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大腸桿菌基因型的基本概念
野生大腸桿菌(E.coli)的基因組DNA中有470個堿基對(bp),內(nèi)含4288個基因。E.coli基因組中還包含有許多插入序列,如λ-噬菌體片段和些其他殊組分的片段,這些插入的片段都是由基因的水平轉(zhuǎn)移和基因重組而形成的,由此表明了基因組具有可塑性。利用大腸桿菌基因組的這種性對其行改,使其中的某些基因發(fā)生突變或者缺失,從而給大腸桿菌帶來可以觀察到的變化,這種觀察到的征叫做大腸桿菌的表現(xiàn)型(Phenotype),把引起這種變化的基因構(gòu)成叫做大腸桿菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表現(xiàn)出不同的性。這些不同基因型性的菌株在基因程的研究和中具有廣泛的應用價值。
大腸桿菌的主要基因型
大腸桿菌的主要基因型包括:與基因重組相關的基因型(如recA、recB和recC等)、與甲基化相關的基因型(如dam、dcm、mcrA、mcrB和C、mrr和hsdM等)、與點突變相關的基因型(如mutS、mutT、dut、ung和uvrB等)、與核酸內(nèi)切酶相關的基因型(如hsdR、hsdS和endA等)、與終止密碼子相關的基因型(如supE和supF)、與抗藥性相關的基因型(gyrA、rpsl和Tn5等)及其他與能量代謝、氨基酸代謝、維生素代謝等相關的基因型。基因程中,經(jīng)常使用的大腸桿菌幾乎都來自于K-12菌株,也使用由B株和C株來源的大腸桿菌。
研究人員在新研究中證實,L-谷氨酰胺通過酶促反應釋放氨,使得大腸桿菌獲得了耐酸性。
在三種已知的ARs中,AR1的能機制仍然不清楚。相比之下,AR2和AR3的分子機制得到了更深入地解析。AR2包含有個氨基酸反向轉(zhuǎn)運蛋白GadC,負責細胞外L-谷氨酸(Glu)與細胞內(nèi)γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid ,GABA)的交換。兩個Glu脫羧酶GadA和GadB將Glu轉(zhuǎn)變?yōu)镚ABA。與AR2相似,AR3也具有兩個組件:反向轉(zhuǎn)運蛋白AdiC和氨酸脫酸酶AdiA。AR2或AR3次整的循環(huán)可將細胞質(zhì)中的質(zhì)子排出至細胞外環(huán)境中,由此提細胞內(nèi)pH,促細菌在酸性環(huán)境下存活。
面了解細菌AR對于有效的臨床預防及治療均有重要的意義。因為所有的食物傳播性致病菌都通過酸性胃,了解細菌在pH值為2-3的環(huán)境下的生存機制其重要。當前,研究人員對于這些機制的了解還遠遠不夠。
在這項研究中,研究人員鑒別了個新型大腸桿菌耐酸性系統(tǒng),證實其依賴于谷氨酰胺酶YbaS和氨基酸反向轉(zhuǎn)運蛋白GadC。這種YbaS和GadC可被酸性pH激活,且只在pH值小于等于6.0時才能適當發(fā)揮能。通過吸收L-谷氨酰胺(Gln),大腸桿菌利用YbaS將之轉(zhuǎn)化為L-谷氨酸(Glu),伴隨釋放氣態(tài)氨。游離氨中和質(zhì)子,導致酸性環(huán)境下細胞內(nèi)pH增。GadC則負責細胞外Gln 與細胞內(nèi)Glu 交換。通過這耐酸系統(tǒng),確保了大腸桿菌在酸性環(huán)境下生存。
大腸桿菌是與我們?nèi)粘I铌P系非常密切的類細菌,學名稱作"大腸埃希菌",屬于腸道桿菌大類中的種。它是寄生在人體大腸和小腸里對人體無害的種單細胞生物,結(jié)構(gòu)簡單,繁殖迅速,培養(yǎng)容易,它是生物學上重要的實驗材料。在嬰兒剛出生的幾小時內(nèi),大腸桿菌就經(jīng)過吞咽在腸道居了。正常情況下,大多數(shù)大腸桿菌是非常安分守己的,他們不但不會給我們的身體健康帶來何危害,反而還能競爭性抵御致病菌的攻,同時還能幫助合成維生素K2,與人體是互利共生的關系。只有在機體免疫力降低、腸道長期缺乏刺激等殊情況下,這些平日里的良民才會興風作浪,移居到腸道以外的地方,例如膽囊、尿道、膀胱、闌尾等地,成相應位的感染或身播散性感染。因此,大分大腸桿菌通常被看作機會致病菌。
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