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西安東瑞科教實(shí)驗(yàn)儀器有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 流量型蠕動(dòng)泵,智能氫氣發(fā)生器,肉類安全檢測(cè)儀,肉類食品安全綜合分析儀,雞蛋新鮮度快速檢測(cè)盒 |
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2014-6-9 閱讀(4788)
目前的氯霉素等抗生素快速檢測(cè)，主要有酶聯(lián)免疫法（ELISA）和膠體金免疫層析法。
膠體金法的特點(diǎn)是快速、簡(jiǎn)單，無(wú)需實(shí)驗(yàn)室器材和專業(yè)的操作人員，前處理簡(jiǎn)單，結(jié)果直觀，常溫保存。國(guó)內(nèi)有很多的廠家均有生產(chǎn)，比如上海快靈，北京六角體等。現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于國(guó)內(nèi)各大企業(yè)。
膠體金法只需將處理好的樣品加入稀釋液，攪拌均勻，將混合好的檢測(cè)液滴入檢測(cè)卡中，5~10分鐘即可根據(jù)卡上的出線情況判讀結(jié)果。
ELISA法反應(yīng)原理
主要是利用抗原與抗體的特異性免疫化學(xué)反應(yīng)的基本原理來(lái)進(jìn)行的。在整個(gè)反應(yīng)當(dāng)中,樣品中氯霉素含量越多，反應(yīng)呈色就越淡。反之，樣品中氯霉素含量越少，則呈色越深。
試劑盒組成
1、微量測(cè)試孔：每條8孔，每板12條
2、氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液：
0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35 ppb、4.05 ppb，1.5ml/瓶
3、10倍濃縮萃取稀釋液：一瓶，30ml/瓶
4、10倍濃縮洗滌液：一瓶，30 ml /瓶
5、氯霉素酶標(biāo)記物： 一瓶，8 ml/瓶
6、底物溶液：一瓶，12 ml/瓶
7、反應(yīng)終止液：一瓶，13 ml/瓶
使用說(shuō)明
A、注意事項(xiàng)
1、使用前先將氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液6瓶，濃縮萃取稀釋液，濃縮洗滌液，酶標(biāo)記物，底物溶液及微量測(cè)試孔條置于室溫下，回溫30分鐘。
2、原倍萃取稀釋液及洗滌液配制
用蒸餾水將10倍濃縮萃取稀釋液及濃縮洗滌液分別以1： 9的比例稀釋(即1mL濃縮液+9mL蒸餾水)，即可作為樣品萃取稀釋液與微孔板清洗液。
3、回溫后，取出所需微量測(cè)試孔條，將剩余板條立即放回鋁箔袋中用膠帶封好，置于4o℃保存。
B、樣品制備
1.待測(cè)物為生乳，則依以下方法進(jìn)行處理 (5倍稀釋)
取100ul待測(cè)生乳加入400ul萃取稀釋液，振蕩混合后備用。
2.待測(cè)物為蜂蜜，則依以下方法進(jìn)行處理
a.取2g蜂蜜、4ml蒸餾水與2ml 乙酸乙酯置入離心管中，震蕩約5分鐘，使其充分混合均勻。
b.離心10分鐘(3000rpm)，取0.5ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50℃下氮?dú)獯蹈?溫度請(qǐng)勿超過(guò)50oC)。
c.加入0.5ml萃取稀釋液，震蕩約10秒鐘后備用。
3. 待測(cè)物為血清、則依以下方法進(jìn)行處理
a.抽取待檢動(dòng)物血液，離心或靜置取其較透明之上層液(血清層)使用，注意不要有溶血。
b.將3ml血清加入離心管中，再加入6ml乙酸乙酯，震蕩混合約30秒。
c.離心10分鐘(3000rpm)，取2ml上層液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮?dú)獯蹈伞?nbsp;
d.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先將殘余物*溶解后，再加入1 ml萃取稀釋液，震蕩約30秒鐘。
e. 離心10分鐘(3000 rpm)，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉。再吸取下層液(水層)備用。
