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SkillPak預(yù)裝柱實(shí)現(xiàn)快速穩(wěn)健的層析工藝放大
| 參考價(jià) | ￥2000-￥5000 |
- 型號(hào)
-
品牌
TOSOH/東曹
-
廠(chǎng)商性質(zhì)
代理商
-
所在地
北京市
更新時(shí)間：2023-11-14 12:40:59瀏覽次數(shù)：1181
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,制藥,綜合 |
|---|
使用SkillPak預(yù)裝柱實(shí)現(xiàn)快速穩(wěn)健的層析工藝放大
東曹SkillPak預(yù)裝柱平臺(tái)可從5 mL層析柱無(wú)縫放大到200 mL層析柱。借助該平臺(tái)，使用少量的樣品和耗材即可設(shè)計(jì)層析工藝。一旦在小試規(guī)模下確定了最佳條件，其工藝過(guò)程即可輕松轉(zhuǎn)至大規(guī)模應(yīng)用。
01使用AEX和CEX分離蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品
為了展示SkillPak出色的放大能力，我們使用了不同尺寸的層析柱（分別裝填了TOYOPEARL NH2-750F和Sulfate-650F填料）分離兩種不同的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品。圖1和圖2是分離蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)UV信號(hào)的比較結(jié)果。
圖1 不同尺寸SkillPak (裝填了TOYOPEARL NH2-750填料)分離蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品
圖2 不同尺寸SkillPak (裝填了TOYOPEARL Sulfate-650F)分離蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品
分離結(jié)果顯示，不同尺寸層析柱上其洗脫曲線(xiàn)相似。線(xiàn)性鹽梯度下，隨著凈表面電荷的增加，蛋白質(zhì)逐漸脫落。不論何種情況，均可觀(guān)察到隨著柱體積的減小，保留體積向右移動(dòng)。這主要是因?yàn)橄到y(tǒng)死體積的不同影響，導(dǎo)致作為參比CV時(shí)，保留體積更高
02牛血清白蛋白 (BSA) 的動(dòng)態(tài)吸附載量
我們還在裝填了TOYOPEARL NH2-750填料的5 mL、50 mL和200 mL的SkillPak層析柱上測(cè)定了BSA的動(dòng)態(tài)吸附載量。
表1. 不同尺寸SkillPak上BSA的動(dòng)態(tài)吸附載量
BSA在不同尺寸的層析柱上的DBC值非常接近，最大偏差為4%，表明吸附能力與層析柱尺寸無(wú)關(guān)，這一點(diǎn)對(duì)于工藝放大時(shí)的上樣量來(lái)說(shuō)非常重要。
我們可以通過(guò)小試驗(yàn)證確認(rèn)其吸附能力，節(jié)省樣品和緩沖溶液。隨后，即可確定使用大型層析柱時(shí)所需的載量和最大上樣量。
03 BSA的洗脫曲線(xiàn)
圖3顯示了不同尺寸SkillPak層析柱上BSA的洗脫曲線(xiàn)，證明了層析柱尺寸并不影響洗脫曲線(xiàn)。色譜圖wan美重疊。wei一的區(qū)別是，最小柱體積的保留體積的偏移，這主要是因?yàn)橄到y(tǒng)死體積的不同影響所致。
圖3. 不同尺寸SkillPak上BSA的洗脫曲線(xiàn)
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使用SkillPak預(yù)裝柱實(shí)現(xiàn)快速穩(wěn)健的層析工藝放大
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