RNA干擾RNAi基因干擾SiRNA實驗服務(wù)

   RNA干擾(RNA interfering, RNAI) 現(xiàn)象是指由與靶基因序列同源的雙鏈RNA(DsRNA)引|發(fā)的基因轉(zhuǎn)錄后的沉默過程，小于擾RNA特異性介導(dǎo)相同序列的mRNA降解，阻斷相應(yīng)基因表達(dá)。研謹(jǐn)生物提供的RAN干擾技術(shù)包括化學(xué)合成小RNA片段(SiRNA) 和構(gòu)建載體RNA (SnRNA)兩種形式。實驗委托者只需提供干預(yù)基因名稱或基因序列ID，研謹(jǐn)生物免費設(shè)計合適的干預(yù)位點，保證至少有一對小RNA有效抑制目的基因表達(dá)， 抑制效率不低于70%。

RNA干擾(SiRNA實驗)流程

第--步確定干擾基因，設(shè)計并合成合適的小干擾RNA (片段型或載體型小干擾RNA)。

第二步預(yù)轉(zhuǎn)染實驗，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，摸索轉(zhuǎn)染條件、時間并進(jìn)行必要的檢測(WB、PCR等) , 確定干預(yù)效果zui佳的一對小RNA。

第三步正式實驗，設(shè)置合理實驗分組，進(jìn)行瞬時或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

第四步轉(zhuǎn)染后檢測，根據(jù)實驗要求選擇細(xì)胞生物學(xué)檢測、蛋白檢測、分子生物學(xué)檢測等。以研究小干擾RNA對于細(xì)胞、蛋白或基因功能的影響。

RNA干擾(SiRNA實驗)檢測(可根據(jù)委托者實驗需求選擇做)

1.細(xì)胞檢測:細(xì)胞增殖毒性MTT.細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲;

2.蛋白檢測:免疫印跡WB、免疫細(xì)胞化學(xué)ICC、免疫熒光IF、流式細(xì)胞術(shù)FCM.酶聯(lián)免疫ELSIA;

3.分子生物檢測: RT-PCR. 實時熒光定量PCR、甲基化特異性PCR(MSP);

4.其他檢測:生化檢測、酶類檢測、脂類檢測、糖類檢測。

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