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Science子刊！單個(gè)外泌體表征分析技術(shù)助力卵巢癌外泌體研究取得重要進(jìn)展
外泌體是包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡，是細(xì)胞間信號(hào)傳輸?shù)妮d體。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，它們廣泛存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁等體液中，參與細(xì)胞間通訊。近年來(lái)，外泌體的研究熱度持續(xù)攀升，已成為當(dāng)前生命科學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的一大熱點(diǎn)，在 2023 年國(guó)家自然科學(xué)基金獲批項(xiàng)目中，外泌體研究相關(guān)項(xiàng)目的總數(shù)近 390 個(gè)，立項(xiàng)的總金額突破 1.5 億元。但由于外泌體的尺寸（ 30~200 nm ），常規(guī)的光學(xué)顯微鏡無(wú)法對(duì)其進(jìn)行成像分析，因此很少有技術(shù)能夠?qū)蝹€(gè)外泌體進(jìn)行物理表征和蛋白分型。
美國(guó)NanoView Biosciences 公司推出的全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng) ExoView采用特殊的 SP-IRIS 成像技術(shù)，只需要少量樣品即可一次完成外泌體計(jì)數(shù)、粒徑、蛋白表達(dá)、蛋白共定位、亞群分布的分析。全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng) ExoView 于 2018 年被推出后，便引起了外泌體領(lǐng)域科研工作者的廣泛關(guān)注，目前在全球已近 100 多個(gè)實(shí)驗(yàn)室采用該技術(shù)，發(fā)表文獻(xiàn)超過(guò) 290 篇。在過(guò)去的 2023 年，使用 ExoView 發(fā)表的論文出現(xiàn)井噴性增長(zhǎng)，短短數(shù)月已經(jīng)發(fā)表了超過(guò) 93 篇。近期，Akira Yokoi團(tuán)隊(duì)[1]利用該系統(tǒng)在卵巢癌外泌體研究領(lǐng)域取得重要進(jìn)展，成果發(fā)表于高水平期刊《Science Advances》上。
全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng) ExoView 系統(tǒng)
■ 通過(guò)聚酮涂層納米線(xiàn)識(shí)別高級(jí)別漿液性卵巢癌分泌的特異性外泌體
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早期卵巢癌是最容易治療的，但其很難被發(fā)現(xiàn)和診斷，因此開(kāi)發(fā)新的診斷方法非常緊迫。癌細(xì)胞源性的外泌體 ( EV ) 具有特殊的蛋白質(zhì)特征，其作為疾病生物標(biāo)志物具有很好的前景。高級(jí)別漿液性卵巢癌 ( HGSOC ) 是上皮性卵巢癌的致命亞型。Akira Yokoi[1]等通過(guò)LC-MS/MS 分析來(lái)自細(xì)胞系或患者血清及腹水的小型 EV（sEV）和中型/大型 EV ( m/lEV ) 的 HGSOC 特異性膜蛋白，揭示了兩種 EV 亞型均具有特殊的蛋白質(zhì)組特征，其中 FRα、Claudin-3 和 TACSTD2 被鑒定為 HGSOC 特異性 sEV 蛋白。此外，研究人員為了使用簡(jiǎn)單易用的微流體裝置分離 EV，開(kāi)發(fā)了聚酮涂層納米線(xiàn) ( pNW )，可以有效地從生物流體中純化 sEV。使用 pNW 分離的 sEV 的多重陣列檢測(cè)對(duì)癌癥患者具有特殊的可檢測(cè)性并可監(jiān)測(cè)其臨床狀態(tài)?？傊褂?pNW 的 HGSOC 特異性標(biāo)記物檢測(cè)方法可作為臨床檢測(cè)生物標(biāo)記物的一個(gè)具有前景的平臺(tái)。
