作為一種基于電阻脈沖感應(yīng)（RPS）原理的單顆粒檢測(cè)設(shè)備，NanoCoulter可以在一次檢測(cè)中精確的得到每一個(gè)顆粒的粒徑和電位數(shù)據(jù)以及二者的相互關(guān)系，因此僅通過一次檢測(cè)，研究人員不僅得到了RVG-Exo/CBD的粒徑分布，還得到了粒徑-電位的二維分布圖。通過該圖可以清晰的看到顆粒粒徑與電位的關(guān)系。

圖1. RVG-Exo/CBD的粒徑分布圖和電位-粒徑分布

NanoCoulter性能亮點(diǎn)：

研究者利用NanoCoulter對(duì)細(xì)胞外囊泡進(jìn)行精確的zeta電位及粒度分析，為開發(fā)新型腦靶向藥物遞送系統(tǒng)提供了可靠的數(shù)據(jù)支持。該研究利用改造后的EVs包裹CBD藥物，并通過NanoCoulter的精準(zhǔn)測(cè)量，證實(shí)了高效的藥物封裝率，進(jìn)一步驗(yàn)證了NanoCoulter在納米尺度藥物遞送方面的應(yīng)用價(jià)值。

細(xì)胞外囊泡根據(jù)其來源的不同，其在人體內(nèi)不僅有正面作用，也可能產(chǎn)生負(fù)面作用，腫瘤細(xì)胞在增殖的過程中也會(huì)釋放細(xì)胞外囊泡，這些囊泡像是微小的“間諜”，它們能夠潛入機(jī)體，操控免疫系統(tǒng)，甚至為腫瘤轉(zhuǎn)移“鋪路”。在這項(xiàng)研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)腫瘤來源的細(xì)胞外囊泡能夠激活肺纖維細(xì)胞中的S100A10分子，這種分子可以招募髓系抑制細(xì)胞 (MDSCs) 至肺部，而MDSCs可以削弱機(jī)體對(duì)腫瘤的抵抗能力，加速腫瘤的轉(zhuǎn)移^[2]。

圖 2 兩種細(xì)胞系提取的細(xì)胞外囊泡粒徑與濃度分布

NanoCoulter性能亮點(diǎn)：

該研究利用NanoCoulter分析腫瘤來源的細(xì)胞外囊泡的粒徑分布，并結(jié)合其他技術(shù)，揭示了腫瘤來源的EVs在激活S100A10分子，以及干涉肺部免疫微環(huán)境方面的重要作用。該研究再次證明了NanoCoulter在評(píng)估EVs的生物學(xué)功能方面的強(qiáng)大能力。

在該項(xiàng)研究中，研究人員使用NanoCoulter對(duì)患者血漿提取產(chǎn)物進(jìn)行表征，驗(yàn)證其為細(xì)胞外囊泡，并確定其粒徑及濃度。可以看出三個(gè)血漿提取樣本的粒徑都在70-90 nm左右，與常見細(xì)胞外囊泡粒徑范圍相符合。同時(shí)下游的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)也驗(yàn)證了這些樣本含有特征標(biāo)志物，證明了所提取到的產(chǎn)物確實(shí)為細(xì)胞外泌體。這為后續(xù)探究致病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)開展，提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

圖 3 NanoCoulter對(duì)三個(gè)患者的血漿提取樣本的表征

NanoCoulter性能亮點(diǎn)：

研究者使用NanoCoulter精確檢測(cè)并相互比較了不同供體來源的血漿外泌體的粒徑及粒徑分布。利用NanoCoulter的RPS檢測(cè)技術(shù)與TEM和Western blot等方法形成正交互補(bǔ)驗(yàn)證。也為未來的外泌體精確表征展示了一套最小化的范式。