色譜技術(shù)是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)分析的分離方法，通過樣品在固定相和流動相之間的分配差異，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離和檢測。以下是色譜技術(shù)的基本概念和分類，以及其應(yīng)用領(lǐng)域的簡介。

  色譜技術(shù)的基本概念  

1、固定相

固定相是色譜系統(tǒng)中用于吸附或分配樣品組分的材料，可以是固體或液體，通常涂覆在支持介質(zhì)上。固定相的特性決定了分離的選擇性。

2、流動相

流動相是帶動樣品通過固定相的液體或氣體，樣品組分在流動相和固定相之間分配，形成不同的滯留時(shí)間，從而實(shí)現(xiàn)分離。

3、保留時(shí)間保留時(shí)間

樣品組分從進(jìn)樣到被檢測到所需的時(shí)間，用于表征不同組分的分離行為。

4、分離機(jī)制

樣品分離主要基于以下機(jī)制之一或組合：

吸附作用

分配作用

離子交換

分子排阻

  色譜的分類  

根據(jù)操作模式和分離原理，色譜技術(shù)主要分為以下幾類：

1、按流動相分類

氣相色譜：

以氣體為流動相，適合揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性樣品。

液相色譜：

以液體為流動相，適合不揮發(fā)或熱不穩(wěn)定樣品。

2、按固定相分類

柱色譜：

固定相填充在色譜柱中，是最常見的形式。

薄層色譜：

固定相涂覆在玻璃板或塑料片上，適合快速篩查。

3、按分離機(jī)制分類

分配色譜：

利用樣品在流動相和固定相間的溶解性差異。

吸附色譜：

利用樣品分子與固定相表面吸附能力的不同。

離子交換色譜：

利用樣品離子與固定相離子交換能力的差異。

凝膠色譜：

根據(jù)分子大小差異進(jìn)行分離，也稱分子篩色譜。

  液相色譜（HPLC）的知識  

HPLC 是現(xiàn)代液相色譜的技術(shù)，使用高壓泵驅(qū)動流動相，固定相通常是填充在色譜柱中的顆粒材料。

1、主要組件

泵：提供高壓流動相輸送。

進(jìn)樣器：用于準(zhǔn)確控制樣品的進(jìn)樣量。

色譜柱：包含固定相，用于分離樣品。

檢測器：檢測經(jīng)過色譜柱后的樣品組分，常見類型有UV、熒光、質(zhì)譜等。

2、分離模式

正相色譜：固定相極性高，流動相極性低，適合非極性化合物分離。

反相色譜：固定相極性低（如C18柱），流動相極性高，適合極性化合物分離。