolism by 人類 Bone Cells in Vitro, J Biol Chem 265, 12200, 1990
小鼠	小鼠	Bone Stromal cells	Collagenase Type 1: 0.3%	DMEM	Igarashi, H., Akahoshi, N., Ohto-Nakanishi, T., Yasuda, D. and Ishii, S.: The Lysophosphatidic Acid Receptor LPA4 Regulates Hematopoiesis-Supporting Activity of Bone Marrow Stromal Cells.,Sci Rep 5, 11410, 2015
小鼠	小鼠	Osteoblasts	Collagenase Type 1: 1.0%	MEM	Lee, D., Choung, H., Kim, H., Gronostajski, R., Yang, Y., Ryoo, H., Lee, Z., Kim, H., Cho, E. and Park, J.: NFI-C Regulates Osteoblast Differentiation Via Control of Osterix Expression., Stem Cells 32, 2467-79, 2014
小鼠	小鼠	Osteoblasts	Neutral Protease: 1.6%	MEM
小鼠	小鼠, 4-22 月	Osteocytes	Collagenase Type 1: 300 u/ml	MEM	Stern, A., Stern, M., Van Dyke, M., Jahn, K., Prideaux, M. and Bonewald, L.: Isolation and Culture of Primary Osteocytes from the Long Bones of Skeletally Mature and Aged Mice.,Biotechniques 52, 361, 2012
小鼠	小鼠	Endosteal cells	Collagenase Type 1: 0.3%	DMEM	Nakamura, Y., Arai, F., Iwasaki, H., Hosokawa, K., Kobayashi, I., Gomei, Y., Matsumoto, Y., Yoshihara, H. and Suda, T.: Isolation and Characterization of Endosteal Niche Cell Populations that Regulate Hematopoietic Stem Cells., Blood 116, 1422, 2010
小鼠	小鼠	Bone marrow	Collagenase: 0.2%	DMEM	Morikawa, S., Mabuchi, Y., Kubota, Y., Nagai, Y., Niibe, K., Hi大鼠su, E., Suzuki, S., Miyauchi-Hara, C., Nagoshi, N., Sunabori, T., Shimmura, S., Miyawaki, A., Nakagawa, T., Suda, T., Okano, H. and Matsuzaki, Y.: Prospective Identification, Isolation, and Systemic Transplantation of Multipotent Mesenchymal Stem Cells in Murine Bone Marrow., J Exp Med 206, 2483-96, 2009
小鼠	小鼠, male, 6-8 week old	Osteoclasts	Collagenase Type 3: 0.1%	DMEM	Sakai, E., Miyamoto, H., Okamoto, K., Kato, Y., Yamamoto, K., and Sakai, H.: Characterization of Phagosomal Subpopulations Along Endocytic Routes in Osteoclasts and Macrophages, J. Biochem. 130, 823, 2001
小鼠	小鼠, 3-5 天, 6-8 周	Bone Cells, Osteoblasts	Collagenase Type 2: 200-250 u/ml	DMEM	Chen X., Qian H., Neff L., Satomura K., and Horowitz M.: Thy-1 antigen Expression by Cells in the Osteoblast Lineage, J Bone Miner Res 14, 362, 1999
小鼠	小鼠, 白變種實(shí)驗(yàn)室老鼠	Osteoblast-like Cells	Trypsin: 0.1%	Eagle's MEM	Takanashi, H., Matsuishi, T., and Yoshizato, K.: Establishment and Characterization of Stromal Cell Lines That Support Differentiation of Murine Hematopoietic Blast Cells into Osteoblast-like Cells, In Vitro Cell Dev Biol 30A, 384, 1994
		Stromal Cell Lines
		Hematopoietic Blast Cells
小鼠	小鼠, 遠(yuǎn)交群小鼠	Neonatal bone	Collagenase Type 2: 0.20%	Tris-buffered saline	Chen,T. and Feldman,D.: Regulation of 1,25-Dihydroxyvitamin D3 Receptors in Cultured 小鼠 Bone Cells, J Biol Chem 256, 5561, 1981
大鼠	大鼠,胎兒, 21 妊娠日	Calvaria	Collagenase: 0.2%	MEM	Owen, T., Aronow, M., Shalhoub, V., Barone, L., Wilming, L., Tassinari, M., Kennedy, M., Pockwinse, S., Lian, J., and Stein, G.: Progressive Development of the 大鼠 Oseoblast Phenotype In Vitro: Reciprocal Relationships in Expression of Genes Associated with Osteoblast Prolife大鼠ion and Differentiation During Formation of the Bone Extracellular Matrix, J Cell Physiol143, 420, 1990
大鼠	大鼠, 初生	Osteoblastlike cells	Collagenase Type 2: 0.3%	MEM	Ernst, M., and Froesch, E.: Osteoblastlike Cells in a Serum-Free Methylcellulose Medium Form Colonies: Effects of Insulin and Insulinlike Growth Factor I, Calcif Tissue Int 40, 27, 1987
大鼠	大鼠, 胎兒, 17-21 天	Calvaria	Collagenase: 0.01%-0.6%	Tris-buffered saline	Peck, W., Birge, S., and Fedak, S.: Bone Cells: Biochemical and Biological Studies After Enzymatic Isolation, Science 146, 1476, 1964

我們公司zui大優(yōu)勢(shì)是強(qiáng)大的采購(gòu)，

1：基本什么都能進(jìn)口，血清，抗體，耗材，還有部分限制進(jìn)口的，

2：貨品全，現(xiàn)經(jīng)營(yíng)過(guò)700多個(gè)品牌，基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口，特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢(shì)，

3：提供加急服務(wù)，一般1-2周到貨，超過(guò)時(shí)限加急費(fèi)全免

4：價(jià)格公道，絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì)，當(dāng)然不能保證100%產(chǎn)品都是,因?yàn)橐馕吨鴽](méi)有服務(wù).

5：良好的信譽(yù)，大部分客戶我們提供貨到付款服務(wù)，客戶包括清華，北大交大復(fù)旦，中山等100多所大學(xué)，ROCHE，阿斯利康，國(guó)藥，fisher等500多家公司

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc, Worthington Biochemical ,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. Dako,Inc, GePromegaridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,Worthington Biochemical , Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,FULLERLABS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國(guó)外公司授權(quán)代理。
7：我們還是invitrogen,qiagen,Worthington Biochemical am,sigma;Promega,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發(fā)，歡迎合作。

黄色视频不卡_午夜福利免费观看在线_亚洲国产精品999在线_欧美绝顶高潮抽搐喷水_久久精品成人免费网站_晚上一个人看的免费电影_国产又色又爽无遮挡免费看_成人国产av品久久久

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

骨組織消化手冊(cè)

會(huì)員登錄

收藏該商鋪

提示