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產(chǎn)品名稱:兔子血小板活化因子(PAF)elisa
ELISA原理實驗條件和技術(shù)要點:在應(yīng)用ELISA時,首先要清楚下面內(nèi)容:1,是檢測抗體還是抗原?2,檢測的結(jié)果是定性還是定量?3,是否需要檢測特異抗體的類型?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?
(1)檢測抗原? zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,其次是競爭法。但競爭法在具體實驗中有些困難,特別是檢測微生物的抗原,因為需要標記抗原,這對于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競爭法中,酶標記的抗原與標本直接混合在一起,許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。
(2)檢測抗體? 檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,這個方法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM.。這個方法的*步是捕獲所需要檢測的一個種類的抗體,接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測IgG時比較簡單,但不適用于檢測其他種類的抗體,因為血清中如果有特異IgG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原。
樣品采集:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
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