f.若有乳化現(xiàn)象，請(qǐng)先將大部分上層液(正己烷)取出后，再將玻璃管置入80oC水中，隔水加熱約5~10分鐘，可改善乳化情形。
4. 待測(cè)物為雞肉或魚(yú)、蝦，則依以下方法進(jìn)行處理
a.將3克樣品剪碎后放入50 ml離心管中，再加入6ml乙酸乙酯，并以均質(zhì)機(jī)均質(zhì)約1分鐘，再震蕩約30秒。
b.離心10分鐘(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮?dú)獯蹈伞?nbsp;
c.于此玻璃管中加入正己烷2 ml，先將殘余物*溶解后(若未能*溶解，可能會(huì)導(dǎo)致回收率降低)，再加入1 ml萃取稀釋液，震蕩約30秒鐘。
d.離心10分鐘(3000 rpm)，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉。再吸取下層液(水層)備用。
e.若有乳化現(xiàn)象，請(qǐng)先將大部分上層液(正己烷)取出后，再將玻璃管置入80oC水中，隔水加熱約5~10分鐘，可改善乳化情形。待測(cè)物為血清、則依以下方法進(jìn)行處理
5.待測(cè)物為內(nèi)臟(肝、心等)，則依以下方法進(jìn)行處理(5倍稀釋)
同上述步驟a~d，但下層液吸出后，再以萃取稀釋液稀釋5倍(即下層液50ul加萃取稀釋液200ml)。
6.待測(cè)物為飼料，則依以下方法進(jìn)行處理(10倍稀釋)
同上述步驟a~d，但下層液吸出后，再以萃取稀釋液稀釋10倍(即下層液30ul加萃取稀釋液270ml)。
C、操作步驟
本產(chǎn)品的酶標(biāo)記物與氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液均直接使用，無(wú)需再稀釋。
1、于適當(dāng)微孔中分別加入100mL標(biāo)準(zhǔn)溶液(0,0.05,0.15,0.45,1.35和4.05ppb)。
2、在另外的微孔中加入100mL 已完成前處理的樣品溶液。
3、再于每一微孔中另再加入50mL酶標(biāo)記物。
4、輕敲盤(pán)子四周，使其充分混合后于室溫下避光靜置溫育1小時(shí)。
5、將微孔中的反應(yīng)液甩掉，再將洗液加滿每一微孔后甩掉，重復(fù)洗3次。
6、zui后一次甩掉后，在吸水紙上拍干。
7、于每一微孔中加入底物溶液100mL后，輕敲盤(pán)子四周，使其充分混合。
8、于室溫下避光靜置溫育20分鐘。
9、于每一微孔中加入100mL反應(yīng)終止液。
10、用酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)450nm下判讀。
D、判定
1. 計(jì)算B/B0值。用樣品或標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值(B)除以零標(biāo)準(zhǔn)吸光度值(B0)再乘以100%。
2. 以B/B0值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)樣濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，做標(biāo)準(zhǔn)半對(duì)數(shù)曲線。
3. 根據(jù)每個(gè)樣品的B/B0值就可從曲線上讀出相對(duì)應(yīng)樣品的濃度。
4. 由于樣品經(jīng)過(guò)了預(yù)先稀釋，因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。
E、標(biāo)準(zhǔn)曲線
F、靈敏度
氯霉素試劑檢測(cè)盒的平均檢測(cè)下限為 0.05ppb，此濃度之吸光值與陰性標(biāo)準(zhǔn)溶液(0ppb)之吸光值有明顯的差異。
G、 特異性
針對(duì)以下抗生素進(jìn)行交叉反應(yīng)之測(cè)試，結(jié)果如下：
Chloramphenicol =100%
Chloramphenicol(free base) <0.1%
Gentamycin <0.1%
Tetracycline <0.1%
Penicillin G <0.1%
Sulfamethazine <0.1%
H、再現(xiàn)性
針對(duì)氯霉素檢測(cè)試劑盒精密度測(cè)試，重復(fù)6次，所得不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光值變異系數(shù)(%CV).