其中，研究人員把樣本分成四組，分別是兩種癌細(xì)胞 ( CAOV3、 OVCAR3 ) 和兩種非癌細(xì)胞 ( HOSE1 和 MTK )，并利用全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng) ExoView 檢測(cè)從四種細(xì)胞系分離出的外泌體。結(jié)果顯示被 CD63 抗體捕獲的 Claudin-3 陽(yáng)性外泌體數(shù)量在各組之間幾乎沒(méi)有差異，而 FRα 和 TACSTD2 陽(yáng)性外泌體更多存在于癌細(xì)胞組別中（ CAOV3 和 OVCAR3 ）（ 圖1 ）。另外，與其他樣品組對(duì)比，被 CD63 抗體以及 CD81 抗體捕獲的 FRα 和 TACSTD2 陽(yáng)性外泌體明顯在 OVCAR3 細(xì)胞中更多（ 圖1 ），熒光成像圖對(duì)這個(gè)結(jié)論進(jìn)行了佐證（ 圖2 ）。
圖 1 ExoView 檢測(cè)從癌細(xì)胞 ( CAOV3 和 OVCAR3 ) 以及非癌細(xì)胞 ( HOSE1 和 MTK ) 分離的外泌體的數(shù)量
圖 2 ExoView對(duì)癌細(xì)胞 ( CAOV3和 OVCAR3 ) 以及非癌細(xì)胞 ( HOSE1 和 MTK ) 分離的外泌體進(jìn)行熒光成像分析
在上述這篇文章中，科學(xué)家借助美國(guó) NanoView Biosciences 公司研發(fā)的全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng) ExoView ，直接檢測(cè)樣本中的外泌體，無(wú)需純化，操作簡(jiǎn)單。一次結(jié)果直接輸出外泌體粒徑，絕對(duì)數(shù)目，蛋白表型，不同亞群的含量、多色熒光成像圖?？傊?，此篇文章有力地證明 ExoView 是外泌體檢測(cè)的一大利器。
服務(wù)推出至今，短短兩年時(shí)間已經(jīng)助力多個(gè)中國(guó)客戶(hù)發(fā)表高水平文獻(xiàn)！
■ 南方醫(yī)科大學(xué)在《Chemical Engineering Journal 》發(fā)表文章
■ 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院在《Bioengineering & Translational Medicine 》發(fā)表文章
■ 上海大學(xué)在《Journal of extracellular vesicles 》發(fā)表文章
■ 中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院在《Lab on a Chip 》發(fā)表文章
■ 北京天壇醫(yī)院、國(guó)家納米科學(xué)中心、北京航空航天大學(xué)在《Advanced Science 》發(fā)表文章
■ 同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院、上海思路迪轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)團(tuán)隊(duì)在《Journal of Nanobiotechnology 》發(fā)表文章
■ 山東千佛山醫(yī)院在《NANO LETTERS 》發(fā)表文章
■ 陜西師范大學(xué)在《Food & Function 》發(fā)表文章
■ 南京大學(xué)在《Frontiers in Cell and Developmental Biology 》發(fā)表文章
■ 中山大學(xué)在《ACS NANO 》發(fā)表文章
■ 北京理工大學(xué)在《Acta Pharmaceutica Sinica B 》發(fā)表文章
■ 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院在《International Journal of Nanomedicine 》發(fā)表文章
樣機(jī)體驗(yàn)：
為了更好的服務(wù)中國(guó)客戶(hù)，Quantum Design 中國(guó)子公司在北京建立了專(zhuān)業(yè)的客戶(hù)服務(wù)中心，正式推出專(zhuān)業(yè)的全面外泌體表征測(cè)試服務(wù)，您只需要極少量樣品即可獲得全面的外泌體表征數(shù)據(jù)！歡迎各位老師垂詢(xún)！
參考文獻(xiàn)：
[1] Akira Yokoi …& Hiroaki Kajiyama. (2023) Identifying high-grade serous ovarian carcinoma– specific extracellular vesicles by polyketone-coated nanowires. SCIENCE ADVANCES, 9, eade6958.
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