熒光淬滅又稱熒光熄滅或萃滅,是指導(dǎo)致特定物質(zhì)的熒光強(qiáng)度和壽命減少的所有現(xiàn)象。
引起熒光熄滅的物質(zhì)稱為熒光熄滅劑。
如,鹵素離子、重金屬離子、氧分子以及硝基化合物、重氮化合物、羧基和羰基化合物均為常見的熒光熄滅劑
原因很多,機(jī)理也很復(fù)雜,主要包括:
①因熒光物質(zhì)的分子和熄滅劑分子碰撞而損失能量;
②熒光物質(zhì)的分子與熄滅劑分子作用生成了本身不發(fā)光的的配位化合物;
③溶解氧的存在,使得熒光物質(zhì)氧化,或是由于氧分子的順磁性,促進(jìn)了體系間跨越,使得激發(fā)單重態(tài)的熒光分子轉(zhuǎn)變至三重態(tài);
④當(dāng)熒光物質(zhì)濃度過大時(shí),會(huì)產(chǎn)生自淬滅現(xiàn)象
一個(gè)特意為免疫熒光反應(yīng)設(shè)計(jì)的封片劑,*的配方使得染料的熒光不再衰退。常用的抗熒光衰退劑有AF1、AF2、AF3、AF87,其中AF87是一個(gè)*的油性抗熒光衰退劑。
產(chǎn)品選購指南:
AF1:用于檢測經(jīng)常浸泡在甘油中間組織切片,它的基本成分是甘油、磷酸鹽緩沖液、其它成分
AF2的基本成分是甘油和其它成分
AF3的基本成分是磷酸鹽緩沖液和其它成分,對(duì)于活細(xì)胞檢測特別適用
AF87特別的地方是含有無熒光浸油,這是為在高倍鏡下觀察特別設(shè)計(jì)的封片劑,對(duì)于DAPI染色特別有用(DAPI 在甘油基封片劑中有疏散的傾向)。
CFPVOH是聚乙烯醇的水溶液
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
17970-25 | CitiFluor™ AF1 | 25 ml |
17971-25 | CitiFluor™ AF2 | 25 ml |
17972-25 | CitiFluor™ AF3 | 25 ml |
17976-10 | CitiFluor™ AF87 | 10 ml |
17978-35 | Set of CitiFluor™ CFPVOH and AF100* | 25 ml+ 5 ml |
Fluoro-Gel是一種水基封片劑,主要用作組織切片免疫熒光染色后*性封片。由于有些含有甲苯或者二甲苯的封片劑在熒光染色步驟不適合應(yīng)用,此產(chǎn)品的*配方就發(fā)揮了作用,阻止了染色后的一些熒光信號(hào)快速變?nèi)醯默F(xiàn)象。推薦以下熒光染料染色后用本產(chǎn)品封片,F(xiàn)ITC, Texas Red, AMCA, Cy2, Cy3, Cy5, Alexa Fluoro 488, Alexa Fluoro 594, Green Fluorescent Protein (GFP), Tetramethylyrhodamine, Redox, Phycoerythrin (RP-E), Phyocyanin (PC), and Allophycocyanin (APC)。熒光封片劑封片后建議在暗處4ºC保存。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
17985-10 | Fluoro-Gel, (with Tris Buffer) | 20 ml |
17985-11 | Fluoro-Gel, (with Tris Buffer) | 100 ml |
17985-30 | Fluoro-Gel, (with TES Buffer) | 20 ml |
17985-31 | Fluoro-Gel, (with TES Buffer) | 100 ml |
17985-40 | Fluoro-Gel, (with PIPE Buffer) | 20 ml |
17985-41 | Fluoro-Gel, (with PIPE Buffer) | 100 ml |
備注:這是BioMedaTM Gel-Mount 的替代品!
2.附帶介紹與熒光封片膠Fluoro-Gel用途和用法*相同的一款封片劑:EMS-SHIELD MOUNT.
