一、使用在線過濾器

我深信在線過濾器是HPLC或UHPLC儀器上有經(jīng)濟效益的部件。在線過濾器放置在自動進(jìn)樣器和色譜柱（或是保護(hù)柱）之間，常用的在線過濾器分為含有可替換篩板（0.5 μm或0.2 μm）的不銹鋼在線過濾器以及一次性的PEEK材質(zhì)的在線過濾器，一般必須選擇比柱篩板孔徑更小的篩板，這樣才能有效攔截可能堵塞色譜柱篩板的顆粒。一旦發(fā)現(xiàn)儀器的壓力開始增加，可能在線過濾器篩板開始堵塞了，我們必須在其被*堵塞前更新。

在線過濾器的功能就如同使用濾膜一樣，但是不需要任何額外的工作。使用離心機處理樣品后，還是有可能會有少許的顆粒進(jìn)入儀器，而位在色譜柱前面的在線濾器就可以將殘留顆粒攔截下來。此外在線濾器的好處是簡單易換，一般只需要5分鐘就可以換好，就可以重新開機使用，也不需要花時間重新調(diào)節(jié)或是校正。另外一個好處就是在線過濾器也可以過濾掉儀器中一些零配件老化耗損所產(chǎn)生的顆粒。我是非常的主張每臺液相儀器都裝配在線過濾器，即使使用保護(hù)柱，我也建議在保護(hù)柱前加裝在線過濾器。

二、使用保護(hù)柱

保護(hù)柱可以簡單的說是裝在色譜柱前面的一支短的色譜柱。一般是1-2 cm長，裝的填料和使用的色譜柱填料相匹配，而使用的篩板孔徑不會比色譜柱中使用的篩板孔徑大。保護(hù)柱有兩種功能：（1）可以阻擋可能堵塞色譜柱的顆粒；（2）因為保護(hù)柱和色譜柱填料相匹配，任何可能和色譜柱填料產(chǎn)生不可逆作用而不出峰的化學(xué)雜質(zhì)，會被保護(hù)柱先行捕獲。

使用保護(hù)柱絕對可以延長色譜柱的壽命。但是考慮是否使用保護(hù)柱前，建議評估以下幾點：

（1）保護(hù)柱也不便宜，所以要考慮購買保護(hù)柱的費用是否能由所增加的色譜柱壽命補償回來；

（2）保護(hù)柱的壽命有多長？必須注意何時需要換保護(hù)柱芯，不要因為更換太晚而污染到色譜柱；

（3）如何沖洗保護(hù)柱？沖洗時需要將保護(hù)柱和色譜柱分開沖洗，以免將累積在保護(hù)柱內(nèi)的不純物沖洗到色譜柱中；

（4）不要期望因為加了1-2 cm的保護(hù)柱而會增加柱效。裝上保護(hù)柱雖然類似增加柱長，但是使用保護(hù)柱也增加了兩個接頭和連接管路，這些會造成儀器系統(tǒng)柱效減少，因此如果能維持不裝保護(hù)柱時的柱效就不錯了。

毋庸贅言，使用保護(hù)柱肯定可以延長色譜柱的壽命，但是建議每個實驗室在經(jīng)濟效益和工作量方面來評估是否需要使用保護(hù)柱。即使使用保護(hù)柱，我也會建議在保護(hù)柱和自動進(jìn)樣器之間裝個在線濾器，畢竟更換在線濾器比更換保護(hù)柱便宜，也可以同時增加保護(hù)柱和色譜柱的壽命。

三、不進(jìn)未處理的樣品

不管有沒有使用前處理，建議所有的樣品在進(jìn)樣前經(jīng)過過濾或是離心處理。例如當(dāng)樣品經(jīng)過濾膜可以濾除顆粒從而減少堵塞色譜柱的篩板，濾膜的孔隙大小必須小于色譜柱的篩板孔徑大小。一般大于3 μm顆粒的色譜柱使用2 μm大小的篩板，3 μm顆粒的色譜柱則使用0.5 μm的篩板，而小于3 μm顆粒的色譜柱一般使用0.2 μm的篩板，因此通用的0.45 μm的濾膜基本可以用在除了亞2 μm顆粒以外所有的色譜柱；對于亞2 μm顆粒的色譜柱，一般使用0.2 μm大小孔隙的濾膜。大多濾膜是事先封裝好，可以直接接在注射器進(jìn)行過濾或是作為96孔板的過濾板。