骨代謝檢測試劑是一類用于評估骨組織新陳代謝狀況的生物化學工具,它們能夠反映骨形成和骨吸收的過程,對于骨質(zhì)疏松癥的診斷、治療效果評估以及骨折風險預(yù)測具有重要的臨床意義 。這些試劑通常包括骨形成標志物和骨吸收標志物,前者如堿性磷酸酶(ALP)、骨鈣素(OCN)和I型前膠原N端前肽(PINP),后者如抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)和I型膠原交聯(lián)C端肽(CTX) 。通過血液或尿液樣本中這些標志物的水平檢測,醫(yī)生可以了解骨骼的健康狀況,評估代謝性骨病,以及監(jiān)測抗骨質(zhì)疏松治療的效果。
艾美捷Human FGF-23 ELISA Kit:
中文名稱:FGF-23 ELISA試劑盒(Kainos CY-4000)
英文名稱:HumanFGF-23ELISAKit
品牌:Kainos Laboratories
貨號:CY-4000
規(guī)格:96T
反應(yīng)種屬:Human
樣本類型:Serum
Human FGF-23 ELISA Kit組成:
1)FGF-23抗體包被微孔板(FGF-23板)
用抗FGF-23的鼠單克隆抗體包被微孔板96孔微孔板。
2)HRP標記的FGF-23抗體(FGF-23綴合物)
12mL與辣根過氧化物酶綴合的FGF-23的鼠單克隆抗體與防腐劑混合。該試劑應(yīng)儲存在2-10℃并避光。
3)FGF-23校準液(STD1~std7)
用防腐劑緩沖FGF-23的FGF-23標準品(Std1-Std7)12mL(Std1)和0.5mL(Std2-Std7)。7瓶含有防腐劑的緩沖堿的FGF-23。
4)測定稀釋劑(AssayDiluent)
12mL緩沖液。
5)顯色劑(底物)
12mL四甲基聯(lián)苯胺TMBZ)與過氧化氫脲。
6)FGF-23清洗緩沖液(10倍濃縮)
53毫升緩沖表面活性劑與防腐劑的10倍濃縮溶液。使用前,用去離子水將內(nèi)容物稀釋至10倍并充分混合。
7)終止液(終止液)
12mL0.5mol/L硫酸。
8)封板器
試劑盒中包含密封板三。
注:這些試劑應(yīng)在黑暗中儲存在2-10℃。使用前將所有試劑置于室溫下。
Human FGF-23 ELISA Kit檢測原理:
FGF-23 ELISA試劑盒是用于測量血清中FGF-23的雙位點酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒。兩種特異性小鼠單克隆抗體結(jié)合全長FGF-23。其中一種抗體固定在微量滴定板上進行捕獲。另一種抗體與HRP(辣根過氧化物酶)綴合用于檢測。
在這個反應(yīng)中,將含有FGF-23的樣品與固定在微量滴定孔的抗體一起培養(yǎng)。用抗體捕獲樣品中的FGF-23。在該反應(yīng)結(jié)束時,洗滌該孔以去除未結(jié)合的FGF-23和其他組分。
在第二個反應(yīng)中,將這種固定的FGF-23與HRP標記的抗體一起溫育以形成“三明治”復(fù)合物:抗FGF-23抗體 - N端FGF-23C端-HRP標記的抗FGF-23抗體。在該反應(yīng)結(jié)束時,洗滌該孔以除去未結(jié)合的組分。
在酶反應(yīng)中,將固定在孔上的夾心復(fù)合物與底物溶液一起孵育,然后用分光光度微量滴定板讀數(shù)器測量。與孔結(jié)合的復(fù)合物的酶活性與樣品中FGF-23的量成正比。通過繪制吸光度與FGF-23標準品各濃度的關(guān)系繪制標準曲線。從該曲線確定樣品中FGF-23的濃度。
使用注意事項:
1)測試樣品的儲存條件是什么?
使用鮮的血清樣本。如果您無法立即測試您的樣品,請將其存放在-70°C以下。避免解凍/重新冷卻循環(huán)。
在我們的實驗室測試中,在冰箱中13天后,給定樣品的活性降至86.6%。樣品在-80°C下可保持穩(wěn)定約三年,但在-20°C時穩(wěn)定性不能得到保證。
我們已確認zui多六次解凍/再次凍結(jié)循環(huán)可能不會影響活動,但我們建議小批量凍結(jié)樣本,以盡量縮短解凍/再次凍結(jié)周期。
2)試劑盒檢測的樣本
雖然血漿和血清都可以使用FGF-23 ELISA試劑盒進行檢測,但建議使用血清。
3)試劑盒是否可以測試動物樣本?
FGF-23ELISA試劑盒可用于測量小鼠,大鼠或猴血FGF-23水平。
4)試劑盒是否含有任何汞基防腐劑?
FGF-23 ELISA試劑盒不使用水銀防腐劑,如硫柳汞。標準溶液,稀釋溶液,酶標抗體溶液和濃縮洗滌溶液使用Kathon TM CG作為防腐劑。
5)操作預(yù)防措施
校準曲線必須為每次測試準備。
如果測試多個樣品,則反應(yīng)時間必須保持一致。
攪拌板時必須進行一級反應(yīng)。攪拌前應(yīng)密封盤子。
洗滌周期中必須遵守以下預(yù)防措施:
不要將洗版溶液留在其中。
一旦從井中充分移除洗滌液,立即進入下一步。
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