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QQ交談技術文章
微孔板恒溫振蕩器在牛奶抗原抗體反應的應用
點擊次數：3934 發(fā)布時間：2011-9-22
溶液的配制
1、稀釋抗體溶液：將抗體濃縮液搖勻，用緩沖液10倍稀釋抗體濃縮液，現(xiàn)用現(xiàn)配。
2、稀釋酶結合物：將酶結合物濃縮液搖勻，用緩沖液10倍稀釋酶結合物濃縮液，現(xiàn)用現(xiàn)配。
3、底物溶液的配制：用底物緩沖液10倍稀釋底物濃縮液，根據需要的量現(xiàn)用現(xiàn)配，底物溶液變藍禁止使用。
七、樣品的前處理方法：
牛奶：新鮮牛奶或解凍牛奶50µL，加水950µL，1：20稀釋，作樣品液備用。
八、檢測步驟：
1、剪開錫箔袋，按每個標準液和樣品提取液2孔計算所需微孔板條的數量，插入框架。
2、各取系列標準液和樣品液20µL分別加到其對應微孔中，每個標準和樣品加雙孔。
3、每孔加稀釋好的酶結合物20µL。
4、每孔加稀釋好的抗體100µL，在MicBio-IV微孔板恒溫振蕩器上*混勻，用封口膜封好，室溫孵育30分鐘。
5、倒出孔內液體，在吸水紙上拍打，使孔中沒有殘留的液體。使用多道移液器，每孔加水250µL，再傾倒干凈。如此洗板，重復三次。
6、每孔加底物溶液100µL，室溫避光孵育30分鐘。
7 、每孔加終止液100µL，混勻。
8 、在450nm波長處測吸光度值。60分鐘內讀數。