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          Biotium-DNA凝膠提取試劑盒,確保高靈敏度與高回收率

          來源:武漢艾美捷科技有限公司   2024年12月02日 16:45  

          BiotiumDNA凝膠提取試劑盒是一種基于硅膠旋轉(zhuǎn)柱的DNA提取試劑盒用于從TAE中的瓊脂糖凝膠中純化40bp-40kb DNA片段的試劑盒或TBE緩沖器。每個(gè)柱的最大結(jié)合能力為10微克DNA。BiotiumDNA凝膠提取試劑盒與GelRedGelGreen核酸凝膠染色劑,以及其他常用的核酸凝膠污漬。純化的DNA與常見的下游應(yīng)用兼容例如轉(zhuǎn)化、測(cè)序、PCR和限制性消化。

           

          艾美捷Biotium-DNA凝膠提取試劑盒31030組成

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          儲(chǔ)存和搬運(yùn):

          將試劑盒儲(chǔ)存在室溫下。套件組件自日期起穩(wěn)定一年按照建議存儲(chǔ)時(shí)收到s據(jù)。結(jié)合緩沖液含有離液硫氰酸胍鹽,具有刺激性。使用手套和其他合適的使用此試劑盒時(shí)的實(shí)驗(yàn)室保護(hù)。漂白劑與硫氰酸胍混合會(huì)產(chǎn)生有害的副產(chǎn)品。請(qǐng)勿將凝膠提取試劑盒中的廢物與漂白劑。

           

          檢測(cè)協(xié)議:

          在使用前,請(qǐng)確保向洗滌緩沖液濃縮液中加入100%未變性乙醇。對(duì)于31030-50,向10 mL洗滌緩沖液濃縮液中加入40 mL乙醇。對(duì)于31030-250,向55 mL洗滌緩沖液濃縮液中加入220 mL乙醇。離心步驟應(yīng)在常規(guī)臺(tái)式微量離心機(jī)中以17,900 x g(大約10,000 rpm)進(jìn)行。

          1. 使用干凈的鋒利工具,如手術(shù)刀,切除含有感興趣DNA片段的瓊脂糖凝膠切片。稱量凝膠切片,記錄重量,并將凝膠切片轉(zhuǎn)移到1.7 mL微量離心管中。

          2. 1體積的凝膠切片中加入3體積的結(jié)合緩沖液(100 mg大約等于100 μL)。

          3. 50°C下孵化凝膠切片和結(jié)合緩沖液10分鐘,或直到凝膠切片w全溶解。在此孵化過程中偶爾漩渦混合將加速溶解過程。

          4. 在凝膠w全溶解后檢查溶液的顏色。如果是黃色,溶液的pH值適合DNA結(jié)合到柱子上。然而,如果溶液呈橙色、紅色或紫色,只需向溶液中加入少量3 M醋酸鈉pH 5.0,直到顏色恢復(fù)為黃色。

          5. 為了更有效地回收小于500 bp或大于4 kb的片段,向管中加入1體積的異丙醇并混合。

          6. 將樣品吸入提供的柱子中,放入收集管中,離心1分鐘。如果有多余的樣品,只需分幾輪處理,確保將額外的樣品應(yīng)用到相應(yīng)的柱子上。

          7. 丟棄流穿液,并將現(xiàn)在含有結(jié)合DNA的柱子放回收集管中。

          8. 向柱子中加入750 μL洗滌緩沖液(確保已加入乙醇),并離心1分鐘。

          9. 丟棄流穿液,將柱子放回收集管中。再離心1-5分鐘以去除柱子中殘留的乙醇。

          10. 小心地取下柱子,放入干凈的1.5 mL微量離心管中。

          11. 向柱子中心加入30-50 μL洗脫緩沖液。孵化1分鐘,然后離心1分鐘以收集純化后的DNA。

          12. 將洗脫的DNA儲(chǔ)存在-20°C。

           

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          Biotium致力于開發(fā)和生產(chǎn)用于生物醫(yī)學(xué)研究的熒光指示劑及其他特殊生化產(chǎn)品。其產(chǎn)品被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生 物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液流動(dòng)檢測(cè)及大規(guī)模藥物篩選等眾多領(lǐng)域。艾美捷科技是Biotium的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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