MAN1B1抗體的保存與使用方法及應(yīng)用領(lǐng)域與實(shí)例！

一、背景知識(shí)

MAN1B1抗體是一種在科研和臨床診斷中具有特定用途的抗體，它主要用于檢測(cè)和量化細(xì)胞或組織中蛋白MAN1B1的表達(dá)水平。MAN1B1蛋白在人體中扮演著重要的角色，特別是在蛋白質(zhì)運(yùn)輸和代謝過程中。在某些疾病狀態(tài)下，例如某些類型的癌癥或神經(jīng)系統(tǒng)疾病，MAN1B1的表達(dá)水平可能會(huì)發(fā)生改變。因此，對(duì)其抗體的使用可以幫助科研人員和醫(yī)生更好地理解相關(guān)疾病的病理機(jī)制或評(píng)估治療效果。

MAN1B1抗體是一種針對(duì)MAN1B1（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶1）蛋白的特異性抗體，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中。以下是關(guān)于MAN1B1抗體的詳細(xì)介紹：

二、基本信息

抗體名稱：MAN1B1抗體

靶點(diǎn)：MAN1B1蛋白（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶1）

來源：通常由兔子（Rabbit）、山羊（Goat）或其他動(dòng)物通過免疫制備得到

克隆性：可以是單克?。?/span>Monoclonal）或多克隆（Polyclonal）

亞型：通常為IgG

規(guī)格與價(jià)格：不同供應(yīng)商提供的MAN1B1抗體規(guī)格和價(jià)格可能有所不同。例如，某些品牌的MAN1B1抗體規(guī)格為100µg/0.5ml，價(jià)格范圍在61.0?279.0之間（美元）。而國內(nèi)供應(yīng)商的價(jià)格可能以人民幣計(jì)價(jià)，具體價(jià)格請(qǐng)參考各供應(yīng)商提供的信息。

三、產(chǎn)品特性

特異性：MAN1B1抗體具有高度特異性，能夠準(zhǔn)確識(shí)別并結(jié)合MAN1B1蛋白。

穩(wěn)定性：產(chǎn)品穩(wěn)定性好，能夠在適當(dāng)?shù)谋４鏃l件下長(zhǎng)期保持活性。

應(yīng)用范圍：MAN1B1抗體可用于多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)中，包括Western Blotting（WB）、Immunohistochemistry（IHC）、Immunofluorescence（IF）、ELISA等。具體應(yīng)用范圍請(qǐng)參考各供應(yīng)商提供的產(chǎn)品說明書。

四、保存與使用

保存條件：MAN1B1抗體應(yīng)儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)臏囟认?，通常?20°C或更低溫度，以避免抗體失活。請(qǐng)按照供應(yīng)商提供的保存條件進(jìn)行儲(chǔ)存。

使用前準(zhǔn)備：使用前請(qǐng)確保MAN1B1抗體已恢復(fù)至室溫，并按照實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行稀釋。

注意事項(xiàng)：在使用過程中，請(qǐng)避免反復(fù)凍融MAN1B1抗體，以免影響其活性和穩(wěn)定性。

五、應(yīng)用領(lǐng)域

MAN1B1抗體在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域，包括但不限于：

腫瘤研究：MAN1B1與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，MAN1B1抗體可用于腫瘤相關(guān)蛋白的檢測(cè)和鑒定。

細(xì)胞生物學(xué)：MAN1B1作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的一種重要酶類，參與多種細(xì)胞生物學(xué)過程。MAN1B1抗體可用于研究這些過程的分子機(jī)制。

免疫學(xué)：MAN1B1可能與免疫系統(tǒng)的功能調(diào)節(jié)有關(guān)，MAN1B1抗體可用于免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)和研究。

