Protein G -Gold 蛋白G膠體金試劑
海德公司長期供應AURION電鏡級別的膠體金(免疫金)標記產(chǎn)品。當大部分膠體金(免疫金)試劑在透射電子顯微鏡(TEM)上不斷應用時,它們在掃描電子顯微鏡(TEM)上的應用也取得了長足的發(fā)展,例如,金膠體可以標上抗體來確定培養(yǎng)細胞表面的表面抗原。電鏡級別的膠體金(免疫金)試劑的制備需要高質量的抗體和結合試劑,抗體一般需要經(jīng)過純化處理并通過預吸附來降低非特異性反應。
Protein G -Gold 蛋白G膠體金試劑訂購信息:
貨號 | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 |
25313 | EM-grade 6nm,Protein G-Gold | 1.0ml |
25315 | EM-grade 10nm,Protein G-Gold | 1.0ml |
25317 | EM-grade 15nm,Protein G-Gold | 1.4ml |
25319 | EM-grade 25nm,Protein G-Gold | 1.4ml |
25312 | EM-grade 6nm | 2.5ml |
25314 | EM-grade 10nm | 2.5ml |
25316 | EM-grade 15nm | 3.5ml |
25318 | EM-grade 25nm | 3.5ml |
每ml中的金顆粒數(shù)是大家關注的一個問題,一般來說,顆粒越大,其表面積越大,因此可以粘結的抗體數(shù)量越多,zui后可以認為一些Fab域粘結在一起,直至沒有粘結空間。有些抗體的靈敏度比別的抗體高,這是因為它們的Fab段中的氨基酸沒有粘結,那些Fab是自由的。如果靈敏度太低,就要從別的主體樣本中檢查抗體,因為每個的特點都不同。
膠體金的顏色是大家關注的另一個話題,一般來說,膠體金顆粒在5~20nm之間,吸收波長520nm,呈葡萄酒紅色,20~40·nm之間吸收波長530nm,液體為深紅色,60nm的金溶液主要吸收波長600nm,金溶液呈蘭紫色,若離心去掉較大的金顆粒,溶膠呈紅色。
抗體是怎樣與金試劑起來呢?一般蛋白質加到金試劑顆粒溶液中通過以下途徑連接:a). 電荷吸收(賴氨酸)b). 疏水性吸收(色氨酸)c). 硫磺綁定(半胱氨酸和甲硫氨酸)。
問與答:
問:我該選擇PROTEIN A/G金標產(chǎn)品還是金標二抗產(chǎn)品?
答:這取決于你的實驗目的。應用金標二抗產(chǎn)品可以得到更高的標記密度。因此常說金標二抗較金標PROTEIN A更靈敏,這樣說并不全面。Protein A/G識別抗體(一抗)分子一個位點與之結合。只有這個位點在時才發(fā)生結合,并不隨著周圍環(huán)境的不同呈現(xiàn)模糊圖像。
金標二抗識別抗體(一抗)的位點不止一個,這樣抗體被檢測到的機會大大增加,大大增加了靈敏度。
如果所有的抗體(一抗)結合金標Protein A/G和金標二抗的程度一樣,那么用金標二抗結合其上的金顆粒更多。這對于在低放大倍率下抗原的標記更為有效,換句話說,這增加了檢測能力。