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        1. 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司

          喹乙醇檢測試劑盒

          參   考   價:面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準

          產(chǎn)品型號:

          品       牌:研域生物

          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

          所  在  地:上海市

          更新時間:2024-05-13 09:16:10瀏覽次數(shù):1763

          聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
          喹乙醇檢測試劑盒的宗旨是以更優(yōu)服務(wù)、更高品質(zhì)、更低價格、更快供貨的“四更"要求為國內(nèi)廣大科研用戶提供更為完善的產(chǎn)品供應(yīng)和售后服務(wù),力求工作*,在處理客戶的咨詢、訂購、售后服務(wù)、等方面追求更專業(yè)、更快捷。

          本產(chǎn)品僅用于科研,不用于臨床

          喹乙醇檢測試劑盒使用說明書(酶聯(lián)免疫法)

           

           1 喹乙醇檢測試劑盒原理及用途
          本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、飼料等樣本中的喹乙醇(Olaquindox,OQX),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標(biāo)準品或樣品溶液,樣本中的喹乙醇和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗喹乙醇抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含喹乙醇含量成負相關(guān),與標(biāo)準曲線比較即可得出樣本中喹乙醇的殘留量。
          2 技術(shù)指標(biāo)
          2.1 試劑盒靈敏度:0.15ppb(ng/ml)
          2.2 反應(yīng)模式:37℃,30min~30min~15min
          2.3 檢測下限:
          組織………………………………………0.3ppb
          飼料………………………………………30ppb
          2.4 交叉反應(yīng)率:
          喹乙醇……………………………………100%
          卡巴多……………………………………﹤0.1%
           2.5 樣本回收率:
          組織…………………………………………80±15%
          飼料…………………………………………85±15%
          3 試劑盒組成
          酶標(biāo)板……………………………96孔
          標(biāo)準品(黑蓋):各1ml
          0ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb、12.15ppb
          高標(biāo)準品(黑蓋):1ppm…………1ml
          酶標(biāo)記物(紅蓋)…………………11ml
          抗體工作液(藍蓋)………………5.5ml
          底物液A(白蓋)……………………6ml
          底物液B(黑蓋)……………………6ml
          終止液(黃蓋)………………………6ml
          20X濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
          2X復(fù)溶液(黃蓋)…………………50ml
          說明書………………………………1份
          4 需要的器材和試劑
          4.1 儀器:酶標(biāo)儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
          4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
          4.3 試劑:無水乙腈、甲醇
          5 樣本前處理
          5.1 樣本處理前須知:
          實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
          5.2 配液:
          配液1:樣品提取液
             根據(jù)需要量取甲醇用去離子水按甲醇:水=0.5:9.5稀釋,混勻備用。
          配液2:復(fù)溶液
              將2×復(fù)溶液用去離子水2倍稀釋,用于樣本的復(fù)溶,復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個月。
          5.3 樣本前處理步驟:
          5.3.1 組織(豬肝、豬肉等)樣本
          1)稱取2±0.05g去除脂肪的勻漿樣品,加入2ml去離子水、8ml乙腈,充分混勻后置56℃水浴10min,振蕩5min,室溫4000r/min以上離心10min;
          2)取5ml上清液于50-60℃氮氣或空氣下吹干。
          3)用1ml樣本復(fù)溶液溶解干燥物,加2ml正己烷,充分混勻,室溫4000r/min以上離心5min;
          4)去除上層有機相,取下層液50ul用于分析。
              樣本稀釋倍數(shù):1     檢測下限:0.3ppb
          5.3.2 飼料樣本
          1)稱取稱1±0.05g研碎的飼料樣品,加入10ml樣品提取液,充分混勻后置56℃水浴10min,震蕩5min,室溫4000r/min以上離心10min;
          2)取50ul上清液,加入450ul樣本復(fù)溶液稀釋,混勻;
          3)取2)中稀釋的上清液50ul用于分析。
              樣本稀釋倍數(shù):100     檢測下限:30ppb
          酶聯(lián)免疫試驗步驟
              將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
          實驗開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
          6.1 編    號:將樣本和標(biāo)準品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準品做2孔平行,并記錄標(biāo)準孔和樣本孔所在的位置。
          6.2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光反應(yīng)30分鐘。
          6.3 洗    滌:將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,zui后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
          6.4 加酶反應(yīng):加酶標(biāo)記物100µl/孔,37℃避光反應(yīng)30分鐘。
          6.5 洗    滌:同上
          6.6 顯    色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15分鐘。
          6.7 終    止:加終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
          6.8 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
          7 結(jié)果分析
          7.1 百分吸光率的計算
              標(biāo)準液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個標(biāo)準液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即
           百分吸光度值(%)=
          A
          ×100%
          A0
          A—標(biāo)準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
          A0—0ppb標(biāo)準溶液的平均吸光度值
          7.2 標(biāo)準曲線的繪制與計算
              以標(biāo)準液百分吸光率為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準曲線中,從標(biāo)準曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實際濃度。
              若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析。(索?。?br />注意事項
          8.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準的OD值偏低。
          8.2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
          8.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性。
          8.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
          8.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
          8.6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準的吸光度值小于0.5個單位(A450nm< 0.5 )時,表示試劑可能變質(zhì)。
          8.7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
          9 貯藏及保存期
          儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍。
          保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

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