一 目的:嚴格控制動物實驗環(huán)境不受病源微生物的危害; 保護動物的福利; 維持屏障環(huán)境的生物潔凈度;確保動物生產與實驗環(huán)境的一致性
二 依據:《實驗動物管理條例》(中華人民共和國國家科學技術委員會令第2號,1988), 《實驗動物環(huán)境及設施》(中華人民共和國國家標準,GB 14925-2001) 三、屏障環(huán)境的消毒
(一)啟用前的消毒 - 清潔屏障環(huán)境,檢查設施、設備狀況。開啟空調通風系統(tǒng)自凈1周。
- 用 2% 的新潔而滅和 300ppm 的強效消毒劑交替擦拭飼養(yǎng)室、走道、緩沖間、更衣室、風淋室的四壁、頂部、地面,并清洗進出風口。
- 次日用 5% 的碘伏重復擦拭,并用 0.5% 的過氧乙酸噴霧消毒環(huán)境。
- 關閉通風系統(tǒng)。
- 用 40% 清水 + 30% 高錳酸鉀 + 30% 甲醛熏蒸屏障系統(tǒng)內各區(qū)域。
- 請上海實驗動物質量檢驗監(jiān)督站檢測屏障環(huán)境各飼養(yǎng)室、走道、緩沖間、更衣室、風淋室的空氣落下菌,合格后方可投入使用。
(二)日常消毒 - 每個工作日須用配制好的消毒液隨時擦拭每層籠架。
- 結束每次的實驗工作后,清潔地面,然后用另一種消毒液擦拭地面。
- 用 0.2% 的過氧乙酸噴霧消毒環(huán)境。
- 結束所有工作后,用消毒液擦拭走道、緩沖間地面。
- 每月更換出風口濾材,并用消毒液清潔擦拭進出風口。
四、消毒液的配制與使用(一)0.5% 過氧乙酸的配制與使用 - 把過氧乙酸 A、B 型溶液按 1:0.8 比例混合,放置 24 小時后使用。
- 在盛有 998ml 清水的容器中加入 5ml 過氧乙酸混合液,混合均勻后即成 1000ml 0.5% 的過氧乙酸消毒液。
- 0.5% 過氧乙酸消毒液用于動物屏障系統(tǒng)內擦拭、噴霧消毒。
- 過氧乙酸消毒液須在使用時配制。
(二)2% 新潔爾滅(含苯扎溴銨5%)消毒液的配制與使用 - 取新潔爾滅溶液 400ml,加入 600ml 清水中,混合均勻后即成 1000ml 的 2% 新潔爾滅消毒液。
- 2% 新潔爾滅消毒液用于浸泡、擦拭消毒。
- 新潔爾滅消毒液須在使用時配制。
(三)5% 碘伏液的配制與使用 - 按每 50ml 碘伏加 950ml 清水的比例配制,混合均勻后即成 1000ml 的 5% 碘伏消毒液。
- 5% 碘伏液用于浸泡、擦拭消毒。
- 碘伏液須在使用時配制。
(四)300ppm 強效消毒劑(三氯異氰尿酸,含有效氯 30%)的配制與使用 - 按 1000ml 清水中加入 1g 強效消毒劑的比例,充分溶解,混合均勻后,即成 300ppm 的強效消毒劑。
- 強效消毒劑用于噴霧、浸泡、擦拭消毒。
- 強效消毒劑須在配制 20 分鐘后使用。
(五)高錳酸甲+福爾馬林消毒劑的配制與使用 - 按 40% 的清水 + 30% 高錳酸甲 + 30% 福爾馬林程序配制。
- 高錳酸甲 + 福爾馬林消毒劑用于屏障系統(tǒng)內的熏蒸消毒。
(六)消毒液的使用原則 - 按各消毒液的用途,以周為單位交替輪換使用。
- 各消毒劑不能混合配制使用。
- 必須使用產品有效期內的消毒液。
五、籠具架的清洗與消毒- 鼠籠每周至少更換 2 次,籠蓋每 2 周更換 1 次,飲水瓶每天更換,飼養(yǎng)籠架每月擦拭消毒 1 次。
- 每批動物實驗結束后,必須更換該批動物的籠具、水瓶,用消毒液擦拭籠架、飼養(yǎng)室,噴霧消毒,紫外照射后,進行下一批的動物實驗。
- 每次更換后的臟籠具送到走道前端的緩沖區(qū),并關緊門從原路退回。
- 從緩沖區(qū)取出臟籠具放置于清洗間的區(qū)域;把籠蓋先放在盛有消毒液的器具中浸泡,30 分鐘后刷洗干凈。
- 在清洗池中刷洗水瓶內壁及飲水嘴管;每2周用溫水加洗潔精液刷洗飲水瓶、飲水嘴管,并用清水充分沖洗干凈。
- 用刮板刮去臟籠內的墊料等污物,在清洗池中刷洗干凈籠具內外壁,并用消毒液浸泡30分鐘,瀝干。墊料等污物用塑料袋包裝,集中處理。
六、無菌工作衣的清洗與消毒管理- 進入屏障系統(tǒng)的人員必需穿著無菌工作衣且為一次使用。
- 所有無菌工作衣必須經 121℃、30 分鐘高溫高壓滅菌后使用。
- 經滅菌處理的工作衣放置在內更衣室衣柜內。
- 每次使用后清洗、涼干后放入滅菌盒,交由專業(yè)人員滅菌處理。
- 經滅菌處理的無菌衣,如果 2 周沒有使用,則應取出重新滅菌后使用。
- 無菌工作衣的使用期限為一年
七、飼料、墊料和飲用水的消毒管理- 檢查飼料的生產日期(批號),是否在保質期內,包裝是否符合國家標準 GB 14924.1-2001。
- 每批飼料須感官檢查,要求新鮮、無雜質、無異味、無霉變、無蟲蛀及鼠咬。
- 每批 Co60 飼料的存放期不超過 6 個月,發(fā)現(xiàn)包裝有破損或漏氣應挑出。
- 墊料應選擇無刺激味、無毒性、無油脂、無雜質、色澤較白、手感松軟、形狀均勻、經過篩選的墊料。
- 墊料經 121℃、30min 高溫、高壓滅菌處理。
- 飲用水為純水機生產,并經 121℃、30min 高溫、高壓滅菌處理。
- 動物的瓶裝水必須每天更換。
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