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          人寡樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒

          來源:上海撫生科技發(fā)展有限公司   2012年10月10日 09:20  

          人寡樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒
          本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

          試驗原理:
          MOG-Ab試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知MOG-Ab濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將MOG-Ab和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中MOG-Ab的濃度呈比例關系。

          試劑盒內(nèi)容及其配制
          試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
          96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
          塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
          標準品:80IU/L 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
          空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
          標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
          生物素標記的抗MOG-Ab抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
          親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
          洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
          底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
          底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
          終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
          標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

          人寡樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒自備材料
          1. 蒸餾水。
          2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
          3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

          安全性
          1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          操作注意事項
          1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
          2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
          3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
          4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
          5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
          7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
          8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
          9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

          樣品收集、處理及保存方法
          1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
          2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
          5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          試劑的準備
          1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
          80 IU/L (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
          40 IU/L (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
          20 IU/L (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          10 IU/L (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          5.0 IU/L (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          2.5 IU/L (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
          0 IU/L (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

          2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。


          操作步驟
          1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
          2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
          3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
          4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
          8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
          9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

          人寡樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體ELISA 檢測試劑盒建議使用的實驗方案
           標準品濃度(IU/L) 
          A 80 80 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          B 40 40 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          C 20 20 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          D 10 10 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          E 5.0 5.0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          F 2.5 2.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品
          H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

          局限
          6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

          試劑盒性能
          1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
          2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
          3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

          結(jié) 果 判 斷 與 分 析
          1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

          2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的MOG-Ab標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的MOG-Ab含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出濃度。

          3、檢測值范圍:0-80IU/L

          4、敏感度: 0.1 IU/L
          人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Human Interleukin 4,IL-4 ELISA試劑盒
          人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 Human Interleukin 3,IL-3 ELISA試劑盒
          人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒 Human Interleukin 2,IL-2 ELISA試劑盒
          人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒 Human soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA試劑盒
          人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒  Human Interleukin 2,IL-2 ELISA試劑盒
          人白介素1α(IL-1α )ELISA試劑盒 Human Interleukin 1α,IL-1α ELISA試劑盒
          人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒 Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA試劑盒
          人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒 Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA試劑盒
          人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 Human Interleukin 16,IL-16 ELISA試劑盒
          人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 Human Interleukin 13,IL-13 ELISA試劑盒
          人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 Human Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA試劑盒
          人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 Human Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA試劑盒
          人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒 Human Interleukin 11,IL-11 ELISA試劑盒
          人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒  Human Interleukin 10,IL-10 ELISA試劑盒
          人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 Human insulin-like growth factors binding protein 4,IGFBP-4 ELISA試劑盒
          人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒  Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA試劑盒
          人細胞毒素相關蛋白A(CagA)ELISA試劑盒  Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA試劑盒
          人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒  Human gastric inhibitory polypeptide,GIP ELISA試劑盒
          人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒  Human gastrin-reliasing peptide,GRP ELISA試劑盒
          人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒 Human pro-gastrin-releasing peptide, ProGRP ELISA試劑盒
          人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒 Human Collagen-like Bioprotein Ⅱ,HCBⅡ ELISA試劑盒
          人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒 Human Secretin ELISA試劑盒
          人多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒 Human Peptide YY ELISA試劑盒
          人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒 Human gastrin receptor,GsaR ELISA試劑盒
          人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒 Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA試劑盒
          人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA  Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISA試劑盒
          人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒 Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA試劑盒
          人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA試劑盒
          人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒 Human malondialchehyche,MDA ELISA試劑盒
          人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 Human Amylin ELISA試劑盒
          人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒 Human Motilin,MTL ELISA試劑盒
          人膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 Human cholecystokinin,CCK ELISA試劑盒
          人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA試劑盒
          人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒 Human Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA試劑盒
          人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 Human Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA試劑盒
           

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