I、回收率
生乳(添加1.0ppb)104~117%
蜂蜜(添加0.3ppb)90~110%
蝦及魚(yú)肉(添加0.5ppb)95~110%
雞肉(添加0.5ppb) 90~120%
血清(添加0.5ppb)100~120%
內(nèi)臟(添加1.0ppb) 100~120%
飼料(添加2.0ppb)80~110%
氯霉素檢測(cè)試劑盒
簡(jiǎn)介
氯霉素(Chloramphenicol)是一種廣譜抗生素。由于其具有效果好以及價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)，目前已被普遍應(yīng)用于各類家禽、家畜、水產(chǎn)品及蜂制品的各種傳染性疾病的治療。然而氯霉素有其嚴(yán)重的副作用,它會(huì)抑制人體骨髓的造血功能，從而引起再生障礙性貧血和粒細(xì)胞缺乏癥。目前，我國(guó)已禁止其使用。
簡(jiǎn)化了樣品處理方式，使用簡(jiǎn)便，省時(shí)省力省錢(qián)，整個(gè)操作過(guò)程不到90分鐘。本產(chǎn)品檢測(cè)范圍廣(雞肉、魚(yú)、蝦、蟹、牛奶、血清、肌肉、組織、飼料與蜂蜜等)，回收率為80%－120%，靈敏度可達(dá)到0.05ppb.
簡(jiǎn)單
1． 樣品提取方便快捷。
2． 90分鐘得到結(jié)果。
3． 只需基本的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。
4． 操作人員只需zui基本的實(shí)驗(yàn)知識(shí)。
準(zhǔn)確
1． 結(jié)果重現(xiàn)性高。
2． 至0.05ppb。
3． 與其它抗體的交叉反應(yīng)率極低。
產(chǎn)品規(guī)格
包裝：每包96孔
靈敏度: 0.05ppb
測(cè)試區(qū)間：0.05ppb－4.05ppb
檢測(cè)時(shí)間：80分鐘(提取后)
儲(chǔ)存條件：2-8℃
氯霉素快速檢測(cè)試紙（48條/盒） 型號(hào):DP1
氯霉素(Chloramphenicol)是一種廣譜抗生素。由于其具有效果好以及價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)，目前已被普遍應(yīng)用于各類家禽、家畜、水產(chǎn)品及蜂制品的各種傳染性疾病的治療。然而氯霉素有其嚴(yán)重的副作用,它會(huì)抑制人體骨髓的造血功能，從而引起再生障礙性貧血和粒細(xì)胞缺乏癥。目前，我國(guó)已禁止其使用。
氯霉素檢測(cè)試紙，簡(jiǎn)化了樣品處理方式，使用簡(jiǎn)便，,整個(gè)操作過(guò)程只須15分鐘。靈敏度可達(dá)到3ppb
其原理為：在試劑片的 ‘中央判讀區(qū)’噴有2條隱形的線,上面一條為對(duì)照線(C線)，下面一條為測(cè)試線(T線)。若樣品中氯霉素的濃度小于3ppb，則T線呈色與C線相近；若樣品中氯霉素的濃度大于3ppb，則T線將比C線淺很多或*看不到線，也就是說(shuō)，氯霉素濃度越高T線越淺。
簡(jiǎn)單：
1． 成套的裝置，提供準(zhǔn)確一致的可視的結(jié)果
2． 適于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。15分鐘得到結(jié)果。
3． 操作人員只需zui基本的化驗(yàn)知識(shí)。
準(zhǔn)確：
1． 結(jié)果重現(xiàn)性高。
2． 至3ppb。
3． 與其它抗體的交叉反應(yīng)率極低
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我們?yōu)橛脩籼峁﹝ui方便、快捷、周到的服務(wù)。
產(chǎn)品規(guī)格
包裝：每包16片
靈敏度: 3ppb
檢測(cè)時(shí)間：15分鐘(提取后)
儲(chǔ)存條件：2-8℃
組成
本試紙組可進(jìn)行16次實(shí)驗(yàn)
1、反應(yīng)孔:2條16孔
2、氯霉素指示劑：1瓶
3、檢測(cè)試紙片一筒 ：16片
4、小吸管：24支
5、樣品混合棒：20根
6、10倍濃縮稀釋緩沖液：1瓶
試紙使用說(shuō)明：
A、注意事項(xiàng)
1、 試紙需要干燥保存，請(qǐng)隨時(shí)確保瓶蓋蓋嚴(yán)
2、 測(cè)試環(huán)境溫度>20℃即可。
3、盡量不要觸摸試紙片中央在白色膜面。
