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通過 VIDEODROP 評估 LNP 濃度示例分析
使用 VIDEODROP 進行 LNP 分析
VIDEODROP 是一種基于干涉原理的創(chuàng)新納米級成像技術，能夠在短時間內以高重復性測量納米顆粒的尺寸和濃度。
OneDrop & OneClick 實時測量
高再現(xiàn)性最大限度地減少測量儀之間的誤差
按原樣測量未純化和未標記的樣品
粒徑、分散狀態(tài)、zeta 電位等是核酸藥物評價中的重要理化參數(shù)，但使用 VIDEODROP 的單顆粒測量技術監(jiān)測顆粒濃度使其變得不那么復雜，可以收集數(shù)據以幫助標準化質量控制，在執(zhí)行測定步驟之前進行穩(wěn)定性評估和比較研究，并在新配方開發(fā)、制造工藝和儲存條件中有效比較顆粒計數(shù)。
因此，我們將使用VIDEODROP來比較不同條件下mRNA-LNP顆粒的數(shù)量，并重點介紹過程或脂膜成分對轉染活性的影響的測量結果。
圖 1. VIDEODROP 如何用于 mRNA-LNP 生產的圖片
LNP 顆粒濃度很重要的過程
使用 mRNA-LNP 制造納米藥物時需要評估多個項目。
在這里，我們將針對以下四點檢查 VIDEODROP 測量和流式細胞儀對不同制造條件的樣品的測量：（1）用于合成 LNP 的試劑類型，（2）混合 LNP 和 RNA 的速度，（3）損失由于緩沖液更換，以及（4）由于儲存條件造成的損失，我們比較了所使用的核酸遞送測定的結果，并評估了每個步驟中濃度測量的重要性。
分析結果 顆粒濃度是否影響轉染活性？
脂質成分的優(yōu)化
在該實驗中，使用相同的工藝制造了兩種具有不同脂質成分的LNP，并對每個樣品進行了測量。
顆粒濃度不受脂質組合物的影響，但脂質組合物 1 與脂質組合物 2 相比顯示出更高的活性。盡管顆粒數(shù)量幾乎相同，脂質組合物1比脂質組合物2更有效。
混合速度優(yōu)化
在這里，作為混合速度的優(yōu)化評估，我們通過改變微流體裝置上的混合速度（流速）從 2 到 18 mL/min 來比較 LNP 的濃度和轉染活性。
盡管 LNP 本身的組成相同，但改變混合速度對顆粒濃度和轉染活性有顯著影響。它與粒子數(shù)有直接關系。
優(yōu)化緩沖液交換
使用切向流過濾（TFF）的緩沖液交換和濃縮步驟用于將用于LNP合成的緩沖液替換為用于施用的緩沖液，并增加制劑的濃度并提高效價這是LNP合成中的重要步驟。
在這種情況下，緩沖液交換步驟中的顆粒數(shù)量減少了 75%，證實需要優(yōu)化 TFF 流程。
存儲優(yōu)化
優(yōu)化儲存條件對于確保產品質量至關重要。在本實驗中，我們測量了儲存在 +4°C 或 -20°C 下的相同 mRNA-LNP。
測量結果表明，與+4°C條件相比，-20°C儲存導致活性下降和顆粒數(shù)量減少。
結論
Videodrop 是一款即用型工具，只需一滴即可測量 LNP 顆粒濃度和顆粒尺寸分布。
Videodro 可讓您快速輕松地測量濃度，從而更好地控制制造過程。
使用納米顆粒計數(shù)標準化基于細胞的測定（轉染活性）可改善比較研究中不同條件下產生的 LNP 的評估
VIDEODROP是完成評估LNP質量的分析策略的理想工具。
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