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技術(shù)文章
移液器的檢測和校準指南
點擊次數(shù)：2174 發(fā)布時間：2010-7-30
移液器的檢測和校準指南
一、實驗室簡單檢測
（一） 氣密性檢測
移液器吸滿液體后，手持垂直放置15s，檢查吸嘴的尖頭有無液滴，如有，則說明漏氣。
（二） 準確性檢測
1） 量程小于1μl，建議使用分光光度法檢測。將移液器調(diào)至目標體積，然后移取染料溶液，加入一定體積的蒸餾水中，測定溶液的稀釋度（334nm或340nm），重復幾次移液操作，計算移液器的度。
2） 量程大于1μl，可以用稱重法檢測。通過對水的稱重，轉(zhuǎn)換成體積（體積=質(zhì)量/密度），鑒別移液器的準確性。由于水的密度是隨著溫度變化而變化，且稱量天平本身度不符合檢測要求，檢測又大多在一個開放式空間內(nèi)操作，偏差在所難免。因而，此種稱量法只能現(xiàn)場粗略地判斷移液器的準確性，進一步的校準必須在專業(yè)的實驗室操作進行。
注意：稱重法實驗室*條件是高度靈敏的分析天平（定期校準）、雙蒸水和稱量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度（20℃時水的密度為0.09982）。
二、專業(yè)校準
移液器的工作量大，長期使用，將會使彈簧彈力發(fā)生變形，加之本身是塑料，不耐磨擦，就會產(chǎn)生誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準確性，必須對移液器進行定期校準。為了更好地發(fā)揮該類計量儀器的作用，對新購進的儀器要進行校準才能使用；對正在使用的計量儀器，由于長期使用會造成其示值于度量對象的誤差，這種誤差若不進行控制，及時校正，必定會影響科研工作。因此，對使用的移液器要定期檢定、校正，并建立檔案，只有這樣才能使其在日常工作中更好的發(fā)揮作用。
目前，在許多實驗室條件下進行的常規(guī)檢測并不能*取代專業(yè)的校準工作，因為校準對于外部環(huán)境、工作條件及使用的精密儀器具有較高的技術(shù)要求，而這些條件往往是大多數(shù)實驗室無法提供的?，F(xiàn)在一些大型的移液器制造商均采用統(tǒng)一的移液器標準操作規(guī)范，利用專業(yè)軟件校正系統(tǒng)，通過計算機對分析天平進行在線控制，測量、數(shù)據(jù)采集、計算、結(jié)果評價等環(huán)節(jié)由軟件控制完成，所有人為操作都被計算機記錄隨報告打印出來，采用電腦對數(shù)據(jù)進行評估認證，*排除了人為操縱校準結(jié)果的可能性，并制定當?shù)卮砩烫峁I(yè)的校準和維修服務。
操作過程
1） 同溫化處理：校正前，所有移液器及校正介質(zhì)（如工作臺、天平、雙蒸水等）置于相同操作間至少4h，以確保它們具有相同的溫度。
2） 內(nèi)外部清洗。
3） 潤滑活塞。
4） 校準：采用三點校準法，即根據(jù)移液器量程范圍，選取zui低量程、中間值和zui高量程三點分別測試10次，各個測試點取其平均值，計算其準確度（inaccuracy）和度（imprecision），評價標準符合DIN 12650要求。
5） 校準報告：可根據(jù)客戶需求提供給算計打印的標準報告或PICASO校正報告，符合ISO、DIN或ASTM相關(guān)標準。
影響準確性的因素
1） 操作錯誤：包括30℃手持式移液器吸液；與吸嘴不匹配，較易造成脫落；殘留的試劑倒流，污染活塞和密封圈；快速吸液排液，導致部分液體殘留在吸頭上等都會影響準確性。
2） 移液器損壞：包括移液器的頭部被刮擦，斷裂受損；活塞受污染；彈簧受腐蝕等。
3） 操作條件的影響：包括未作調(diào)整吸取與水不同密度的液體；樣品和移液器的差別太大等。