4、本試紙使用前，需先將整套組成部分在室溫中回溫30分鐘，以確保反應(yīng)的正確性。
5、檢測(cè)一個(gè)樣品使用一個(gè)反應(yīng)孔，一片測(cè)試片及一支滴管。未用完的氯霉素指示劑，可放回4℃冰箱留待下次再用。未用過(guò)的微量測(cè)試孔，隔次仍可使用。
6、結(jié)塊或發(fā)臭的牛奶不適合檢測(cè)。
7、原倍稀釋緩沖液配制：用蒸餾水將10倍濃縮稀釋緩沖液以1:9的比例稀釋(即1mL濃縮液+9mL蒸餾水)，即可作為樣品稀釋液。
B、樣品制備： 1.待測(cè)物為牛奶可直接進(jìn)行檢測(cè)。
2.待測(cè)物為蜂蜜，則依以下方法進(jìn)行處理：
以金屬勺取少量待測(cè)蜂蜜樣品置于火上加熱至沸騰，用小細(xì)管趁熱吸取樣品（勿吸入氣泡），以稀釋緩沖液做1：3稀釋。
3. 待測(cè)物為血清、則依以下方法進(jìn)行處理：
a.抽取待驗(yàn)動(dòng)物血液，離心或靜置取其較透明之上層液(血清層)使用，注意不要有溶血。
b將3ml血清加入離心管中，再加入6 ml乙酸乙酯，震蕩混合約30秒。
c.離心10分鐘(3000rpm)，取2ml上層液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮?dú)獯蹈伞?nbsp;
d.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先將殘余物*溶解后，再加入1 ml 稀釋緩沖液，震蕩約30秒鐘。
e. 離心10分鐘(3000 rpm)，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉。再吸取下層液(水層)備用。
f.若有乳化現(xiàn)象，請(qǐng)先將大部分上層液(正己烷)取出后，再將玻璃管置入80oC水中，隔水加熱約5～10分鐘，可改善乳化情形。
4. 待測(cè)物為雞肉或魚(yú)、蝦，則依以下方法進(jìn)行處理：
a.將3克樣品剪碎后放入50 ml離心管中，再加入6 ml乙酸乙酯，并以均質(zhì)機(jī)均質(zhì)約1分鐘，再震蕩約30秒。
b.離心10分鐘(3000rpm)，取2ml上清液(乙酸乙酯)至玻璃管中，于50oC下氮?dú)獯蹈伞?nbsp;
c.于此玻璃管中加入正己烷2ml，先將殘余物*溶解后(若未能*溶解，可能會(huì)導(dǎo)致回收率降低)，再加入1ml稀釋緩沖液，震蕩約30秒鐘。
d.離心10分鐘(3000 rpm)，用吸管吸去上層液(正己烷) 及中間乳化層部分，棄掉。再吸取下層液(水層)備用。
e.若有乳化現(xiàn)象，請(qǐng)先將大部分上層液(正己烷)取出后，再將玻璃管置入80oC水中，隔水加熱約5~10分鐘，可改善乳化情形。
5.待測(cè)物為內(nèi)臟(肝、心等)，則依以下方法進(jìn)行處理(5倍稀釋)：
同上述步驟a～d，但下層液吸出后，再以稀釋緩沖液稀釋5倍(即下層液100μl加 稀釋 緩沖液400ul)。
6.待測(cè)物為飼料，則依以下方法進(jìn)行處理(10倍稀釋)：
同上述步驟a～d，但下層液吸出后，再以稀釋緩沖液稀釋10倍(即下層液100μl加 稀釋 緩沖液900ul)。
C、操作步驟：
(若樣品不只一份，請(qǐng)先為樣品及反應(yīng)孔做好對(duì)應(yīng)編號(hào))
1.以小吸管在微量測(cè)試孔中依次加入兩滴待測(cè)的樣品（以小吸管吸取時(shí)，須將*滴滴除后，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)步驟）。
2.充分搖勻氯霉素指示劑，以新的滴管吸取氯霉素指示劑，滴去前兩滴，加入一滴指示劑于待測(cè)樣品的測(cè)試孔。
3.以手輕輕握住微孔，貼著桌面震蕩使其混合均勻約5分鐘。
4.于每個(gè)測(cè)試孔中放入試紙片（白色端在下）。
5.靜置10分鐘后判讀結(jié)果（判讀結(jié)果時(shí)間不要超過(guò)20分鐘）。
D、判讀：
(由于樣品經(jīng)過(guò)了預(yù)先稀釋，因此所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù))
情形1—T線比C線深，或一樣深，表示樣品中氯霉素濃度低于3ppb。
情形2—T線比C線淡，表示樣品中氯霉素濃度高于3ppb。
情形3—若C線*沒(méi)出現(xiàn)，則表示測(cè)試失敗。
