大多數(shù)情況下IIF法需在固定的組織切片上進行抗體檢測,然后組織固定可影響抗體的反應(yīng)性,在ICA檢測時需采用冷凍切片而不是甲醛等固定方法。
在檢測胰島細胞表面抗體(1CSA)時,需采用經(jīng)膠原酶消化后游離、懸浮的大鼠、小鼠或人胰島細胞。細胞懸浮于組織培養(yǎng)基中有助于修復(fù)酶消化時膜損傷。然后采用不同的第二抗體檢測,包括熒光或放射性標記抗體,和125I標記的蛋白A。ICSA診斷敏感性不足50%,特異性高達95%~99%。
在功能檢測中,ICSA陽性的IDDM血清抑制游離胰島細胞受葡萄糖刺激后的胰島素釋放,將人ICSA陽性血清被動灌注人小鼠胰腺中,可抑制其釋放胰島素,而且表面結(jié)合的抗體能激活補體從而參與補體依賴的抗體介導(dǎo)的細胞毒作用(C,AMC)。C,AMC是體外檢測ICSA的敏感方法,據(jù)報道其診斷敏感性為30%~50%,特異性96%~98%,約30%I級IDDM患者的C,AMC為陽性。由于ICSA檢測既繁瑣又很難標準化。
經(jīng)典的ICA檢測不僅具有很高的疾病預(yù)測價值,而且可同時檢測多種胰島細胞抗原相應(yīng)的自身抗體,其敏感性較GAD、胰島素和其他單一抗原抗體檢測要高。對新發(fā)病的1型糖尿病患者的敏感性超過80%,但特異性較其他單抗體要低,1型糖尿病高發(fā)病人群中·ICA陽性率高于健康人群。瑞典有4.1%健康兒童存在ICA,英國有2.8%,法國有1.8%,西班牙僅0.35%。在這些國家中l(wèi)型糖尿病發(fā)病頻率相似。反之,ICA陽性人群患1型糖尿病的危險性遠遠高于正常人。例如高滴度ICA(如大于20-40JDF單位)標志著疾病的進展期。比較“歲以下:[CA陽性的年輕青少年,其患糖尿病的危險性較40歲以上者的高15倍。因此,在一項研究中,調(diào)查了57名ICA陽性者,其中25名13.2歲以下研究組中有10名zui終發(fā)展成糖尿病,而25名年齡在13.2~工9歲組中僅4名發(fā)展為糖尿病,57位ICA陽性者僅4名年齡超過19.5歲。家族成員中有ICA陽性者,其發(fā)展為l型糖尿病的風(fēng)險增加,其患病風(fēng)險率高于HLADQ等位基因攜帶者。ICA陽性并伴有其他自身抗體如GAD或IAA抗體者,較單純ICA陽性者發(fā)展成1型糖尿病的危險率高出3~5倍。ICA持續(xù)價陽性(如>g0JDF單位)者,較ICA反復(fù)波動或一過性增高者有更大的危險性。
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