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
17985-09 | EMS SHIELD MOUNT | 30ml |
17985-100 | EMS SHIELD MOUNT | 100ml |
3.二號(hào)熒光封片劑Fluoro-Gel II Mounting Medium
與Fluoro-Gel相似(Tris Buffer),不同在于二號(hào)產(chǎn)品含有DAPI (4, 6-diamino-2-phenylindole),DAPI是DNA復(fù)染的染料。此產(chǎn)品在原位雜交技術(shù)或者其他需要DNA熒光染色的技術(shù)中經(jīng)常用到。DAPI發(fā)藍(lán)色熒光,RNA同時(shí)被染。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
17985-50 | Fluoro-Gel II | 20 ml |
17985-51 | Fluoro-Gel II | 100 ml |
4.三號(hào)熒光封片劑Fluoro-Gel III Mounting Medium
Fluoro-Gel III與Fluoro-Gel相似(Tris Buffer),不同在于三號(hào)產(chǎn)品加了PI (Propidium Iodide),這也是DNA復(fù)染的一種染料。三號(hào)產(chǎn)品在以下染料FITC, Texas Red, AMCA, Cy2, Cy3, Cy5, Alexa Fluoro 488, Alexa Fluoro 594, Green Fluorescent protein (GFP), Tetramethylyrhodamine, Redox, Phycoerythrin (RP-E), Phyocyanin (PC), and Allophycocyanin (APC)。本產(chǎn)品不含Phynylenediamine,Phynylenediamine極容易破壞Cy dyes, RP-E, PC, and APC的免疫熒光,PI發(fā)紅色熒光,RNA同時(shí)也被染色。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
17985-60 | Fluoro-Gel III | 20 ml |
17985-61 | Fluoro-Gel III | 100 ml |
5.抗熒光淬滅封片劑Fluoro Gel with DABCO
熒光分子與溶劑或其他分子之間相互作用使熒光強(qiáng)度減弱的現(xiàn)象稱為熒光淬滅。這通常是因?yàn)闊晒夥肿釉诩ぐl(fā)光的照射下,反復(fù)經(jīng)歷多次激發(fā)、發(fā)射過程后,往往造成分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生不可逆的變化,不能吸收更多的光子而進(jìn)一步發(fā)射熒光,這時(shí)就稱該分子被光漂白了。當(dāng)激光功率高時(shí),熒光分子有可能在高強(qiáng)度的激光下被漂白了。當(dāng)熒光物質(zhì)濃度過大時(shí),也會(huì)產(chǎn)生自淬滅現(xiàn)象。
針對(duì)熒光試驗(yàn)中遇到的光漂白或者熒光淬滅現(xiàn)象專門開發(fā)出Fluoro Gel with DABCO抗熒光淬滅封片劑。DABCO是抵抗熒光信號(hào)淬滅的化學(xué)品(抗氧化劑)。其主要原理是可以有效避免熒光染色后的固定細(xì)胞或組織等樣品不被氧化,從而防止熒光淬滅導(dǎo)致的熒光信號(hào)減弱現(xiàn)象,可以用于減緩各種常見熒光染料的熒光淬滅。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
17985-01 | Fluoro Gel with DABCO抗熒光淬滅封片劑 | 20ml |
17985-02 | Fluoro Gel with DABCO | 100ml |
6.附帶介紹與Fluoro-Gel with DABCO用途和用法*相同的一款封片劑:EMS-SHIELD MOUNT WITH DABCO.
附帶介紹與熒光封片膠Fluoro-Gel with DABCO用途和用法*相同的一款封片劑:EMS-SHIELD MOUNT WITH DABCO.
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
17985-150 | EMS-Shiels Mount With DABCO抗熒光淬滅封片劑 | 30ml |
17985-200 | EMS-Shiels Mount With DABCO | 100ml |
7.抗熒光衰退封片劑
是一種水基封片劑,在Fluoro Gel配方的基礎(chǔ)上加對(duì)苯二胺(1,4-phenylenediamine)。特別適用于阻止FITC、Texas Red、 AMCA、 Cy2、 Cy3、 Cy5、 Alexa Fluoro 388、 Alexa Fluoro 594 tetramethyly rhodamine,、 Redox.這些熒光染料的光漂白現(xiàn)象。封片后4度暗處保存。
注意,因?yàn)楹袑?duì)苯二胺,不適用于Cy dyes,、Phycoerythrin (R-PR)、 phycocyanin (PC)、 allophycocyanin (APC)這些染料的封片,封片劑自身顏色黑咖啡色,不與免疫熒光有任何反應(yīng)。
貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 |
17983-20 | Fluoro-Gel with Anti-Fading Agent | 20 ml |
17983-100 | Fluoro-Gel with Anti-Fading Agent | 100 ml |
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