通常而言,無血清培養(yǎng)基包括了無血清培養(yǎng)基、無蛋白無血清培養(yǎng)基、無動(dòng)物來源的無血清培養(yǎng)基、化學(xué)成分限定培養(yǎng)基等類型。
一、無血清培養(yǎng)基分類
1. 無血清培養(yǎng)基:是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基里補(bǔ)充了一些添加物,包括人激素、牛的轉(zhuǎn)鐵蛋白、牛血清白蛋白等,廣泛的應(yīng)用于多種細(xì)胞系的培養(yǎng),比如造血細(xì)胞系的培養(yǎng);
2. 無蛋白無血清培養(yǎng)基:該類培養(yǎng)基wanquan不含有血清和動(dòng)物來源的蛋白,但仍包含來源于植物蛋白的水解物或合成多肽片段等其他衍生物。由于所含蛋白極低,并且蛋白成分明確,有利于重組蛋白的下游生產(chǎn)、分離和純化,總體成本也會(huì)大幅度下降。但其通用性較差,需要針對(duì)目標(biāo)細(xì)胞株進(jìn)行特異性的優(yōu)化。目前主要應(yīng)用于生命科學(xué)研究和基因工程藥物開發(fā)等領(lǐng)域;
3. 無動(dòng)物來源的無血清培養(yǎng)基:是指以基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制的培養(yǎng)液無需添加牛血清,且該培養(yǎng)基成分中不含有任何動(dòng)物來源成分,即可培養(yǎng)細(xì)胞和維持生長(zhǎng)。僅采用蛋白水解物、重組蛋白或其他化學(xué)物質(zhì)來取代動(dòng)物源蛋白。它既可以滿足細(xì)胞生長(zhǎng)及增殖的需要,還能夠降低培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本,提高重組蛋白類藥物安全性。目前主要應(yīng)用于生物藥品的研發(fā)和生產(chǎn)中。比如CHO細(xì)胞、293細(xì)胞、Vero細(xì)胞、C6細(xì)胞等;
4. 化學(xué)成分限定培養(yǎng)基:此類培養(yǎng)基wanquan無血清、無蛋白,成分wanquan明確,可以保證培養(yǎng)基批次間的一致性。它不但有利于跟蹤細(xì)胞培養(yǎng)的代謝情況,而且在后續(xù)的分離純化中也非常方便,是目前最為安全和理想的培養(yǎng)基??墒遣⒎撬械募?xì)胞都能在化學(xué)成分限定培養(yǎng)基中達(dá)到較高的表達(dá)水平,需要研究者和使用者根據(jù)具體的用途不斷改進(jìn)設(shè)計(jì)方案和配方。
二、無血清培養(yǎng)基特點(diǎn)
優(yōu)點(diǎn) | (1)無血清培養(yǎng)基不含血清,提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性; (2)避免了血清所帶來的血源性污染等問題,減少血清未知成分對(duì)細(xì)胞的損傷; (3)相比于含有血清的培養(yǎng)基,大大簡(jiǎn)化了生產(chǎn)過程; (4)無血清培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)來源于重組蛋白或蛋白水解產(chǎn)物,提高了實(shí)驗(yàn)效率; (5)無血清培養(yǎng)基的成分和含量相對(duì)明確,能提高細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量并有利于產(chǎn)物的分離提純。 |
缺點(diǎn) | (1)無血清培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本較高,不利于商業(yè)化開發(fā)與應(yīng)用; (2)多數(shù)無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用不廣泛,通用性較低,不具有普遍性; (3)細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中,對(duì)外界條件如物理和化學(xué)等因素的改變較敏感; (4)目前低血清培養(yǎng)基研究開發(fā)的相關(guān)數(shù)據(jù)缺乏在線交流,可查閱的資料有限,不能有效促進(jìn)細(xì)胞“馴化”技術(shù)的發(fā)展。 |
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