實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)!盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)構(gòu)建小鼠膿毒癥
什么是膿毒癥?
膿毒癥(Sepsis)是宿主對(duì)感染的反應(yīng)失調(diào)而引起的危及生命的器官功能障礙。膿毒癥可以由任何部位的感染引起,是嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、休克、感染和外科大手術(shù)等常見的并發(fā)癥,病死率較高。
目前針對(duì)膿毒癥的治療仍然沒有相應(yīng)的特別效果的藥物。疾病模型的建立有助于人們更好地探討膿毒癥的發(fā)病機(jī)制和尋找有效的治療措施,獲得更早的診斷并采取干預(yù)措施,從而改善膿毒癥患者的預(yù)后。
盲腸結(jié)扎穿孔模型是最臨近于人類膿毒癥機(jī)制的模型,被稱為膿毒癥模型的“金標(biāo)準(zhǔn)”。該模型通過結(jié)扎并穿孔盲腸,使混有多種細(xì)菌的腸內(nèi)容物持續(xù)溢入腹腔,從而模擬細(xì)菌性腹膜炎的臨床特點(diǎn)。當(dāng)細(xì)菌轉(zhuǎn)移進(jìn)入血液時(shí),會(huì)誘發(fā)全身性炎癥反應(yīng),最終導(dǎo)致多器官衰竭和死亡。
方法:
1.BALB/c雄性小鼠(6-8周) 小鼠
2.適應(yīng)性喂養(yǎng)1周
3.禁食12小時(shí)
4.麻醉(腹腔注射1%CHN?NaO?)
5.左下腹剃毛,消毒并用鑷子拉出盲腸
6.手術(shù)縫線結(jié)扎75%的盲腸
7.擠出適量腸內(nèi)容物,縫合
8.皮下注射預(yù)溫37°C無菌生理鹽水(1 mL)
具體步驟:
選擇6-8周BALB/c雄性小鼠,適應(yīng)環(huán)境一周,禁食12 h后腹腔注射1%(CHN?NaO?)麻醉。左下腹剃毛,碘伏消毒,開一小口(1 cm左右),用鑷子輕輕將盲腸拉出,用不能吸收的3-0手術(shù)縫線結(jié)扎75%的盲腸,用21號(hào)針頭穿孔,從穿刺處擠出適量腸內(nèi)容物,再將盲腸放回腹腔,分別縫合腹膜和皮膚。小鼠皮下注射預(yù)溫37℃無菌生理鹽水(1 mL)進(jìn)行液體復(fù)蘇。
Tips:
(1) 小鼠盲腸一般在其左下腹;
(2)結(jié)扎長(zhǎng)度是模型死亡率的主要決定因素;結(jié)扎75%或以上的盲腸,為重度膿毒癥(生存率為0%),結(jié)扎50%的盲腸,為中度膿毒癥(生存率約為40%)。
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