植物活體轉化系統(tǒng)是一類生物技術設備,用于將植物活體組織轉化為細胞、組織或器官等。
植物轉化,是指利用重組DNA技術、細胞組織培養(yǎng)技術或種質系統(tǒng)轉化等技術,將外源基因導入植物細胞或組織中,并使之在受體細胞中得以充分表達,獲得使外源基因穩(wěn)定表達的可育植株的過程。
植物轉化技術分為直接基因轉移和生物介導轉化兩大類技術。植物遺傳轉化是應用重組DNA技術、細胞組織培養(yǎng) 技術或種質系統(tǒng)轉化技術,有目的地將外源基因或DNA片段插入到受體植物基因組中并通過減數(shù)分裂獲得新植株的技術。
方法:
(1)農(nóng)桿菌轉化法。農(nóng)桿菌是土壤中的一種微生物,在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物,對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力。
(2)花粉管通道法:在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在開花、受精過程中形成的花粉管通道,將外源DNA導入受精卵細胞。
(3)基因槍法:通過動力系統(tǒng)將帶有基因的金屬顆粒(金?;蜴u粒),將DNA吸附在表面,以一定的速度射進植物細胞,由于小顆粒穿透力強,故不需除去細胞壁和細胞膜而進入基因組,從而實現(xiàn)穩(wěn)定轉化的目的。
(4)導入微生物受體細胞感受態(tài)法:先用Ca離子處理細胞,使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境DNA分子的生理狀態(tài),這種細胞為感受態(tài)細胞,后將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中,在一定溫度下促使感受態(tài)細胞吸收DNA分子。
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