PVDF超濾膜是一種以聚偏氟乙烯（PVDF）為主要原料制成的超濾膜，具有優(yōu)異的耐化學性、耐高溫性、耐候性和機械強度，普遍應用于水處理、食品飲料、生物醫(yī)藥等領域的分離、濃縮和純化等工藝。那么，你了解PVDF膜的使用技巧嗎？一起來學習一下吧！

PVDF膜使用時要用甲醇浸泡？
PVDF本質(zhì)是一種疏水性的聚合物，在水溶液中不會浸濕。為了在水性緩沖液使用PVDF膜，首先必須將其浸泡在50%醇溶液中。甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。之后必須用水反復沖洗以去除醇類，經(jīng)預處理的膜現(xiàn)在可以直接放入轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡。
PVDF膜浸泡步驟？

濕轉(zhuǎn)：

(1) 將膜在甲醇中浸泡30秒。膜應均勻的從不透明變成半透明。

(2) 小心的將膜放入雙蒸水中，浸泡2分鐘。

(3) 小心的將膜放入轉(zhuǎn)印緩沖液中，至少平衡5分鐘。

半干轉(zhuǎn)：

第一步甲醇浸泡只需15秒，其他步驟同上。

PVDF膜的孔徑怎么選？

一旦膜被浸濕，蛋白結合可通過蛋白與膜的接觸而實現(xiàn)。由于蛋白與膜的結合貫穿整個膜的厚度，結合能力是由孔的內(nèi)部表面積來決定的。0.2um PVDF膜內(nèi)部表面積大約是0.45um PVDF 膜的三倍，使其吸附能力更高。可以看出，20KD以下蛋白選用0.2um PVDF膜, 20KD以上蛋白選用0.45um PVDF膜。
怎樣確定PVDF膜是否轉(zhuǎn)成功？

可以采用染色法來確定轉(zhuǎn)膜是否成功，PVDF膜染料分2類，可逆染料在評估印跡之后可被從膜上洗掉。不干擾后續(xù)的免疫檢測或印跡上蛋白的其它分析。常用的可逆蛋白染料是麗春紅?？赡嫒玖现饕秉c在于它們的靈敏度不及不可逆染料。由于印跡上高豐度蛋白的染色模式通常也能很好地提示低豐度蛋白在多大程度上轉(zhuǎn)移，可逆染料靈敏度不高的缺點在大部分情況下并不影響使用。

不可逆染料通常表現(xiàn)出最佳的靈敏度，但會干擾蛋白的進一步分析。不可逆染料有氨基黑和考馬斯亮藍等。

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