前言:細(xì)胞活性是判斷體外培養(yǎng)細(xì)胞在某些條件下是否能正常生長(zhǎng)的重要指標(biāo),如藥物處理、紫外線照射、培養(yǎng)條件變化等。細(xì)胞活力檢測(cè)是生物學(xué)研究中評(píng)估細(xì)胞狀態(tài)的重要方法,常用來(lái)判斷細(xì)胞的增殖、存活和健康狀況。目前常用的方法有很多,如臺(tái)盼藍(lán)染色法、細(xì)胞凝集法、MTT法、CCK8法等。那你知道CCK8法原理是什么嗎?
一、細(xì)胞活力檢測(cè)CCK8法原理
CCK8法的工作原理在于WST-8在細(xì)胞內(nèi)被線粒體還原酶轉(zhuǎn)化為橙黃色的甲臜(formazan)產(chǎn)生可溶性產(chǎn)物。這一過(guò)程與細(xì)胞的活性密切相關(guān),活細(xì)胞數(shù)量越多,轉(zhuǎn)化出的甲臜量也越高,因此可以通過(guò)測(cè)定光密度(OD值)來(lái)評(píng)估細(xì)胞的存活率和增殖能力。操作過(guò)程簡(jiǎn)單,只需將CCK8試劑加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的孵育后,再使用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度即可。
在實(shí)驗(yàn)中,通常需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,以便于定量分析。通過(guò)對(duì)比不同濃度的細(xì)胞樣本所產(chǎn)生的OD值,可以準(zhǔn)確判斷細(xì)胞活性。此外,CCK8法相較于傳統(tǒng)的MTT法,具有更高的靈敏度和選擇性。它不需要有機(jī)溶劑的提取步驟,減少了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的誤差和復(fù)雜性,大大提高了實(shí)驗(yàn)的可靠性和效率。
二、產(chǎn)品推薦
Elabscience增強(qiáng)型細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(CCK-8)(E-CK-A362)
產(chǎn)品英文名稱:Enhanced Cell Counting Kit 8 (WST-8/CCK8)
貨號(hào):E-CK-A362
規(guī)格:500Tests、100Tests、500Tests×20
檢測(cè)原理:WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),在電子載體存在的情況下,WST-8被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成水溶性的橙黃色formazan,生成的formazan的量與活細(xì)胞數(shù)量成正比,通過(guò)檢測(cè)在450 nm處的吸光度,可以間接計(jì)算活細(xì)胞的量。
檢測(cè)方法:比色法
樣本類型:細(xì)胞
檢測(cè)儀器:酶標(biāo)儀
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