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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50ug |
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貨號 | 179A |
Listlabs Pertussis Toxin 百日咳毒素
(Cat#179A Pertussis Toxin,PTX)
主要應(yīng)用:
PTX常與MOG(35-55),PLP(139-151),PLP(178-191)等免疫肽聯(lián)合注射動物,從而建立實驗性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)模型,即用來研究多發(fā)性硬化癥(Mutiple sclerosis,MS)的常用動物模型。
基本介紹:
百日咳毒素(Pertussis toxin,PTX)是一種由6個非共價連接亞基組成的多元件蛋白,分子量范圍約為9-28kDa,這些亞基分別命名為S1,S2,S3,S4和S5,天然百日咳毒素中所占比為1:1:1:2:1,其中S4亞基以2倍形式存在。最大亞基為S1(也稱為A啟動子),包含NAD+糖基水解酶和ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶活性。單獨的A啟動子能夠?qū)AD+的ADP核糖轉(zhuǎn)移到Gαi,Gαo或Gαt家族G蛋白的α亞基。PTX的結(jié)晶結(jié)構(gòu)顯示其呈金字塔形狀,A啟動子位于塔尖,中間是S5,最底端是二個二聚體,分別是S2-S4,和S3-S4。這5個亞基統(tǒng)稱為B寡聚體亞基(S2,S3,S4,S4和S5),允許PTX進入大部分細胞,使其粘附在包括TLR4和糖蛋白Ib在內(nèi)受體蛋白的多糖殘基上。通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進入細胞后,PTX通過胞內(nèi)體途徑和高爾基體復(fù)合物逆向轉(zhuǎn)運進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。A啟動子從PTX上釋放出來,穿透內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜并導(dǎo)致目標膜偶聯(lián)的G蛋白失活。
生理功能:
百日咳毒素(Pertussis toxin,PTX)由Bordetella pertussis代謝純化所得,一種多亞基毒素,與大多數(shù)哺乳動物培養(yǎng)細胞結(jié)合并特定靶向G蛋白,抑制G蛋白及其在信號通路中的生理功能。PTX的生理效應(yīng)因G蛋白功能不同而變化。正是依賴Gi家族的蛋白偶聯(lián)受體來抑制信號通路的能力,PTX是細胞生物學(xué)研究中的一種重要工具。PTX通過抑制和調(diào)節(jié)各種宿主對Bordetella pertussis的免疫反應(yīng)在傳染方面發(fā)揮重要作用。鼠類動物模型中PTX還能用來刺激建立實驗性自身免疫疾病,比如實驗性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)模型。
產(chǎn)品信息
List labs提供三種配方形式的百日咳毒素(Pertussis toxin,PTX),分別是甘油溶液(貨號:179),溶于緩沖液的凍干粉(貨號:180),以及溶于純水的凍干粉(貨號:181)。
組成:
每瓶含50ug的百日咳毒素,用:500ul水重懸后為:含50ug百日咳毒素的0.01mol/L的磷酸鈉,0.05mol/L氯化鈉,pH7.0的緩沖液。使用前請輕輕混勻,保證溶解為均質(zhì)狀態(tài)。請不要無菌過濾,這樣會導(dǎo)致原料損失。溫和操作,不要渦旋混勻。
產(chǎn)品濃度:
用牛血清白蛋白作為標準品,Bradford 方法測定蛋白濃度。
純度:
16% SDS-PAGE電泳,有5條單獨條帶,與Tamura 等報道的一致,純度>95%。
產(chǎn)品經(jīng)內(nèi)毒素檢測,在可接受范圍。
實驗:
CHO細胞實驗:參照Hewlett等報道的方法,能夠引起陽性反應(yīng)的毒素濃度為:0.1ng/m(以具體批次為準)l。注意:毒性可能因批次不同而不同。每個實驗室應(yīng)根據(jù)具體的實驗,優(yōu)化最佳的使用劑量。
腺苷酸環(huán)化酶測定實驗:參照Wolff 報道的方法,Adenylate Cyclase 活性(以具體批次為準),出現(xiàn)1umol的鈣調(diào)蛋白,是1.6pmol CAMP/min/ug 毒素。
保存:
凍干粉形式和重懸后均2-8℃保存,不要凍。
活化:
本產(chǎn)品非活化形式,如果需要活化形式,請參照文獻(Kaslow et al)實驗條件。
防護:
操作時,請穿上實驗服,帶上手套和防護眼鏡。此產(chǎn)品僅供科研應(yīng)用,不可用于診斷試劑。對因不當(dāng)操作引起的傷害,公司不負責(zé)。