六、供應(yīng)商與品牌

市場(chǎng)上有多家供應(yīng)商和品牌提供MAN1B1抗體產(chǎn)品，如Santa Cruz Biotechnology、上海雅吉生物科技有限公司、北京索萊寶科技有限公司等。不同供應(yīng)商和品牌的產(chǎn)品在規(guī)格、價(jià)格、質(zhì)量和服務(wù)等方面可能存在差異，用戶可以根據(jù)自身需求選擇合適的抗體產(chǎn)品。

七、應(yīng)用實(shí)例

MAN1B1抗體可以用于改造人腎胚細(xì)胞HEK293以生產(chǎn)高甘露糖型溶酶體蛋白：

研究構(gòu)建了可以生產(chǎn)高比例的高甘露糖型糖蛋白和低比例的復(fù)合型糖蛋白的細(xì)胞株。

首先在HEK293細(xì)胞中敲除(Knock Out,KO)了兩個(gè)高爾基體(Golgi)α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ的控制基因(MAN1A1和MAN1A2)。結(jié)果顯示單敲細(xì)胞株MAN1A1KO-24和MAN1A2KO-37中的N-糖鏈結(jié)構(gòu)幾乎沒有發(fā)生改變,而在MAN1A1和MAN1A2雙敲細(xì)胞(Double KO,D-KO)中,與野生型對(duì)比凝集素ConA-FITC染色后信號(hào)增加為野生型的四倍,高甘露糖型N-糖鏈增加,PHA-L4-FITC凝集素染色信號(hào)下降15%,復(fù)合型N-糖鏈減少。但復(fù)合型N-糖鏈依然在D-KO細(xì)胞中被檢測(cè)存在,為了清除剩余的復(fù)合型N-糖鏈,在篩選了人源細(xì)胞中與N-糖鏈合成途徑可能存在關(guān)聯(lián)的α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ基因后,發(fā)現(xiàn)敲除一個(gè)編碼內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ基因(MAN1B1)可以減少幾乎所有復(fù)合型糖鏈。在這個(gè)三敲細(xì)胞株(MAN1A1、MAN1A2和MAN1B1的Triple KO,T-KO)中,相較于野生型細(xì)胞,ConA-FITC染色后信號(hào)增加為野生型的5.3倍,高甘露糖型糖鏈比例相較于D-KO進(jìn)一步增加,凝集素ConA-FITC染色后信號(hào)與背景幾乎相同,遠(yuǎn)低于野生型數(shù)值。同時(shí)對(duì)野生型、D-KO細(xì)胞和T-KO細(xì)胞進(jìn)行全細(xì)胞糖鏈分析,野生型存在至少27種不同類型糖鏈,D-KO細(xì)胞依然存在復(fù)合型糖鏈,在T-KO細(xì)胞株中則不能檢測(cè)到復(fù)合型糖鏈。

利用三敲細(xì)胞(T-KO)表達(dá)重組溶酶體蛋白α-半乳糖酶A(GLA)和溶酶體酸性脂肪酶(LIPA),MAN1B1抗體免疫印跡(Western Blot)結(jié)果顯示在T-KO細(xì)胞中表達(dá)的重組溶酶體蛋白上的糖鏈對(duì)糖苷酶EndoHf處理敏感,暗示T-KO細(xì)胞表達(dá)的GLA和LIPA蛋白上的N-糖鏈為高甘露糖型糖鏈。同時(shí)使用野生型細(xì)胞和T-KO細(xì)胞表達(dá)人源重組蛋白EGFPFLAG-HyHEL10和溶酶體酸性脂肪酶后,通過MALDI-TOF飛行質(zhì)譜對(duì)蛋白上糖鏈進(jìn)行分析,在野生型中抗體分子上糖鏈主要為復(fù)合型,T-KO細(xì)胞中為高甘露糖型。野生型細(xì)胞溶酶體酸性脂肪酶分子上糖鏈既有復(fù)合型又有高甘露糖型,而T-KO細(xì)胞則全部為高甘露糖型,并且主要為Man9-GlcNAc2和Man8-GlcNAc2的形式。

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