1. 適用鍵合相 反相色譜柱鍵合相包括：C18、C8、C4、C1、Phenyl、PFP、aQ 等。

2. 柱體積 色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算： V=0.68 π (d/2)2 L·10-3 V 為色譜柱柱體積（mL），d 為色譜柱內(nèi)徑（mm），L 為色譜 柱長度（mm）。

3. 色譜柱柱效測試與保存 反相色譜柱出廠時都經(jīng)過柱效測試，所用化合物為茶堿、鄰二 甲苯、對硝基苯胺、苯甲酸甲酯和二甲苯，如有不同，以柱效 報告為準(zhǔn)。 在條件允許情況下，請對新色譜柱進行柱效測試。 反相色譜柱出廠的保存溶劑詳見柱盒或 COA 報告。

4. 溫度 所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于 60℃。

5、 樣品制備 最好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度 洗脫，則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。 樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，最好使用 0.45 μm 或更小孔徑 的濾膜過濾。同時建議在刪除空格色譜系統(tǒng)中使用在線過濾器。 樣品溶液如果使用強洗脫溶劑（例如，流動相為水，樣品溶劑 為甲醇），為達到較好峰形，需要降低進樣量（以 250×4.6  mm 規(guī)格為例，小于 10 μL）。

6、 流動相 所有流動相，特別是含有緩沖鹽的流動相，最好實驗當(dāng)天配制； 如果使用了早前配制的流動相，請確保流動相 pH 值是否變化， 并確保流動相沒有發(fā)霉長菌。 流動相的 pH 值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。此說明書 上所列的所有的色譜柱上都建議使用 pH 范圍為 2~8 之間的流 動相，如果需要使用 pH 更高（1.5-10）的流動相的硅膠柱， 請選用 Acclaim PolarAdvantage II (PA2)、Acclaim AMG C18、 Accucore Polar Premium 等色譜柱，具體使用情況請咨詢工程 師或者參考該柱子的說明書。 如實驗方法中使用高比例的水（>95%）作為流動相條件，強烈 建議使用耐水鍵合相，例如 Accucore aQ、Hypersil GOLD aQ、 Aquasil C18、Syncronis aQ 等色譜柱，保證重現(xiàn)性。 所有流動相都需使用 0.22 μm 濾膜過濾。