流式細胞術是一種功能強大的方法，被廣泛用于細胞的高通量定量和定性分析。然而，由于細胞外囊泡（EVs）（主要是外泌體）體積?。ㄍ饷隗w：~80-200 nm，微囊泡：~200-1,000 nm）、多分散性和低折射率等原因，流式細胞術在細胞外囊泡（EVs）（主要是外泌體）的直接應用受到了一些挑戰(zhàn)的阻礙。目前最好、使用的外泌體無珠流式細胞術方案是使用超速離心法（UC）結合蔗糖梯度漂浮法分離外泌體，用親油性染料 PKH67 和抗體標記外泌體，并使用優(yōu)化版商用細胞儀進行分析。然而，這種方法需要經(jīng)驗豐富的流式細胞儀操作員能夠手動調整硬件和校準細胞儀。在這里，我們提供了一種新穎、快速的方法，通過使用專為小顆粒設計的流式細胞儀，對從細胞培養(yǎng)基以及更復雜的人體樣本（卵巢癌患者腹水）中分離出來的外泌體和微囊泡進行定量和表征，這種方法適用于多用戶實驗室，在數(shù)據(jù)采集前無需調整即可使用。