在LC-MS分析中,為了改善化合物的分離度和信號強度,往往會在流動相中加入某些添加劑。如,使用緩沖鹽來控制色譜分離的PH值,另一方面也可使分析物在電離過程中更易離子化。
那用于LC-MS的緩沖鹽要如何選擇呢?
首先,最好是易揮發(fā)的,如:甲酸/乙酸,常用濃度在0.1%~1%之間,另外,對于一些酸性分析物,在較強的酸性流動相環(huán)境中有離子化抑制現(xiàn)象,可加入甲酸銨或者乙酸銨來調(diào)節(jié),或配制出一定pH的緩沖體系。
另外,選擇試劑的質(zhì)量也是關(guān)鍵。最好使用質(zhì)譜級的試劑,有更高的試劑純度。避免引入更多的雜質(zhì),降低儀器的信噪比,甚至污染質(zhì)譜源,增加儀器的維護成本。
CNWLC-MS級甲酸在液質(zhì)聯(lián)用中的適應(yīng)性測試
儀器條件:ESI+,m/z范圍200-1100
進(jìn)樣方式:針泵注射
樣品:甲酸緩沖溶液基于利血平標(biāo)準(zhǔn)品
圖1 CNWLC-MS級甲酸質(zhì)譜圖
圖2 其他級別甲酸質(zhì)譜圖
最后,好的實驗習(xí)慣也是關(guān)鍵,注意以下幾點內(nèi)容:
1.緩沖液配制完成后需進(jìn)行過濾;防止配制過程中落入灰塵、顆粒物和鹽沉淀等;
2.緩沖液非常容易滋生微生物,重新配制前應(yīng)清洗容器。并設(shè)置合理的有效期限;
3.由于LC-MS緩沖液的揮發(fā)性,會導(dǎo)致其pH值隨時間而改變,注意使用時效;
4.在未洗凈色譜系統(tǒng)中緩沖液的情況下,應(yīng)避免長時間關(guān)機。
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