Realassay®wss B12 檢測(cè)試劑盒基于國(guó)標(biāo) GB 5009.285 研制，操作簡(jiǎn)易。利用微生物生長(zhǎng)特異性需要維生素而實(shí)現(xiàn)檢測(cè)，該試劑盒用于定量檢測(cè)食品中的wss B12 總量（包括添加和原生wss B12）。本試劑盒提供 96 次檢測(cè)（包括標(biāo)準(zhǔn)品），使用酶標(biāo)儀（610 - 630 nm 或者 540 - 550 nm）進(jìn)行讀數(shù)。該試劑盒具有以下特點(diǎn)：? 1、即用型標(biāo)準(zhǔn)品無(wú)需梯度稀釋，直接加水混合即用? 2、培養(yǎng)24 - 26 h即可讀取數(shù)據(jù)

wssB12是從樣品稀釋提取所獲得的。將經(jīng)過(guò)稀釋的提取物和wssB12檢測(cè)培養(yǎng)基加入包被有Lactobacillusdedelbrueckikii subspsp. lactis is （leichmannii）的微孔中。Lactobacillus dedelbrueckikii的生長(zhǎng)狀況取決于wssB12的含量。在wssB12測(cè)試培養(yǎng)基中，添加wssB12標(biāo)準(zhǔn)品或含wssB12的樣品提取液，細(xì)菌會(huì)一直生長(zhǎng)直至wssB12被消耗wq。孵育條件應(yīng)為黑暗、37 °C條件下孵育24 - 26小時(shí)，然后通過(guò)酶標(biāo)儀在610 - 630 nm （或者540 - 550 nm）讀取結(jié)果，根據(jù)wssB12標(biāo)準(zhǔn)品濃度和相應(yīng)的細(xì)菌OD值繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算出樣品中wssB12含量

B12濃縮樣品提取液使用前需充分混勻（如有結(jié)晶析出，可適當(dāng)加熱溶解，溫度不超過(guò)60℃），稀釋20倍后備用。如：50 mL濃縮液 + 950 mL超純水充分溶解。6.2 含強(qiáng)化wss B12 的嬰兒食品，谷物，飲料或維生素預(yù)混料等樣品稱量 1 g（mL）均質(zhì)樣品至一個(gè) 50 mL 無(wú)菌離心管中，準(zhǔn)確加入 40 mL 稀釋后樣品提取液，搖勻，確保樣品溶解wq、無(wú)結(jié)塊。在 95 – 99 °C 水浴中溫育 30 min（加熱后注意蓋子是否松動(dòng)，冷卻前應(yīng)擰緊）。使用冰水或流動(dòng)水流迅速冷卻至 30 °C 以下。然后 8000 g 離心 5 min（若樣品經(jīng)離心后分層不明顯或上層較分散，建議再次離心 5 min），離心后，使用 0.22 μm 濾膜過(guò)濾脂肪層下的樣品溶液備用。以上步驟樣品稀釋 40 倍，根據(jù)濃度范圍，確定是否在 1.5 mL（或2.0 mL）無(wú)菌試管中進(jìn)一步稀釋過(guò)濾后的樣品溶液。